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    人类学
    中国壮侗语族族群体脂分布及其与年龄的关系
    孙思凡 李咏兰 郑连斌 于会新
    2021 (4):  635-642.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.020
    摘要 ( )   PDF(1006KB) ( )  
    目的  揭示中国壮侗语族族群体脂分布及与年龄的关系。   方法  采用生物电阻抗分析法,测量中国壮侗语族13个族群的身体组成成分;采用 u 检验,进行性别间身体组成成分差异检验,采用相关分析方法对身体组成成分各项指标与年龄进行相关分析;采用方差分析探讨3个年龄组间身体组成成分的差异。   结果  壮侗语族族群的体脂率不高,未达到肥胖水平。有约>50%男性和>50%女性脂肪率处于标准范围。侗族、布依族体脂率较高,仫佬族、仡佬族体脂率较低。随年龄增长,男性上肢脂肪率无明显变化,内脏脂肪、躯干脂肪率增高,下肢脂肪率降低,总体脂率与下肢脂肪率变化不大。随年龄增长,女性身体质量指数(BMI)、总体脂率、躯干脂肪率无明显变化,四肢脂肪率下降。女性体内脂肪比例明显高于男性。男性左、右上肢脂肪率与年龄无显著相关,体脂率、内脏脂肪等级、躯干脂肪率与年龄成显著正相关,左、右下肢脂肪率与年龄成显著负相关。女性左上肢脂肪率、左、右下肢脂肪率均与年龄成显著负相关,躯干脂肪率与年龄成显著正相关。女性总体脂率与年龄无显著相关。   结论  壮侗语族族群在中国族群中体脂比较菲薄,明显少于北亚类型族群,具有中国南方族群皮脂发育水平特点。
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    利用生物电阻抗法研究进藏工作的汉族人群骨骼肌含量
    赵秋月 张海龙 席焕久 任甫 阎文柱 钟铧 白马多吉
    2021 (4):  643-646.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.021
    摘要 ( )   PDF(844KB) ( )  
    目的  探讨进藏工作汉族成年人群和辽宁汉族成年人群骨骼肌含量分布的特点及差异。   方法  随机抽取进藏工作的辽宁本地汉族、辽宁汉族健康成人作为研究对象,共选取进藏辽宁本地汉族成人223名(男95,女128);辽宁汉族成人302名(男126,女176),应用体成分分析仪对受试者的体重、全身肌肉量、躯干肌肉量、左上肢肌肉量、右上肢肌肉量、左下肢肌肉量、右下肢肌肉量进行测量。并将所有结果输入SPSS 22.0统计学软件分析,应用独立样本 t 检验等相关统计学方法处理。   结果 进藏汉族成年人群的体重、躯干肌肉量、左上肢肌肉量、右上肢肌肉量、左下肢肌肉量及右下肌肉量均小于辽宁本地汉族人群,差异有显著性(P<0.01或P<0.05);进藏汉族和辽宁汉族人群的男性肌肉量大于女性人群,差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。   结论  辽宁汉族人群进入西藏高原地区后,身体各部分肌肉量数值均明显下降。人体成分的改变可受性别、高原缺氧环境等多种因素影响。
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    广西汉族人群中缺氧诱导因子3A基因 rs11672731和rs2072491的多态性
    谷嬉嬉 曾志能 何永玲 石祥 韦叶生
    2021 (4):  647-651.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.022
    摘要 ( )   PDF(1141KB) ( )  
    目的  探讨缺氧诱导因子3A(HIF3A)在广西汉族人群中的分布特征,并比较它们与不同人群的分布差异。   方法  我们对纳入本研究的286例广西人rs11672731和rs2072491位点采用单核苷酸多态性分型检测(SNPscan)技术进行基因分型检测,统计学分析基因型和等位基因频率与人类基因组单体型图(HapMap)公布的HapMap-CEU、HapMap-HCB、HapMap-JPT、HapMap-GIH和HapMap-MEX数据间的差异。   结果  rs11672731位点存在AA、AG和GG 3种基因型,频率分布分别为42.7%、45.5%和11.8%,A、G的等位基因频率分别为65.5%和34.5%;rs2072491位点存在CC、CT和TT 3种基因型,其分布频率分别为47.6%、43.0%和9.4%,C、T的等位基因频率分别为69.1%和30.9%。