枸杞水提液对海洛因损伤小鼠视网膜组织结构、诱导型一氧化氮合酶活性、Caspase-3及核因子κB蛋白表达的影响

doi:10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.009

摘要/Abstract

摘要：

目的探讨枸杞水提液对海洛因损伤小鼠视网膜组织结构及相关活性物质的影响。方法 120只昆明小鼠随机分为对照组、海洛因组、枸杞1组和枸杞2组。海洛因组和枸杞1组和2组用递增剂量（2、3、4 g/L）腹腔连续（1～5 d、6～10 d和11～15 d）注射海洛因溶液15 d，每天两次（9∶00 am，16∶00 pm），每次0.2 ml，对照组注射等量生理盐水，注射海洛因溶液1 h后，枸杞1组和2组再分别灌胃（1.0 g/kg、2.0 g/kg）枸杞水提液0.2 ml，对照组和海洛因组灌胃等量生理盐水。用生物显微技术观察小鼠视网膜组织结构的变化，用比色法检测小鼠血浆乳酸脱氢酶（LDH）活性和视网膜组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性的变化，用免疫组织化学法检测视网膜组织Caspase-3和核因子（NF）-κB蛋白表达的变化。结果与对照组相比，海洛因组小鼠视网膜组织有不同程度的损伤，神经节细胞出现空泡样变性，内核层和外核层结构紊乱，血浆LDH活性显著升高，差异显著（P＜0.05 或 P＜0.01），视网膜组织iNOS活性增加，差异极显著（P<0.01）；视网膜组织Caspase-3和NF-κB蛋白的阳性表达量升高，平均吸光度值明显增大（P＜0.05或 P＜0.01）。与海洛因组相比，枸杞1组和2组小鼠视网膜组织神经节细胞空泡化减轻，内核层和外核层排列较为整齐，血浆LDH活性显著降低，差异显著或极显著（P<0.05或 P<0.01），视网膜组织iNOS活性均又下降，差异显著或极显著（P<0.05或 P<0.01）；视网膜组织Caspase-3和NF-κB蛋白阳性表达又降低，差异极显著（P<0.01）。结论枸杞水提液可提高细胞的抗氧化能力和抗炎能力，抑制视网膜组织Caspase-3的表达和NF-κB的活化，可有效减轻海洛因对视网膜组织的损伤，对视网膜组织有一定的保护作用。

关键词: 枸杞水提液, 海洛因, 视网膜, 诱导型一氧化氮合酶, Caspase-3, 核因子κB, 免疫组织化学, 小鼠

Abstract:

Objective To explore the effects of Lycium barbarum soup on retina histological structure and related active substances in mice injured by heroin. Method Totally 120 Kunming mice were randomly divided into control group, heroin group, Lycium barbarum 1 group and Lycium barbarum 2 group.The mice were intraperitoneally injected escalation with doses (2，4，6 g/L) heroin 0.2 ml continuous(1-5、6-10 and 11-15 days) for 15 days(twice a day). One hour after injected heroin, Lycium barbarum 1 and 2 group was intragastric administration with (1.0 g/kg, 2.0 g/kg) Lycium barbarum soup for 0.2 ml.The changes of retina tissue structure were observed by biomicroscopy，the changes of plasma lactate dehydrogenase(LDH) activity and retina inducible nitric oxide synthase(iNOS) activity were detected by colorimetry，the changes of Caspase-3 and nuclear factor(NF)-κB protein expression in retina was detected by immunohistochemistry method. Result Compared with the control group, the retina tissue of the heroin group was damaged in varying degrees，ganglion cells decreased, vacuolated degeneration occurred, the structure of the inner and outer nuclear layers was disordered, loose and reticular. The LDH activity of plasma increased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）.The iNOS activity of retina increased significantly (P<0.01).The Caspase-3 and NF-κB protein expression of retina increased, and the average optical density increased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）.Compared with the heroin group, the ganglion cell layer vacuolation of the retina in Lycium barbarum 1 and 2 groups was reduced，the inner and outer nuclear layers were arranged orderly.The LDH activity of plasma decreased significantly (P<0.05 or P<0.01).The iNOS activity of retina decreased significantly (P<0.05 or P<0.01).The Caspase-3 and NF-κB protein expression of retina decreased significantly (P<0.01). Conclusion Lycium barbarum soup can improve the anti-oxidation and anti-inflammatory ability of cells, inhibit Caspase-3 expression and NF-κB activation of retina. It can effectively reduce the damage of heroin on the retina and has a certain protective effect on the retina.

