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    1.

    奥氮平介导环磷酸腺苷反应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子/酪氨酸蛋白激酶受体B通路对精神分裂模型大鼠的神经修复作用

    姚素华 鄢骏 谢芳 林春华 黄争春
    解剖学报    2023, 54 (6): 660-667.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2023.06.006
    摘要46)      PDF(pc) (5379KB)(342)    收藏

    目的  探讨奥氮平通过对环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB/脑源性神经营养因子(BDNF/酪氨酸蛋白激酶受体BTrkB)通路的影响对精神分裂模型大鼠的神经修复作用。  方法  将60只大鼠纳入对照组、模型组、奥氮平低、中、高剂量组,各组均10只。模型组、奥氮平低、中、高剂量组大鼠进行MK-801腹腔注射 0.2 mg/(kg ·d), 对照组注射等量生理盐水。模型建立成功24 h后,奥氮平低、中、高剂量组分别以0.5、1.0~1.5 mg/(kg ·d)奥氮平溶液灌胃,对照组、模型组同剂量生理盐水灌胃。按照共济失调和刻板行为标准对大鼠行为学进行评分;Morris水迷宫实验评定大鼠认知功能及学习能力;ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;观察海马组织病理学变化;检测海马区细胞凋亡及CREB/BDNF/TrkB通路相关蛋白表达。  结果  与对照组比较,模型组大鼠共济失调、刻板行为评分、TNF-α、IL-6表达、细胞凋亡率极显著增加(P<0.01),奥氮平低、中剂量组显著增加(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠跨越平台次数、目标象限停留时间、CREB、磷酸化CREB(p-CREB)、磷酸化TrkB(p-TrkB)、TrkB、BDNF蛋白相对表达极显著减少(P<0.01),奥氮平低、中剂量组显著减少(P<0.05)。与模型组比较,奥氮平低、中剂量组跨越平台次数、目标象限停留时间显著增加(P<0.05),奥氮平高剂量组极显著增加(P<0.01)。模型组以及奥氮平低剂量组中海马细胞肿大明显、细胞核破碎分裂、固缩,组织排列杂乱;奥氮平中、高剂量组大鼠海马细胞中少见破碎分裂以及核固缩现象,整体组织与对照组大鼠相似。   结论  奥氮平对精神分裂症模型大鼠的神经修复作用机制涉及到改善大鼠认知功能受损、保护大鼠海马神经细胞以及激活CREB/BDNF/TrkB信号通路的表达。

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    2.

    高龄大鼠心室肌间质弹性纤维和胶原纤维的结构分布特征及其机制

    许亚平 余悦欣 陈金福 王柯柯 郭志坤
    解剖学报    2023, 54 (6): 716-721.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2023.06.014
    摘要41)      PDF(pc) (12839KB)(333)    收藏

    目的 探讨高龄大鼠心室肌间质弹性纤维和胶原纤维的结构分布特征及其机制。  方法 青年SD大鼠(24周)和高龄SD大鼠(104周)各5只,小动物超声检测心功能,采用改良Weigert弹力纤维染色、免疫组织化学、免疫荧光和Western blotting,分别检测心室肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维及蛋白、弹性纤维及蛋白、基质金属蛋白酶2 (MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达变化。  结果 高龄大鼠心室肌间质Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白丰富,包绕心肌细胞周围,与青年大鼠相比,高龄大鼠心室肌间质胶原蛋白含量明显增多(P<0.05)。高龄大鼠心室肌间质弹性纤维分布广泛,与青年大鼠比较,高龄大鼠心室肌间质弹性纤维数量和弹性蛋白水平均明显减少(P<0.05)。高龄大鼠心室肌MMP-2和MMP-9水平增高,且与弹性蛋白水平呈相互消长关系。高龄大鼠心室肌TIMP-2水平随年龄增加而降低。  结论 高龄大鼠心室肌间质胶原纤维数量和弹性纤维数量存在相互消长的关系。随年龄的增长大鼠心室肌间质TIMP-2和弹性纤维含量减少, 同时胶原纤维与弹性纤维比例失调。

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    3.