两个位点的基因型和等位基因频率与男女性别无关,差异均无统计学意义(P>0.05)。与来自HapMap的CEU、HCB、JPT、GIH、TSI和MEX人群的基因分型资料比较,广西汉族人群基因型和等位基因频率与HCB和JPT数据比较差异均无统计学意义(P>0.05);与HapMap公布的CEU、GIH、TSI和MEX人群数据相比,两位点的基因型和等位基因型频率与上述地区差异均有统计学意义(P<0.05)。   结论 广西人群 HIF3A 基因rs11672731和rs2072491存在多态性,且在不同人群间存在不同程度差异。
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    中国全新世人群枕外隆突与枕区突隆的时代变异
    李海军 黄玉清 郭北姮 翁敏洁 赵钰洁 戴成萍
    2021 (4):  652-656.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.023
    摘要 ( )   PDF(1261KB) ( )  
    目的  分析中国全新世人群枕外隆突、枕区突隆两项观察性状的表现特点及时代变异。  方法  根据表现程度将枕外隆突、枕区突隆分类,统计新石器时代(49例)、青铜铁器时代(171例)和现代(55例)成年男性头骨的各个类别的出现率并进行时代间比较。   结果  不同时代间,枕外隆突、枕区突隆的表现特点和变化幅度亦不相同。枕外隆突的隆起程度随时代变化越来越显著,显著的变化主要发生在新石器时代到青铜铁器时代;全新世时期大多数人群颅骨上未出现枕区突隆,较显著的枕区突隆主要出现在青铜铁器时代。   结论  枕外隆突的变异特点可能与全新世头骨尺寸变化特点,斜方肌的过度使用等有一定关系;枕区突隆出现与否可能一定程度反映了大脑与颅骨的相对发育程度和速度。
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    肿瘤生物学
    微小RNA-140-3p靶向细胞分裂周期相关蛋白8抑制肺腺癌细胞侵袭转移的生物信息学分析及验证
    郑荃 胡雅琼 白俊 尹崇高 李洪利 刘雨清
    2021 (4):  589-600.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.014
    摘要 ( )   PDF(18830KB) ( )  
    目的  在生物信息学基础上探讨微小RNA(miR)-140-3p靶向细胞分裂周期相关蛋白8(CDCA8)抑制肺腺癌细胞的侵袭和转移。   方法  通过GEO数据库中的GEO2R分析肺腺癌芯片数据中差异表达的miRNA。TargetScanHuman7.2和miRWalk数据库查找miR-140-3p的靶基因。Cytoscape3.7.2软件筛选出Hub基因。GEPIA数据库查询靶基因在肺腺癌组织和正常肺组织中的表达水平,在肺腺癌不同分期中的表达水平以及靶基因的表达水平与肺腺癌患者总体生存率的关系。StarBase数据库查找miR-140-3p在肺腺癌中的生存分析及与CDCA8的表达水平在肺腺癌中的相关性。Real-time PCR检测miR-140-3p在正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺腺癌细胞A549的表达水平以及感染效率。Real-time PCR和Western blotting实验检测过表达miR-140-3p后CDCA8 mRNA和蛋白的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p是否与CDCA8直接结合。Transwell侵袭实验检测过表达miR-140-3p和CDCA8对肺腺癌细胞侵袭力的影响。   结果  通过GEO等数据库的分析结果显示,miR-140-3p在正常肺组织中的表达水平明显高于在肺腺癌中的表达水平,其预测靶基因CDCA8在肺腺癌中的表达水平明显高于在正常肺组织中的表达水平,且CDCA8与miR-140-3p的表达水平在肺腺癌中成负相关。实验结果显示,miR-140-3p在A549细胞中的表达明显低于在BEAS-2B细胞中的表达 (P<0.05);用过表达慢病毒感染细胞后miR-140-3p的表达水平明显升高 (P<0.05);过表达miR-140-3p后CDCA8的mRNA和蛋白表达水平明显下调 (P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-140-3p能与CDCA8直接结合 (P<0.05);与对照组相比,过表达miR-140-3p可抑制肺腺癌细胞A549的侵袭转移,而CDCA8可逆转miR-140-3p对肺腺癌细胞A549侵袭力的抑制作用 (P<0.05)。   结论  MiR-140-3p靶向CDCA8抑制肺腺癌细胞的侵袭转移。