Key words: Lycium barbarum soup, Heroin, Retina, Inducible nitric oxide synthase, Caspase-3, Nuclear factor κB, Immunohistochemistry, Mouse

中图分类号:

Q955

李重阳苟陶然俞诗源. 枸杞水提液对海洛因损伤小鼠视网膜组织结构、诱导型一氧化氮合酶活性、Caspase-3及核因子κB蛋白表达的影响[J]. 解剖学报, 2021, 52(4): 554-560.

LI Chong-yang GOU Tao-ran YU Shi-yuan. Effect of Lycium barbarum soup on histological structure, inducible nitric oxide synthase activity, Caspase-3 and nuclear factor-κB protein expression in retina of mice injured by heroin[J]. Acta Anatomica Sinica, 2021, 52(4): 554-560.

参考文献

［1］ Liu TT，Peng J，Li ChY，et al.Effects of ephedrine on histological structure，activities of total antioxidant capacity and catalase in the myocardial tissue of mice［J］.Acta Anatomica Sinica，2016，47(4)：516-520.(in Chinese)

刘婷婷，彭静，李重阳，等.麻黄素对小鼠心肌组织结构和总抗氧化能力、过氧化氢酶活力的影响［J］.解剖学报，2016，47(4)：516-520.

［2］ Feng HL，Li ChY，Yu ShY，et al.Effects of heroin on SOD and CAT activity and MDA content and histological structure in the lungs of the filial mice and mother mice［J］.Acta Anatomica Sinica，2009，40(2)：288-294.(in Chinese)

冯红丽，李重阳，俞诗源，等.海洛因对仔鼠和母鼠肺中SOD、CAT活力和MDA含量及组织结构的影响［J］.解剖学报，2009，40(2)：288-294.

［3］ Wang Y，Li ChY，Yu ShY，et al.Effects on the structure of cerebral temporal lobe cortex and capability of learning and memory of filial mice after administration of heroin and ephedrine［J］.Acta Anatomica Sinica，2009，40(5)：724-731.(in Chinese)

王昱，李重阳，俞诗源，等.注射海洛因、麻黄素对仔鼠大脑颞叶皮层结构及学习记忆能力的影响［J］.解剖学报，2009，40(5)：724-731.

［4］ Li ChY，Gou TR，Yu ShY.Effect of heroin on oxidative damage and specific protein expression in retina of newborn mice［J］.Acta Anatomica Sinica，2018，49(6)：708-713.(in Chinese)

李重阳，苟陶然，俞诗源.海洛因对仔鼠视网膜的氧化损伤和特异蛋白表达的影响［J］.解剖学报，2018，49(6)：708-713.

［5］ Gou TR，Li ChY，Ou R，et al.Effect of heroin on histological structure and its antioxidant enzyme in mice retina［J］.Acta Anatomica Sinica，2017，48(6)：663-668.(in Chinese)

苟陶然，李重阳，欧锐，等。海洛因对小鼠视网膜结构和抗氧化物酶的影响［J］.解剖学报，2017，48(6)：663-668.

［6］ Tao YF，Zhao ZhH，Zhou H，et al. A comparative study of trazodone and buprenornhine in the treatment of protracted withdrawal syndrome in heroin addicts［J］. Chinese Journal of Drug Abuse Prevention and Treatment，2010，16(5)：256-257.(in Chinese)

陶用富，赵智慧，周豪，等. 曲唑酮与丁丙诺啡治疗海洛因依赖者稽延性戒断症状的对照研究［J］. 中国药物滥用防治杂志，2010，16(5)：256-257

［7］ Chen MZh，Chen ShY，Chen ChH. Inhibition of small complex prescription of salviamiltiorrhiza and radix astragali on relapse behavior in morphine dependent mice［J］. Chinese Journal of Drug Dependence，2008，17(1)：32-35.(in Chinese)

陈明珠，陈少雅，陈崇宏.丹参、黄芪小复方对吗啡依赖小鼠复吸行为的抑制作用［J］.中国药物依赖性杂志，2008，17(1)：32-35.