     补体C3a受体在盲肠结扎穿孔致脓毒症大鼠认知障碍中的作用及机制

    徐颖 刘斌 郑兴 何宗钊
    解剖学报    2023, 54 (6): 668-675.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2023.06.007
    摘要40)      PDF(pc) (6273KB)(331)    收藏

    目的  探讨补体C3a受体(C3aR)在盲肠结扎穿孔(CLP)致脓毒症大鼠认知障碍中的作用及潜在的作用机制。  方法  132只大鼠随机分为假手术组(sham组)和脓毒症组(CLP组),每组的初始数量为66只动物,每个时间点设置22只动物。构建SD大鼠CLP动物模型,于术后1、15和30 d取血清和脑(海马和前额叶皮质),采用ELISA法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6水平。Western blotting检测脑标本中Tau蛋白(Tau)、磷酸化Tau(p-Tau)和C3aR蛋白表达。将66只大鼠随机分为3组:sham组、CLP组和C3aR拮抗剂(C3aRa)干预组。于CLP后第15、17和19天,C3aRa干预大鼠于CLP术后第30天接受抑制性回避测试和物体识别测试,并采用免疫荧光法检测海马中C3aR、离子钙接头蛋白分子1(Iba1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和p-Tau表达。  结果  与sham组相比,CLP组大鼠血清及脑组织中TNFα、IL-1β和IL-6在CLP后30 d内先增加后减少。在CLP组海马组织和前额叶皮层中分别观察到术后30 d和术后1、15 d Tau磷酸化显著增强(P<0.05)。与sham组相比,CLP组术后15 d和30 d在大鼠海马和前额叶皮层中均观察到C3aR蛋白水平显著增加(P<0.05)。与CLP组相比,C3aRa干预后大鼠海马内源性C3aR含量明显降低(P<0.05),Iba1、GFAP和p-Tau免疫染色明显抑制(P<0.05)。C3aRa干预CLP大鼠可逆转认知功能损伤。  结论  C3aR在脓毒症诱导神经退行性过程中相关生物化学和行为学变化发展中发挥重要作用。通过在海马注射C3aRa能够改善由脓毒症引发的神经退化过程。

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    4. 基于c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路探讨阿魏酸钠对偏头痛大鼠炎症反应的抑制作用
    梁盼盼 禹爱梅 杜静 寇文辉 王欢欢 宋爱霞
    解剖学报    2023, 54 (6): 652-659.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2023.06.005
    摘要38)      PDF(pc) (12512KB)(329)    收藏
    目的  探讨阿魏酸钠(SF)通过调控JNK/p38 MAPK信号通路对偏头痛大鼠炎症反应的抑制作用。   方法  腹腔注射硝酸甘油制备偏头痛大鼠模型,模型制作成功后随机分为模型组、SF低剂量(SF-L)组(50 mg/kg)、 SF高剂量(SF-H)组(100 mg/kg)、SF+JNK抑制剂(SF+SP600125)组(SF 100 mg/kg +SP600125 10 mg/kg)、SF+JNK激活剂[SF+茴香霉素(AN)]组(SF 100 mg/kg + AN 5 mg/kg),每组12只,另取12只SD大鼠不做处理作为空白组。给药结束24 h后观察各组大鼠行为学变化,ELISA法检测血清中5-羟色胺(5-HT)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、白细胞介素 6(IL-6)水平,TUNEL染色观察脑组织神经元凋亡情况,免疫组织化学法检测脑组织中 TNF-α、 IL-6、降钙素基因相关肽(CGRP)表达,Western blotting法检测脑组织中JNK/p38 MAPK通路相关蛋白的表达。   结果  与空白组比较,模型组大鼠挠头次数以及爬笼次数明显增加,神经元凋亡率显著升高;血清5-HT含量显著降低,NO、TNF-α和IL-6水平显著升高;脑组织中TNF-α、IL-6和CGRP表达以及磷酸化JNK(p-JNK)/JNK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)/p38 MAPK比值均显著升高(均P<0.05)。与模型组比较,SF-L组、SF-H组大鼠挠头次数及爬笼次数显著减少,神经元凋亡率显著降低;血清中5-HT含量显著升高,NO、TNF-α和IL-6水平显著降低;脑组织中TNF-α、IL-6和CGRP表达以及p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值均显著降低(均P<0.05)。与SF-H组比较,SF+SP600125组能够显著增强SF对偏头痛大鼠的保护作用;SF+AN组能够显著逆转SF对偏头痛大鼠的保护作用。   结论  SF可能通过抑制JNK/p38 MAPK信号通路的表达,有效抑制偏头痛大鼠神经源性炎症反应,减少神经元凋亡,实现对偏头痛大鼠的保护作用。
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    5.