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    唾液腺腺样囊性癌中相关微小RNAs及其靶基因的生物信息学分析
    刘发煇 侯婉云 梁家东 徐晶晶 罗春英
    2021 (4):  601-608.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.015
    摘要 ( )   PDF(11507KB) ( )  
    目的  探讨唾液腺腺样囊性癌(SACC)潜在的微小RNAs(miRNAs)分子标志物,构建miRNA-mRNA调控网络,并阐明其潜在的分子机制。   方法  从Gene Expression Omnibus(GEO)数据库下载2个SACC的微阵列芯片数据,通过R语言进行分析差异的miRNAs与mRNA。应用FunRich 3.1.3软件对差异miRNA进行转录因子富集分析以及预测差异miRNAs的靶基因。对SACC中差异miRNAs的靶基因进行基因本体论(GO)富集分析与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析以及蛋白互作分析。使用Cytoscape 3.7.0构建miRNA-mRNA调控网络。   结果  1. 共筛选出144个差异表达的miRNAs (DEMs)和1216个差异表达的mRNAs(DEGs);2. KEGG信号通路富集分析发现,靶基因主要参与Rap1信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路以及肌动蛋白细胞骨架的调节;3. STRING蛋白相互作用分析发现,ACSL1、SCD、MGLL、FABP4在蛋白相互作用网络中处于核心地位。   结论  我们筛选出SACC与相对正常组织间差异明显的miRNA和mRNA,并分析发现了这些差异分子主要参与的信号通路和功能。
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    神经生物学
    侧脑室注射促性腺激素抑制激素/RF酰胺相关肽-3对卵巢摘除术后补充雌激素大鼠子宫腔液影响的蛋白质组学分析
    赵雪莹 司丽娜 魏萌 乔跃兵 杨松鹤 程露阳
    2021 (4):  499-505.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.001
    摘要 ( )   PDF(7330KB) ( )  
    目的 运用生物信息学方法分析侧脑室注射促性腺激素抑制激素(GnIH)/RF酰胺相关肽-3(RFRP-3)对卵巢摘除术补充雌激素 (OEP) 大鼠子宫腔液蛋白的影响,探索GnIH/RFRP-3影响子宫的分子机制。   方法  本研究通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术结合生物信息学分析侧脑室微量注射GnIH对OEP模型大鼠(n=30)子宫腔液蛋白的影响。比较侧脑室注射GnIH/RFRP-3实验组(n=15,给予2 g/L RFRP-3,16 μl/kg)与生理盐水对照组(n=15,给予生理盐水16 μl/kg)6 h后子宫腔液的蛋白质组分,利用UniProt数据库筛选差异蛋白并对所得差异蛋白进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因百科全书(KEGG)通路分析。从STRING 数据库获得蛋白相互作用数据,利用Cytoscape 3.7.1软件构建蛋白相互作用网络(PPI)并筛选中心节点蛋白。  结果  应用LC-MS/MS技术所得质谱数据利用UniProt数据库进行搜索鉴定,筛选出差异蛋白419个,其中279个上调,138个下调;GO功能富集分析显示,差异蛋白主要富集于对有机物质的反应,对内源性刺激的反应,对含氧化合物的反应等生物过程;KEGG通路分析显示,差异蛋白在糖酵解、碳代谢、肌动蛋白骨架调节、甲状腺激素合成等代谢途径富集(P<0.05);分析蛋白相互作用网络获得5个中心节点蛋白:白蛋白(Alb)、α-烯醇化酶1(Eno1)、过氧化物酶6(Prdx6)、组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(Timp1)、Ras相关C3肉毒素底物1 (Rac1)。   结论  本实验结果提示,GnIH可能通过下丘脑-垂体生殖轴调节子宫腔液蛋白的分泌,并可能通过上调Alb、Eno1和Prdx6,下调Timp1和Rac1,调节子宫生理及病理过程。