［8］ Meng R, Li ChY，Yu ShY，et al.The protection of Angelica sinensis polysaccharide on liver histological structure in mice injured by ephedrine［J］.Acta Anatomica Sinica，2015，46(3)：379-386.（in Chinese）

孟茹，李重阳，俞诗源，等.当归(粗)多糖对麻黄素肝组织损伤的保护作用［J］.解剖学报，2015，46(3)：379-386.

［9］ Wei PT, Li ChY, Yu ShY, et al.The effect of Astragalus polysaccharide on histological structure and enzyme activity and Caspase-3 protein expression in the kidney of mice injured by ephedrine［J］.Acta Anatomica Sinica，2015，46(4)：564-571.（in Chinese）

魏娉婷，李重阳，俞诗源，等.黄芪(粗)多糖对麻黄素损伤小鼠肾组织结构和抗氧化物酶活性及Caspase-3蛋白表达的影响［J］.解剖学报，2015，46(4)：564-571.

［10］ Nan YY, Yong XF, Wang LX, et al.Research Advances of Lycium barbarum polysaccharides pharmacology ［J］.Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine，2014，31（12）：763-765.（in Chinese）

南亚昀，雍学芳，王礼星，等.枸杞多糖药理学研究进展［J］.天津中医药，2014，31（12）：763-765.

［11］ Wang JH， Wang HZh， Zhang M，et al.Anti-peroxidation effects of polysaccharide-3 from fructus lycii on mice ［J］. Chinese Journal Veterinary Science，2002，22（3）：267-268.(in Chinese)

王建华，王汉中，张民，等.枸杞多塘组分3对小鼠抗脂质过氧化作用的影响［J］.中国兽医学报，2002，22（3）：267-268.

［12］ Wang YW, Fu WZh, Tan ZY, et al.Experimental study on the anti-fatigue action of wolfberry fruit ［J］.China Tropical Medicine，2006，6（8）：1523-1524.(in Chinese)

王彦武，傅伟忠，谭宗艳，等.枸杞多糖抗疲劳作用的实验研究［J］.中国热带医学，2006，6（8）：1523-1524.

［13］ Bai Sh， Yu X， Du YP， et al. Protective effect of lycium barbarum polysaccharides against NMDAinduced retinal damage in rats［J］.Chinese Pharmacological Bulletin，2013，29(5)：670-674.(in Chinese)

白双，于鑫，杜瑛培，等.枸杞多糖对NMDA致大鼠视网膜损伤保护作用的研究［J］.中国药理学通报，2013，29（5）：670-674.

［14］ Wang JM， Xue JL，Ge BL， et al.Immunomodulatory and antitumor activities of Lycium barbarum polysaccharides in vitro and their sulfates［J］.Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences), 2015，50（6）：809-813.(in Chinese)

王君敏，薛敬礼，葛蓓蕾，等.枸杞多糖及其硫酸酯体外免疫及抗肿瘤活性［J］.郑州大学学报（医学版），2015，50（6）：809-813.

［15］ Li ChY， Pen J， Yu ShY. The effect of lilium soup on lung histological structure in mice injured by ephedrine［J］.Acta Anatomica Sinica，2017，48(6)：746-752.(in Chinese)

李重阳，彭静，俞诗源.百合水溶液对麻黄素致损伤小鼠肺组织的影响［J］.解剖学报，2017，48(6)：746-752.

［16］ Zhao Y， Xu YJ， Duan JG, et al. Effects of lycium bararum polysaccharides on delayed rectifier K+ current in high pressure-induced apoptosis of retinal ganglion cells［J］. Reccent Advances Ophthalmology， 2016，36(6)：520-523.(in Chinese)

赵瑛，徐亚吉，段俊国，等.枸杞多糖对高压诱导凋亡的视网膜神经节细胞延迟整流钾电流的影响［J］.眼科新进展，2016，36(6)：520-523.