    小鼠棕色脂肪透射电子显微镜样品固定方法的改良

    魏纯纯 王平 林方兴 麻献华 章卫平 谢志芳
    解剖学报    2023, 54 (6): 738-743.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2023.06.017
    摘要44)      PDF(pc) (5748KB)(328)    收藏

    目的 改良小鼠棕色脂肪组织透射电子显微镜样品固定方法,以获得更好的线粒体和脂滴的超微结构。  方法 对小鼠棕色脂肪组织的固定方法进行优化,主要包括将前固定剂中多聚甲醛的浓度从2%提高到4%;将后固定剂四氧化锇的缓冲液换成咪唑缓冲液;同时采用心脏灌注和浸泡结合的固定方式。比较两种方法制备的细胞超微结构(每组3只小鼠);并将改良后的方法应用于线粒体和脂滴的定量分析实验。  结果 与改良前相比,用改良后的方法制备的棕色脂肪细胞的线粒体嵴及其他膜性细胞器的结构更完整;脂滴呈现为高电子密度的圆形结构。用该方法观察到了冷适应后棕色脂肪细胞线粒体嵴密度升高和脂滴增多现象。  结论 改良后的方法能更好地保存棕色脂肪细胞中的细胞器特别是线粒体和脂滴的超微结构,可应用于研究该类型细胞在不同生理或病理条件下发生的超微结构变化。

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    6.

    白细胞介素6对脂多糖诱导所致类子痫前期大鼠有核红细胞的影响

    刘丽平 朱梦妮 徐慧
    解剖学报    2023, 54 (6): 722-729.   DOI: 10.16098/j.issn.052-1356.2023.06.015
    摘要32)      PDF(pc) (7886KB)(322)    收藏

    目的 探讨白细胞介素(IL)-6对脂多糖(LPS)诱导类子痫前期大鼠有核红细胞的影响。  方法 采用ELISA和免疫组织化学法检测正常妊娠、轻和重度子痫前期患者外周血与胎盘中IL-6的表达;采用流式细胞术和免疫荧光法检测母体有核红细胞比例。SD妊娠大鼠随机分为3组:对照组、LPS组和LPS+anti-IL-6组,检测外周血和胎盘中IL-6、有核红细胞比例、JAK2/MEK和PI3K/Akt信号基因表达。  结果 子痫前期患者的IL-6明显高于正常妊娠者。相比于对照组,LPS组外周血和胎盘中IL-6、有核红细胞比例和JAK2、P85、Akt、P65、IL1B mRNA表达明显增加,胎鼠体重明显降低;相比于LPS组,LPS+anti-IL-6组外周血和胎盘中IL-6表达、有核红细胞比例、JAK2、P85、Akt、P65和IL-1B mRNA表达明显减少。  结论 子痫前期患者外周血和胎盘IL-6上调伴随外周血有核红细胞增多,在体中和IL-6可能通过下调有核红细胞JAK2/PI3K/Akt/NF-κB信号介导的IL-1B表达从而保护类子痫前期大鼠。

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    7.

    基于下肢全长CT分析胫骨平台后倾角和胫骨扭转角与复发性髌骨脱位的相关性

    袁硕 赵安全 黄其日麦拉图 吴海贺 徐永胜 齐岩松 包呼日查
    解剖学报    2023, 54 (6): 703-709.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2023.06.012
    摘要37)      PDF(pc) (3938KB)(321)    收藏

    目的 通过测量并对比复发性髌骨脱位患者与正常人群外侧胫骨平台后倾角(LPTS)、内侧胫骨平台后倾角(MPTS)和胫骨扭转角(TTA),分析LPTSMPTSTTA与复发性髌骨脱位之间的相关性。  方法 选取2019年7月~2021年6月就诊的33例(44膝)复发性髌骨脱位患者,列为研究组;另外选择同一时期因怀疑有髂血管、下肢血管疾病就诊的23例(46膝)受试者,列为对照组。所有纳入本研究的受试者均有下肢全长CT数据,使用Mimics 21.0软件重建三维模型,导入3-Matic软件中,测量并比较两组LPTS、MPTS和TTA。  结果 研究组LPTS、MPTS和TTA分别为(7.69±1.42)°、(10.06±1.71)°和(36.42±8.13)°,对照组LPTS、MPTS和TTA分别为(8.42±1.65)°、(10.44±0.86)°和(25.77±3.90)°;研究组与对照组之间比较,不同性别、侧别之间LPTS、MPTS和TTA差异均无统计学意义(P>0.05);研究组与对照组相比,LPTS偏小,差异有统计学意义(P<0.05);研究组MPTS与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);研究组与对照组相比,TTA偏大,差异有统计学意义(P<0.05);研究组与对照组相比,LPTS和MPTS不对称性偏大,差异有统计学意义(P<0.05)。  结论 复发性髌骨脱位患者外侧胫骨平台后倾角与正常人群相比偏小,而内侧胫骨平台后倾角无差异;复发性髌骨脱位患者胫骨扭转角较正常人偏大;外侧胫骨平台后倾角和胫骨扭转角与复发性髌骨脱位存在一定相关性,对复发性髌骨脱位具有一定的诊断能力。