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    微小RNA-141-3p在脑出血患者血清中的表达及其作用机制
    李晓波 夏鹰 聂柳 金虎 李友俊
    2021 (4):  506-511.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.002
    摘要 ( )   PDF(3014KB) ( )  
    目的  分析微小RNA-141-3p(miR-141-3p)在脑出血(ICH)患者中的表达水平,并探讨miR-141-3p对大鼠脑出血损伤的作用及其机制。   方法  以40例脑出血患者和40例体检健康对照者为研究对象,采用Real-time PCR方法检测血清中miR-141-3p的含量。采用生物信息学预测miR-141-3p的靶标基因,双荧光素酶报告分析验证miR-141-3p对核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)的调控作用。在大鼠脑出血模型侧脑室注射miR-141-3p激动剂(agonist)或者激动剂对照(agonist NC),治疗7 d后进行神经功能评分。麻醉处死大鼠后取出脑组织,HE染色观察脑组织病理改变。干湿重法测定脑组织含水量,并采用Real-time PCR测定miR-141-3p和NLRP3的表达,通过Western blotting方法测定白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-18的表达。   结果  与健康对照组(0.520±0.028)相比,脑出血患者血清中miR-141-3p的表达水平(0.068±0.038)显著下调(t=15.93,P<0.001),且与血肿周围水肿严重程度成负相关(r=-0.8948,-0.9434~-0.8087,P<0.001)。miR-141-3p靶向调控NLRP3基因表达。miR-141-3p的表达水平在miR-141-3p agonist组中明显高于agonist NC组(P<0.001),炎症小体NLRP3和炎症因子IL-1β、IL-6和IL-18表达水平明显低于agonist NC组(P<0.001)。与agonist NC组相比, agonist组miR-141-3p在ICH术后7 d脑水肿减轻,神经功能评分明显降低(P<0.001)。HE染色结果表明,ICH大鼠注射miR-141-3p激动剂后血肿周围水肿明显缩小。   结论  miR-141-3p通过靶向NLRP3降低炎症反应,减轻对脑出血后血肿周围脑组织的损伤。
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    Bcl-2腺病毒/E1B 19kD相互作用蛋白3对弥漫性轴索损伤后少突胶质细胞凋亡的调控作用
    王婷婷 穆娇 李美玉 于泓 蒋丛政 张晓丽 张国徽
    2021 (4):  512-519.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.003
    摘要 ( )   PDF(14368KB) ( )  
    目的  探讨Bcl-2腺病毒/E1B 19kD相互作用蛋白3(BNIP3)对大鼠弥漫性轴索损伤(DAI)后少突胶质细胞凋亡的调控作用。 方法 77只SD雄性成年大鼠随机分为假手术组(11只)、DAI组(33只)及干预组(33只)。参照Marmarou方法制做DAI模型,干预组大鼠在打击后立即给予脑室注射BNIP3抑制剂necrostatin-1(Nec-1,30 g/L,2 μl),检测Nec-1干预前后DAI大鼠BNIP3蛋白表达,少突胶质细胞凋亡以及髓鞘的组织病理学变化。   结果  与假手术组相比,大鼠DAI损伤后脑干组织BNIP3表达上调,且与细胞凋亡成正相关; Nec-1干预有效降低DAI大鼠少突胶质细胞BNIP3蛋白表达,显著减少DAI大鼠少突胶质细胞凋亡的数目,提高DAI大鼠脑干髓鞘劳克坚牢蓝(LFB)染色平均吸光度和髓鞘碱性蛋白(MBP)表达,改善DAI大鼠脑干髓鞘的超微结构。  结论  BNIP3参与DAI诱导的少突胶质细胞凋亡,抑制BNIP3可保护DAI大鼠少突胶质细胞和髓鞘。