［17］ Dong WH， Du XJ， Guo DD， et al.Protective effects of Lycium barbarum polysaccharide on damaged hRPE cells induced by blue light irradiation［J］.International Eye Science， 2013，13(12)：2381-2384.(in Chinese)

董卫红，杜秀娟，郭大东，等.枸杞多糖对蓝光损伤的视网膜色素上皮细胞的保护作用［J］.国际眼科杂志，2013，13(12)：2381-2384.

［18］ Ma YL，Chen F， Li XL. The protective effect of Lyceum barbarum polysaccharides on the retinal of diabetic rats［J］.Journal of Ningxia Medical University，2013，35(8)：837-840.(in Chinese)

马雅玲，陈凤，李小璐，等.枸杞多糖对糖尿病大鼠视网膜保护作用的研究［J］.宁夏医科大学学报，2013，35(8)：837-840.

［19］Meng XJ， Bi WQ, Zhang Q, et al.Protective effect and mechanism of blueberry Anthocyanins against retinal photodamage in rats［J］.Food Science，2013，34（11）：242-245.(in Chinese)

孟宪军，毕菀芩，张琦，等.蓝莓花色苷对大鼠视网膜光损伤的保护作用及其机制［J］.食品科学，2013，34（11）：242-245.

［20］ Thomson LR，Toyoda Y，Langner A， et al.Elevated retinal zeaxanthin and prevention of light-induced photoreceptor cell death in quail［J］.Invest Ophthalmol Vis Sc，2002，43(11)：3538-3542.

［21］ Kim WT，Suh ES.Retinal protective effects of resveratrol via modulation of nitric oxide synthase on oxygen-inducesd retinopathy［J］.Korean J Ophthalmol，2010，24(2)：108-118.

［22］ Vielma AH，Retamal MA，Schmachtenberg O.Nitric oxide signaling in the retina：what have we learned in two decades［J］? Brain Res，2012，1430：112-125.

［23］ Luo DW，Zou HD， Liu K，et al.Treatment of aminoguanidine in retina of diabetic of rats with selective inhibits induced nitric oxide synthas［J］. Chongqing Medicine， 2014，43（19）：2440-2442.(in Chinese)

罗大卫，邹海东，刘堃，等.氨基胍高选择性抑制iNOS在糖尿病大鼠视网膜中的研究［J］.重庆医学，2014，43（19）：2440-2442.

［24］ Kruse P，Anderson ME，Loft S.Minor tole of oxidative stress during intermediate phase of acute pancreatitis in rats［J］. Free Radic Biol Med，2001，30(3)：309-317.

［25］ Shao HM，Wei HJ，Wang WL，et al.The clinical significance of the levels of INS, NPY, LDH and CK in the plasma of neonates with hypoxic-ischemic encephalopathy［J］.Clinical Medicine Research and Practice，2016，1（3）：39.(in Chinese)

邵惠敏，魏红娟，王伟烈，等..新生儿缺氧缺血性脑病血浆INS、NPY、LDH、CK水平检测的临床意义［J］.临床医学研究与实践，2016，1（3）：39.

［26］ Chen F, Mi MT, Bai X, et al. Effects of taurine on high altitude hypoxia induced changes of retina morphology and SDH, LDH activity［J］. Journal of Third Military Medical University，2006，28（6）：565-568.(in Chinese)

陈芳，糜漫天，白雪，等.牛磺酸对高原缺氧大鼠视网膜形态结构及SDH、LDH活性的影响［J］.第三军医大学学报，2006，28（6）：565-568.

［27］ Li GD, Yuan YSh, You ZhP.Effect of verapamil on Caspase-3 expression in retina after ischemia-reperfusion injury in rats［J］.Journal of Practical Medicine，2007，23（1）：37-39.（in Chinese）

李国栋，袁援生，游志鹏.异搏定对大鼠缺血再灌注损伤后视网膜内Caspase-3表达的影响［J］.实用医学杂志，2007，23（1）：37-39.

［28］ Chen F，Liu KY，Xu Sh，et al.Protective effect of puerarin on retinopathy and its inhibitory effect on NF-κB activity in diabetic mellitus rats［J］.Chinese Journal Pharmacology Toxicology，2011，25（3）：296-300.(in Chinese)

陈放，刘开扬，徐珊，等.葛根素对糖尿病大鼠视网膜的保护及对NF-κB表达的抑制［J］.中国药理学与毒理学杂志，2011，25（3）：296-300.