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    8. 低雌激素状态下大鼠海马及纹状体Nogo-A的表达变化
    王文娟 丁雨桐 苏昊 任捷 孙艳荣 王涵菲 陆嘉莉 张林倩 白钰 秦丽华
    解剖学报    2023, 54 (6): 620-627.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2023.06.001
    摘要90)      PDF(pc) (9643KB)(294)    收藏
    目的  通过实验观察低雌激素状态下大鼠记忆功能的改变以及海马和纹状体Nogo-A的表达变化,阐明Nogo-A在更年期神经退行性变如记忆功能减退中可能发挥的重要作用。   方法  45只雌性SD大鼠分为假手术组,去卵巢组和去卵巢后雌激素治疗组,每组15只。去卵巢手术后2周开始给予药物治疗。雌激素治疗组于腹股沟皮下注射溶于无菌芝麻油的雌激素[25 μg/kg·d)]。假手术组和去卵巢组给予等量的无菌芝麻油。药物治疗6周后,通过条件恐惧训练实验观察不同组大鼠记忆功能差异,通过免疫组织化学和免疫印迹法观察Nogo-A在3组大鼠海马和纹状体的表达变化。   结果  与假手术组和雌激素治疗组相比,去卵巢组大鼠出现记忆功能明显减退,其海马和纹状体Nogo-A阳性神经元数量显著增加(P< 0.05)。雌激素治疗组大鼠记忆功能明显改善,海马和纹状体Nogo-A阳性神经元数量显著减少(P< 0.05),与假手术组差异不明显(P > 0.05)。免疫印迹实验结果与上述免疫组织化学结果变化趋势一致。   结论  低雌激素状态下海马及纹状体Nogo-A表达上调,这可能是更年期妇女记忆功能减退的重要原因之一。
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    9. Roscovitine挽救帕金森病小鼠相关脑区神经元丢失和神经炎症
    刘叶 楚亚楠 徐岑璐 何佳澄 苏炳银 太颢然
    解剖学报    2023, 54 (6): 635-643.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2023.06.003
    摘要62)      PDF(pc) (10218KB)(278)    收藏
    目的 探讨细胞周期依赖性激酶(Cdk)5抑制剂Roscovitine对1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶 (MPTP) 诱导的帕金森病 (PD) 模型小鼠相关脑区病理变化的影响及可能机制。    方法 经MPP+处理的细胞,采用Western blotting检测 Roscovitine对P25、Cdk5蛋白的相对表达水平的影响;ELISA法检测Roscovitine对多巴胺的释放的影响。将15只雄性 C57BL/6 N小鼠随机分为3组,分别为PBS组、MPTP组、MPTP + Roscovitine组,每组 5只。 MPTP组与MPTP + Roscovitine组从第3天起连续7 d腹腔注射25 mg/(kg ·d) MPTP制备PD模型小鼠,MPTP + Roscovitine组连续10 d腹腔注射10 mg/(kg ·d) Roscovitine,PBS组给予等容量的PBS。末次给药24 h后,采用步态分析、旷场实验、转棒实验等检测Roscovitine对PD模型小鼠行为学的影响;采用免疫组织化学法检测Roscovitine对PD模型小鼠黑质、纹状体酪氨酸氢化酶(TH)及PD相关脑区的神经元、神经胶质细胞、神经炎症等相关指标表达的影响。    结果  Western blotting和ELISA结果显示,经MPP+处理的细胞P25、Cdk5蛋白表达水平升高,多巴胺释放量相对降低(P<0.01),Roscovitine可降低P25、Cdk5蛋白表达水平(P<0.05)、增加多巴胺释放量(P<0.05); 与PBS组相比,MPTP组PD模型小鼠存在运动功能障碍,且黑质、纹状体内TH+细胞数下降(P<0.01),PD相关脑区内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、Iba1、核因子κB (NF-κB)抑制物激酶α(IKKα)、p-IKK阳性细胞数升高(P<0.05);而Roscovitine干预显著改善了运动能力(P<0.01),增加TH(P<0.01)、降低GFAP、Iba1、IKKα、p-IKK(P<0.05)的表达。    结论 Roscovitine可减少MPTP 模型小鼠 PD 相关脑区的多巴胺能神经元丢失和胶质细胞激活,抑制 NF-κB 信号通路激活,从而发挥神经保护作用。
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    10.
    褪黑素调控下丘脑PI3K/Akt/mTOR信号延缓雌性小鼠青春期启动的机制
    陈子璇 司丽娜 舒薇菡 张欣 魏晨阳 程露阳 杨松鹤 乔跃兵
    解剖学报    2023, 54 (6): 644-651.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2023.06.004
    摘要48)      PDF(pc) (7379KB)(271)    收藏
    目的  探讨褪黑素(MLT)对雌性小鼠青春期启动的影响以及对下丘脑磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路表达水平的影响。   方法  78只20日龄雌性KM小鼠,随机分为褪黑素(MLT)组和生理盐水(NS)组,每组39只。22日龄开始,给予MLT组皮下注射1mg/kg褪黑素,给予NS组注射等体积的生理盐水。青春期启动前选取32日龄为取材点,两组分别处死13只小鼠,青春期启动后选取37、42日龄为取材点,两组分别处死13只小鼠。观察小鼠阴门开启时间;取卵巢、子宫称重计算器官指数;HE染色观察卵巢黄体数量;ELISA法检测血清黄体生成素(LH)水平;Real-time PCR和Western blotting检测下丘脑PI3K/Akt/mTOR通路mRNA和蛋白表达水平。   结果  与生理盐水组相比,褪黑素组小鼠阴门开启时间显著推迟(P<0.05);卵巢、子宫的大小和指数明显下降(P<0.05);血清LH水平明显下降(P<0.05);下丘脑PI3K/Akt/mTOR通路mRNA和蛋白的表达水平显著下降(P<0.05)。  结论  褪黑素可以延缓小鼠青春期启动,机制可能与抑制下丘脑PI3K/Akt/mTOR信号通路相关。
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    11. 葛瑞林对心肌梗死致心力衰竭大鼠保护作用及生长分化因子-15的影响
    田国忠* 魏罡 李梅秀 钟震亚 朱金玲 李艳君 杨宇 魏伟
    解剖学报    2013, 44 (2): 274-278.   DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.02.025
    摘要495)      收藏