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    CTNND2基因敲除对小鼠小脑发育及运动功能的影响
    王路义 徐蔓 汤博诣 张潇月 汪江杭 王钰银 谢乐静 李英博
    2021 (4):  520-527.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.004
    摘要 ( )   PDF(8252KB) ( )  
    目的  探讨CTNND2基因敲除对小鼠小脑神经元发育和运动功能的影响及可能的机制。   方法  小鼠分为2组,每组10只,均为7周龄:野生型 (WT) C57BL/6J 小鼠为对照组,CTNND2基因敲除纯合子 (CTNND2-/-) 小鼠为实验组,PCR检测CTNND2-/- 小鼠的基因型。平衡木实验、悬挂实验和步态分析实验检测两组运动功能;免疫荧光染色、高尔基染色检测小脑普肯耶细胞的变化;Western blotting检测突触相关蛋白磷酸化突触蛋白1(p-Syn1)、突触蛋白1(Syn1)、ELKS和突触后致密蛋白 95(PSD95)以及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达水平。   结果  与WT组相比,CTNND2-/-小鼠通过平衡木的时间延长,通过平衡木的比例下降,悬挂时间缩短,悬挂得分减少,前爪步幅长度和后爪步幅长度均缩短;CTNND2-/-小鼠小脑中普肯耶细胞数及其树突的分支数均减少;p-Syn1/Syn1、p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR比值以及ELKS、PSD95和PI3K表达水平均低于WT组。   结论  CTNND2基因敲除可能通过下调PI3K/Akt/mTOR 信号通路,影响小脑普肯耶细胞的数量和树突结构以及突触相关蛋白的合成,导致小脑发育障碍,从而影响小鼠的运动功能。
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    人脐带间充质干细胞移植对慢性应激模型小鼠抑郁行为的改善作用
    赵碧春 李承罡 张玉娟 杜若琛 原一桐 张茹鑫 王春芳
    2021 (4):  528-535.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.005
    摘要 ( )   PDF(9358KB) ( )  
    目的  探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)尾静脉移植对慢性不可预测性温和应激(CUMS)模型小鼠抑郁行为的改善作用。   方法  获得第3代hUCMSCs;将60只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组(给予生理盐水)、细胞组(移植hUCMSCs)、氟西汀(flu)给药组(给予flu),每组15只。构建6周CUMS小鼠抑郁模型;从第3周开始将hUCMSCs、生理盐水以尾静脉注射的方式移植给小鼠;从第5周开始每天给予小鼠flu灌胃;记录各组小鼠每周的体重变化;通过蔗糖偏好实验、悬尾实验、强迫游泳实验及旷场实验评估小鼠抑郁模型及治疗效果;HE染色观察海马CA1及CA3区细胞变化;透射电子显微镜检测海马CA3区突触的超微结构变化;Real-time PCR检测海马突触可塑性关键蛋白突触素(SYP)和突触后致密物95(PSD-95)的mRNA表达情况。   结果  hUCMSCs可以改善因CUMS导致的小鼠体重下降;行为学实验观察到,模型组小鼠出现抑郁行为,细胞组和给药组小鼠抑郁行为得到改善;HE染色观察到,与模型组相比,细胞组和给药组小鼠海马CA1及CA3区细胞排列整齐,数量增多;透射电子显微镜观察到,与模型组相比,细胞组和给药组海马CA3区亚细胞结构突触数量更多,突触间隙更窄,突触棘密度更大;Real-time PCR检测到,细胞组和给药组比模型组SYP和PSD-95的mRNA表达更多。   结论  hUCMSCs移植具有抗抑郁作用,这种作用与改善海马的突触可塑性有关。
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    毛蕊异黄酮通过调控细胞色素C/凋亡酶激活因子 1 凋亡信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤
    张彐宁 高维娟 周晓红 张怡 董贤慧 张颖 靳晓飞
    2021 (4):  536-542.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.006
    摘要 ( )   PDF(7110KB) ( )  
    目的  探讨毛蕊异黄酮对脑缺血/再灌注损伤的影响及其作用机制。   方法  将SPF级雄性SD大鼠40只随机分为假手术组(sham)、模型组(model)、毛蕊异黄酮组(calycosin, 20 mg/kg)和尼莫地平组(nimodipine, 0.7 mg/kg,阳性对照药组),采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型,在体模拟脑缺血/再灌注损伤环境。Zea Longa评分法检测脑缺血/再灌注大鼠神经功能缺损情况;盐酸2,3,5-三苯基四氮(TTC)染色检测脑梗死体积;HE染色检测神经细胞病理形态学改变;尼氏染色观察尼氏小体变化;TUNEL染色检测神经细胞凋亡情况;Western blotting检测凋亡关键蛋白细胞色素 C(Cyt C)、凋亡酶激活因子 1(Apaf-1)、Caspase-9和Caspase-3的表达。   结果  与sham组相比,model组神经功能缺损症状明显(P<0.05),脑梗死体积明显增大(P<0.05),倒置光学显微镜下观察发现神经细胞出现胞体收缩,胞核深染、固缩,细胞生长状态较差,尼氏小体明显减少或消失(P<0.05),凋亡神经细胞明显增多(P<0.05),凋亡关键蛋白Cyt C、Apaf-1、Caspase-9和Caspase-3表达均明显升高(P<0.05);与model组相比,calycosin 组和nimodipine 组大鼠神经功能缺损症状明显减轻(P<0.05),脑梗死体积明显缩小(P<0.05),光学显微镜下观察发现,神经细胞损伤明显减轻,尼氏小体表达明显增多(P<0.05),凋亡神经细胞明显减少(P<0.05),凋亡关键蛋白Cyt C、Apaf-1、Caspase-9和Caspase-3的表达明显降低(P<0.05)。   结论  毛蕊异黄酮可明显抑制神经细胞凋亡,减轻脑缺血/再灌注损伤,其作用机制与毛蕊异黄酮有效调控Cyt C/Apaf-1凋亡信号通路相关。
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    抑制泛素羧基末端水解酶L1 对小鼠脑缺血/再灌注损伤的影响
    彭志锋 李晨旭 马国英 杨靖辉
    2021 (4):  543-547.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.007
    摘要 ( )   PDF(13284KB) ( )  
    目的  评估抑制泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)对小鼠脑缺血/再灌注损伤的影响。   方法  将雄性BALB/c小鼠随机分为假手术(sham)组、缺血/再灌注(I/R)组、UCHL1小干扰 RNA (siRNA) 组和scramble siRNA(control) 组,每组10只小鼠。采用小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO) 60 min后再灌注24 h建立I/R模型。其中siRNA组和control组在MCAO前24 h将10 μl UCHL1 siRNA或scramble siRNA通过侧脑室注入脑内。采用RT-PCR和Western blotting方法检测各组小鼠脑组织中UCHL1表达;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法评估各组小鼠脑梗死体积和水肿率;采用神经行为学评分法评估各组小鼠神经症状评分。   结果  与sham组相比,I/R组缺血半影区UCHL1 mRNA和蛋白水平显著增高(P<0.05);而 siRNA组UCHL1蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05);与此同时,I/R组小鼠脑梗死体积、水肿率及神经行为学损伤明显增加,而siRNA组小鼠脑梗死体积和水肿率及神经行为学损伤进一步加重(P<0.05)。   结论  抑制UCHL1可加重小鼠脑缺血/再灌注损伤。提示,MCAO后诱导UCHL1表达对小鼠脑缺血/再灌注损伤具有保护作用。