［29］ Yu XT, Niu YJ, Qu H. Effects of hypoxic preconditioning on the expression of HIF-1α and NF-κB in retina of light damage in mous［J］.Chinese Ophthalmic Research, 2007，25（12）：941-944.（in Chinese）

于秀婷，牛膺筠，曲虹.低氧预适应对小鼠光损伤视网膜HIF-1α和NF-κB表达的影响［J］.眼科研究，2007，25（12）：941-944.

[1]	冯丽萍徐伊琳陈珣刘大海王军勇王晓瑛林金杏. 斑马鱼视网膜微细结构及发育特征[J]. 解剖学报, 2024, 55(1): 105-112.
[2]	洪晓敏李三强崔钦奕郑润月杨孟利罗仁利李前辉 . 酒精性肝纤维化核因子κB信号通路与性别的差异 [J]. 解剖学报, 2024, 55(1): 55-61.
[3]	袁蕾杨智伟杨惠刘政海何洁万炜. 三七总皂苷抑制小鼠星形胶质细胞活化缓解完全弗氏佐剂所致炎性痛 [J]. 解剖学报, 2024, 55(1): 25-31.
[4]	马婷婷陈建红刘爱翠李海宁. 抑制lncRNA TUG1下调核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1炎症小体在延缓阿尔茨海默病进展的作用 [J]. 解剖学报, 2024, 55(1): 32-42.
[5]	邹成功冯浩陈兵唐辉邵川孙谋杨荣何家全. 创伤性颅脑损伤中神经功能障碍与认知功能损伤的动态变化 [J]. 解剖学报, 2024, 55(1): 43-48.
[6]	郑丽平刘霞杜晓华吴亚娟刘珊珊 . 脑源性神经营养因子在牦牛与黄牛端脑不同区域的表达与分布 [J]. 解剖学报, 2024, 55(1): 10-16.
[7]	刘丽平朱梦妮徐慧 . 白细胞介素6对脂多糖诱导所致类子痫前期大鼠有核红细胞的影响 [J]. 解剖学报, 2023, 54(6): 722-729.
[8]	张琴杨俊霞蒋青松. 福辛普利对糖尿病视网膜病变小鼠血管紧张素转化酶2和血管内皮生长因子的影响[J]. 解剖学报, 2023, 54(6): 628-634.
[9]	陈子璇司丽娜舒薇菡张欣魏晨阳程露阳杨松鹤乔跃兵. 褪黑素调控下丘脑PI3K/Akt/mTOR信号延缓雌性小鼠青春期启动的机制 [J]. 解剖学报, 2023, 54(6): 644-651.
[10]	梁盼盼禹爱梅杜静寇文辉王欢欢宋爱霞. 基于c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路探讨阿魏酸钠对偏头痛大鼠炎症反应的抑制作用[J]. 解剖学报, 2023, 54(6): 652-659.
[11]	刘哲川李坤马帅男孟家琪王艳芹. 利拉鲁肽对百草枯诱导的小鼠帕金森病模型炎症及线粒体融合/分裂的影响 [J]. 解剖学报, 2023, 54(6): 676-681.
[12]	刘叶楚亚楠徐岑璐何佳澄苏炳银太颢然. Roscovitine挽救帕金森病小鼠相关脑区神经元丢失和神经炎症[J]. 解剖学报, 2023, 54(6): 635-643.
[13]	魏纯纯王平林方兴麻献华章卫平谢志芳 . 小鼠棕色脂肪透射电子显微镜样品固定方法的改良 [J]. 解剖学报, 2023, 54(6): 738-743.
[14]	阎锟武筱林刘英娟葛科立任雷鸣李红云 . 脑蛋白水解物-Ⅰ对帕金森病小鼠肠道菌群的调节作用[J]. 解剖学报, 2023, 54(5): 497-504.
[15]	顾玲张萍宋科昕李娜陈虹宇张婕丛敬翟效月 . 发生发育小鼠肾输尿管芽分支的形态特点[J]. 解剖学报, 2023, 54(5): 593-598.