    目的 制作葛瑞林(Ghrelin)早期干预心肌梗死致心力衰竭(HF)大鼠模型,探讨生长分化因子-15(GDF-15)表达水平与HF程度相关性,为HF临床治疗奠定理论学基础。方法 80只Wistar大鼠于造模成活6h后被随机分为假手术(A)组(n =18)、HF模型(B)组(n =27)和HF模型干预(C)组(n =27),通过酶联免疫吸附(ELISA)及实时定量 PCR,于造模后3d、1周、2周、4周、8周分别检测各组血中GDF-15表达变化及2周、4周、8周末3组HF大鼠心肌组织中GDF-15 mRNA表达水平的改变;电镜下观察各组大鼠心肌组织超微结构,并均于处死前行B型超声检测心功能。结果 B组大鼠血GDF-15及心肌组织GDF-15 mRNA表达水平明显高于C组,低于A组,差异具有统计学意义(P <0.001);8周末超声检测结果显示,B组大鼠较A、C两组大鼠心脏增大明显,左室舒张及收缩末期内径均明显增加,差异具有统计学意义(P <0.001);B组大鼠左室舒张末期室间隔厚度、左室后壁厚度及射血分数值均较A、C两组大鼠显著降低,差异具有统计学意义(P <0.001);此外,心肌超微结构显示C组较B组改变明显。结论 Ghrelin早期干预HF大鼠能改善心功能,降低死亡率;GDF-15表达水平能反映HF病变程度,并可作为辅助检测HF新的标记物。

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    12. 穹隆海马伞切割后大鼠海马内RUNX1T1 mRNA和蛋白的表达变化
    邹琳清 金国华* 王海琴 李浩明 朱培培 秦建兵
    解剖学报    2013, 44 (6): 767-771.   DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.06.007
    摘要399)      收藏

    目的 观察穹隆海马伞切割后不同时间点海马内RUNX1T1 mRNA和蛋白的表达变化及定位。方法 行穹隆海马伞切割术,制备模型大鼠。实验分为正常组、切割3d组、切割7d组、切割14d组、切割21d组、切割28d组。1.提取海马组织总mRNA,用Real-time PCR 检测大鼠海马组织中RUNX1T1mRNA 的表达;2.提取海马组织总蛋白,用Western blotting 检测海马内RUNX1T1蛋白的表达;3.行脑冷冻切片,行RUNX1T1免疫荧光检测和Hoechst标记,观察海马齿状回中RUNX1T1/Hoechst双标阳性细胞。 结果 Real-time PCR检测显示,切割3d组海马组织中RUNX1T1 mRNA的表达明显上调,其余各组差异不明显;Western blotting检测结果显示,正常组海马中有微量RUNX1T1蛋白表达,而切割3d组海马组织中RUNX1T1蛋白表达量明显上升,并达到高峰,7d时仍有较多的表达,此后,14d、21d、28d组中RUNX1T1蛋白表达很快又恢复到正常水平;免疫荧光检测结果表明,正常组海马齿状回中有少量的RUNX1T1/Hoechst阳性细胞,切割3d组海马齿状回中RUNX1T1/Hoechst阳性细胞数量最多,切割7d组逐渐减少,切割14d组、21d组和28d组与正常组差别不明显。结论 穹隆海马伞切割后海马内RUNX1T1 mRNA和蛋白表达在早期呈短暂性上调,并定位于海马齿状回颗粒下层,推测可能与海马神经再生过程中神经干细胞向神经元分化有关。