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    小胶质细胞中小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶3参与小鼠光化学栓塞法缺血性脑卒中早期的疾病进展
    杜娟娟 叶蓁 周涛 任艳华 廖敏
    2021 (4):  548-553.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.008
    摘要 ( )   PDF(11627KB) ( )  
    目的  探讨小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶3(SENP3)在光化学栓塞法缺血性脑卒中小鼠小胶质细胞中的表达变化,以及与光化学法栓塞缺血性脑卒中疾病进展的关系。  方法  实验小鼠分对照组、缺血性脑卒中1 d组和缺血性脑卒中7 d组(每组3只),应用Western blotting检测各组纹状体诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(ARG-1)和SENP3的表达和c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化水平;应用免疫荧光双标法检测小鼠纹状体小胶质细胞中iNOS和ARG-1的表达。   结果  与对照组相比,缺血性脑卒中1 d组SENP3的表达与JNK的磷酸化水平均显著上升,同时M1型小胶质细胞的标志物iNOS的表达水平显著上升;缺血性脑卒中7 d组M2型小胶质细胞的标记物ARG-1的表达显著增高。纹状体小胶质细胞特异性抗体1(Iba1)与iNOS、Iba1与ARG-1的免疫荧光双标结果与免疫印迹结果一致。   结论  光化学栓塞法缺血性脑卒中早期,小胶质细胞SENP3表达增加,进而影响JNK磷酸化的水平和小胶质细胞的极化,促进大脑炎症反应,参与缺血性脑卒中的疾病进展。
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    枸杞水提液对海洛因损伤小鼠视网膜组织结构、诱导型一氧化氮合酶活性、Caspase-3及核因子κB蛋白表达的影响
    李重阳 苟陶然 俞诗源
    2021 (4):  554-560.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.009
    摘要 ( )   PDF(9969KB) ( )  
    目的  探讨枸杞水提液对海洛因损伤小鼠视网膜组织结构及相关活性物质的影响。   方法  120只昆明小鼠随机分为对照组、海洛因组、枸杞1组和枸杞2组。海洛因组和枸杞1组和2组用递增剂量(2、3、4 g/L)腹腔连续(1~5 d、6~10 d和11~15 d)注射海洛因溶液15 d,每天两次(9∶00 am,16∶00 pm),每次0.2 ml,对照组注射等量生理盐水,注射海洛因溶液1 h后,枸杞1组和2组再分别灌胃(1.0 g/kg、2.0 g/kg)枸杞水提液0.2 ml,对照组和海洛因组灌胃等量生理盐水。用生物显微技术观察小鼠视网膜组织结构的变化,用比色法检测小鼠血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性和视网膜组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的变化,用免疫组织化学法检测视网膜组织Caspase-3和核因子(NF)-κB蛋白表达的变化。   结果  与对照组相比,海洛因组小鼠视网膜组织有不同程度的损伤,神经节细胞出现空泡样变性,内核层和外核层结构紊乱,血浆LDH活性显著升高,差异显著(P<0.05 或 P<0.01),视网膜组织iNOS活性增加,差异极显著(P<0.01);视网膜组织Caspase-3和NF-κB蛋白的阳性表达量升高,平均吸光度值明显增大(P<0.05或 P<0.01)。与海洛因组相比,枸杞1组和2组小鼠视网膜组织神经节细胞空泡化减轻,内核层和外核层排列较为整齐,血浆LDH活性显著降低,差异显著或极显著(P<0.05或 P<0.01),视网膜组织iNOS活性均又下降,差异显著或极显著(P<0.05或 P<0.01);视网膜组织Caspase-3和NF-κB蛋白阳性表达又降低,差异极显著(P<0.01)。   结论  枸杞水提液可提高细胞的抗氧化能力和抗炎能力,抑制视网膜组织Caspase-3的表达和NF-κB的活化,可有效减轻海洛因对视网膜组织的损伤,对视网膜组织有一定的保护作用。