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    13. 白藜芦醇对胰岛素抵抗模型中同型半胱氨酸代谢关键酶的调控
    范晓明 张铁军 康丽 刘世昌 郭家智 陆地 桂莉* 李树德*
    解剖学报    2014, 45 (1): 58-63.   DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2014.01.011
    摘要401)      收藏

    目的 探讨在胰岛素抵抗动物模型中白藜芦醇(RES)对同型半胱氨酸(Hcy)代谢关键酶调控的分子机制。方法 6周健康SD大鼠利用高脂高糖饮食加高脂灌胃3个月制造胰岛素抵抗模型。确定胰岛素抵抗模型建立成功后,随机分为胰岛素抵抗组和白藜芦醇干预组,每组10只。胰岛素抵抗组继续高脂高糖饮食,白藜芦醇干预组高脂高糖饮食加30mg/(kg·d)白藜芦醇灌胃。8周后,空腹状态下测定每组体重和血浆中Hcy、葡萄糖(GLU)、胰岛素(INS)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的浓度,计算胰岛素抵抗指数(IRI);免疫组织化学、RT-PCR和Western blotting检测肝脏组织亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、胱硫醚合成酶(CBS)、蛋氨酸合成酶(MTR)表达的变化。 结果 白藜芦醇干预组和胰岛素抵抗组比较,空腹GLU、INS、TG的浓度降低(P<0.05), IRI降低(P<0.05),Hcy浓度降低(P<0.05),体重和TC差异无统计学意义(P>0.05)。MTHFR和CBS的mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),MTR的mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 胰岛素抵抗条件下,白藜芦醇可能通过上调MTHFR和CBS的表达,促进同型半胱氨酸的转化,可能在减轻胰岛素抵抗中具有关键的作用。

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    14. 下丘脑核团的全脑MRI与断层解剖对比
    张锐 邓雪飞 徐朝阳 朱友志 张禹 莫子 骆祥伟 韩卉*
    解剖学报    2013, 44 (3): 360-363.   DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.03.014
    摘要606)      收藏

    目的 通过同例成人头颅标本磁共振成像与断层解剖图像的比较,明确全脑磁共振影像中下丘脑核团的形态、位置及信号特点。方法
    选取6例成人头颅标本,分别行磁共振检查及断层标本制作,其中水平面、矢状面及冠状面各2例,对比观察同例标本下丘脑结构的影像解剖与断
    层解剖特点。结果 穹隆及前连合在T1WI及T2WI中均显示为结构清晰的低信号结构,以T1WI为佳。通过穹隆及前连合等标志性结构定位,室旁核
    在T1WI中呈等信号,边界清晰,在T2WI中呈等信号,边界清晰;乳头体核在T1WI中呈等信号,边界清晰,在T2WI中呈混杂信号,边界结构显示不
    清;视上核在T1WI中呈等信号,与周围核团分界欠清,T2WI图像上显示为与周围灰质相同的等信号区。结论 磁共振临床常规头颅扫描序列可发
    现下丘脑区部分核团。

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    15. 人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞连续移植中对延缓细胞衰老的作用与去乙酰化酶6/核因子-κB信号轴的关系
    周玥* 王亚平 王建伟 丁继超
    解剖学报    2015, 46 (5): 623-628.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2015.05.008
    摘要631)      收藏

    目的 探讨人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞(HSC/HPC)连续移植中对抗细胞衰老的作用与去乙酰化酶6/核因子-κB(SIRT6/NF-κB)信号轴的关系。 方法 免疫磁性分选法分离纯化雄性供体小鼠干细胞抗原阳性(Sca1+)HSC/HPC,连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。60Co γ射线致死剂量辐射雌性受体鼠后分4组,照射对照组;衰老模型组;Rg1治疗衰老组;Rg1预防衰老组。造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)培养,细胞周期分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色分析Rg1体内调控Sca-1+HSC/HPC衰老的作用。实时定量PCR及Western blotting检测衰老调控分子SIRT6、NF-κB mRNA及蛋白的表达。 结果 连续移植后受体鼠Sca1+HSC/HPC出现细胞衰老特征,随移植代数的增加,Sca1+HSC/HPC G0/G1期细胞比例及SA-β-Gal染色阳性率增高,CFU-Mix数量下降。与同代衰老模型组相比,Rg1治疗衰老组及Rg1预防衰老组受体鼠Sca1+ HSC/HPC G0/G1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性率下降,CFU-Mix数量升高;SIRT6 mRNA及蛋白表达上调,NF-κB mRNA及蛋白表达下调;Rg1预防衰老组各指标变化均较Rg1治疗衰老组明显。结论 Rg1可能通过调控SIRT6/NF-κB信号轴发挥其对抗连续移植过程中Sca1+ HSC/HPC衰老的作用。

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    16.

    微小RNA-138调控Wnt通路对体外人脑胶质瘤细胞生物学行为的影响

    吴俊波 杨杰 肖锋 李金亮
    解剖学报    2023, 54 (6): 682-688.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2023.06.009
    摘要41)      PDF(pc) (5340KB)(247)    收藏

    目的  探讨微小RNAmiR-138调控Wnt信号通路对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响。  方法  选取脑胶质瘤细胞系U-87MG、U251,将其随机分为空白组、miR对照组(miR-NC)、miR-138模拟物组(miR-138 mimics)和miR-138 抑制剂组(miR-138 inhibitor)。采用Real-time PCR检测各组细胞中miR-138表达;采用MTT、流式细胞术、Transwell实验及划痕实验分别对各组细胞的增殖、凋亡、侵袭以及迁移能力进行检测,采用Western blotting检测各组细胞Wnt通路相关蛋白表达。  结果  MiR-138 mimics组miR-138表达水平较其余3组高,miR-138 inhibitor组低于空白组和miR-NC组(P<0.05);与空白组相比,miR-138 mimics组细胞增殖率较低,miR-138 inhibitor组较高,且成时间依赖性(P<0.05);MiR-138 mimics组细胞凋亡率高于空白组、miR-NC组和miR-138 inhibitor组,而miR-138 inhibitor组细胞凋亡率均低于其余组(P<0.05);MiR-138 mimics组侵袭细胞数低于空白组、miR-NC组和miR-138 inhibitor组,而miR-138 inhibitor组均高于其余3组(P<0.05);MiR-138 mimics组细胞迁移率低于空白组、miR-NC组和miR-138 inhibitor组,而miR-138 inhibitor组均高于其余3组(P<0.05);MiR-138 mimics组Wnt3a、Wnt1、糖原合成激酶3β(GSK-3β)和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达低于空白组、miR-NC组和miR-138 inhibitor组;而miR-138 inhibitor组均高于其余3组(P<0.05)。  结论  MiR-138过表达可有效抑制脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移并促进其凋亡,可能是通过抑制Wnt信号通路而实现。

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    17. 利用生物电阻抗法分析西藏藏族青少年肌肉发育特点
    张海龙 席焕久* 付强 李文慧 刘素伟 钟铧 白马多吉
    解剖学报    2013, 44 (2): 292-296.   DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.02.028
    摘要622)      收藏

    目的 利用生物电阻抗分析法,通过测量得出西藏藏族青少年身体各部肌肉质量的数值,提出适合于西藏藏族青少年的肌肉质量基准值,进而探讨西藏藏族青少年的肌肉发育特点与规律。方法 在知情同意的情况下,整体随机抽取西藏藏族的健康青少年作为研究对象,其父母均为藏族,共选取1427人(男性710、女性717),应用体成分分析仪对所有受试者进行检测,得出全身肌肉量、躯干肌肉量、左上肢、右上肢、左下肢、右下肢肌肉量。所有结果输入SPSS19.0统计软件包,进行独立样本t 检验和方差分析统计学处理。 结果 西藏藏族青少年各年龄段的全身肌肉量、躯干肌肉量、左上肢、右上肢、左下肢、右下肢肌肉量,在12岁之前有性别差异,
    但不明显;12岁之后,以上各项数据均出现性别间差异的显著性,均表现为男性大于女性(P <0.05或P <0.01),而且随着年龄增长,这种差异越趋明显。12岁之后,女性的增长幅度出现显著下降,而男性在15岁之后,增长趋势才开始下降,而女性此时几乎进入肌肉生长发育的平台期。结论 西藏藏族青少年的肌肉含量随年龄变化特点与体内激素分泌水平有关,体现了不同发育时期的生理特点。

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    18. 白细胞介素-34/集落刺激因子-1R在转化生长因子-β1诱导A549细胞上皮-间质转化中的表达
    郑金旭* 朱勤 刘超 宋萍 端礼荣
    解剖学报    2014, 45 (3): 393-397.   DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2014.03.018
    摘要492)      收藏

    目的 探讨白细胞介素-34/集落刺激因子-1受体(IL-34/CSF-1R)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导A549细胞发生上皮-间质转化(EMT)中的表达。方法 体外培养A549细胞;CCK 8法检测不同浓度TGF-β1在不同时间点对A549细胞增殖的影响;选用5μg/L TGF-β1刺激A549细胞(0、12、24、48h),提取细胞蛋白和RNA,Western blotting法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏连蛋白(E-Cad)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白的变化;Real-time PCR法检测IL-34、CSF-1R、MMP-2、MMP-9基因表达的变化。 结果 TGF-β1对A549细胞的增殖无明显影响(P>0.05)。TGF-β1刺激A549细胞后,间质细胞标志性蛋白α-SMA表达升高,上皮细胞标志性蛋白E-Cad表达下降,纤维化相关的MMP-2蛋白表达升高,MMP-9蛋白表达先升高后下降,TIMP-1蛋白早期出现短暂性增高后,呈持续降低趋势(P<0.01)。IL-34 mRNA表达逐渐升高,CSF-1R mRNA、MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA表达先升高后下降(P<0.01)。 结论 TGF-β1诱导A549细胞的EMT过程中,存在IL-34/CSF-1R的动态表达。

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    19. 可利用小鼠诱导多能干细胞的建立及鉴定
    冯海凉 杨振丽 张宏 刘玉琴*
    解剖学报    2013, 44 (1): 34-38.   DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.01.007
    摘要631)      收藏

    目的 建立小鼠诱导多能性干细胞(iPSCs)模型,为干细胞和iPSCs研究提供可利用资源。 方法 取C57BL/6J小鼠12.5d的胚胎成纤维细胞,感染含有Sox2、Oct4、Klf4和c-Myc的慢病毒进行重编程。病毒感染后12d挑取iPSCs的克隆进行扩大培养,进行碱性磷酸酶染色鉴定。体外悬滴培养检测拟胚体(EB)的形成,并皮下接种BABL/c裸鼠检测畸胎瘤形成。全反式维甲酸诱导iPSCs克隆株定向分化。PCR法进行种属鉴定并检测支原体。 结果 得到了12个碱性磷酸酶阳性的小鼠iPSCs克隆株,体外可以形成拟胚体,其中9个克隆株可以在BALB/c裸鼠体内形成畸胎瘤。全反式维甲酸可诱导iPSCs定向分化为平滑肌细胞。iPSCs克隆株种属鉴定为鼠源性,无支原体的污染,细胞资源中心入库保藏。结论 成功建立了小鼠iPSCs模型,为干细胞、iPSCs重编程机制及定向分化研究提供可利用的资源。

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    20. 重组人内抑素对兔耳创面瘢痕组织血管内皮生长因子、转化生长因子-β1和碱性成纤维细胞生长因子表达的影响
    张晓明 余建 黄学应 邓雪飞 李小静
    解剖学报    2015, 46 (1): 101-105.   DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2015.01.018
    摘要528)      收藏

    目的 观察重组人内抑素 (rhEndostatin) 对兔耳创面瘢痕增生及血管内皮生长因子 (VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1) 和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF) 表达的影响,探讨rhEndostatin 抑制瘢痕增生的分子机制。方法 健康新西兰大耳白兔20只,均分为正常对照组、模型组、生理盐水 (NS) 对照组、rhEndostatin (5 g/L) 治疗组和醋酸曲安奈德 (TA, 40 g/L) 对照组;除正常对照组外其余各组均进行增生性瘢痕动物模型的复制,在兔耳腹侧面制作1cm × 1cm大小创面。术后第28天,rhEndostatin治疗组瘢痕皮内注射相应浓度rhEndostatin (100μl),NS对照组注射等量生理盐水,隔日1次,共6次;TA对照组瘢痕块内注入相应浓度曲安奈德 (100μl),每周1次,共2次;模型组术后不接受处理。术后第47天摄片并收集瘢痕及正常皮肤标本,应用免疫组织化学方法检测VEGF、TGF-β1和bFGF的表达。
    结果 形态学观察结果显示,术后第47天rhEndostatin治疗组瘢痕皮肤色泽变浅,变软变平,体积减小,与模型组和NS对照组比较有明显差异;免疫组织化学检测结果可见, 与模型组和NS对照组相比,rhEndostatin治疗组VEGF和TGF-β1蛋白表达减少,bFGF表达增加,差异均具有统计学意义 (P< 0.01)。结论 rhEndostatin能有效抑制兔耳创面瘢痕增生,其机制可能与rhEndostatin影响VEGF、TGF-β1和bFGF蛋白的表达有关。

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