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    综述
    骨健康差异分析
    席焕久 刘大华 李文慧 刘莹莹
    2021 (4):  662-669.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.025
    摘要 ( )   PDF(928KB) ( )  
    应用文献法,我们回顾与分析了人体骨矿的民族/种族、地域、性别和年龄等方面的差异。同时,对形成这种差异的遗传学、生活方式、骨结构和代谢等方面原因进行探讨和归纳,为同行们研究骨健康、防治骨质疏松和骨折提供了有意义的参考。
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    胰腺癌性痛发生、发展的神经机制研究进展
    邱欣彤 李仪 曹鹏 张明明
    2021 (4):  670-674.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.026
    摘要 ( )   PDF(875KB) ( )  
    胰腺癌性痛属于癌症引起的内脏痛,患者常常具有左上腹疼痛的特点,且在背部呈带状放射,严重影响患者的预后和生活质量。胰腺属于腹膜后位器官,周围有大量的神经丛包绕,受交感神经和副交感神经的共同支配。胰腺癌性痛机制复杂,如胰腺癌肿瘤细胞对周围神经的侵袭、肥大细胞脱颗粒物使受体激活、新生毛细血管增生、神经胶质细胞参与以及多种分子水平机制等。掌握胰腺的神经解剖学特征,探索胰腺癌性痛的机制对于临床治疗胰腺癌患者疼痛以及提高其预后和生活质量非常必要。我们就胰腺癌的神经病理性痛机制做一综述,以期为临床治疗胰腺癌性痛提供新的靶点和策略。
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    技术方法
    缝线法构建兔角膜新生血管模型
    杜立群 孙嘉璋 米丰花 吴欣怡
    2021 (4):  657-661.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.024
    摘要 ( )   PDF(5541KB) ( )  
    目的  比较不同缝线及缝合方式对兔角膜新生血管(CNV)模型的诱导效果。   方法  健康新西兰大白兔 45只,应用角膜缝线法制作CNV模型,根据缝线及缝合方式的不同随机平均分成5组,裂隙灯观察CNV生长趋势并摄片记录。筛选新生血管诱导稳定有效者,于角膜缝线前、缝合后7 d和14 d分别抽取动物房水,ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)蛋白含量,并于相同时间点随机处死实验兔各3只,取角膜行HE染色观察组织学变化,免疫荧光染色观察VEGF表达。   结果  8-0缝线单套环平行(A1)和垂直缝合组(A2)角膜缝线分别于8 d和14 d后脱落,血管萎缩,模型制作失败;10-0缝线双套环平行(B1)和垂直缝合组(B2)14 d时分别于角膜缘见稀疏和短簇状血管,CNV诱导效率不高。10-0缝线3套环放射状缝合组(B3)CNV生长旺盛,呈束状,房水VEGF表达较缝线前增强,14 d 高于7 d。光学显微镜检查显示缝线后7 d时,B3组角膜水肿,基质CNV。VEGF免疫荧光染色见少量着色;14 d时,B3组角膜基质CNV及VEGF免疫荧光染色均较7 d时增多。   结论  角膜缝线法可诱导兔角膜CNV模型;10-0线3套环缝合法(B3)诱导CNV稳定有效,为有效诱导方法。
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    人类学
    虚拟仿真手术与常规手术对肾结石治疗效果的比较
    武利兵 高尚 许阳阳 王一丹 和雨洁 王海燕 李筱贺 李志军
    2021 (4):  609-617.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.016
    摘要 ( )   PDF(6728KB) ( )  
    目的  重建肾脏的三维立体模型,模拟经皮肾镜碎石术在虚拟仿真手术和常规手术的效果。为临床教学和科研提供方法,为年轻医生快速缩短手术学习时间。   方法  随机选取2017年12月~2019年2月北京房山区良乡医院就诊的30例肾结石患者作为试验组,对照组是同期在该院进行体检的正常人30例。两组采集肾脏CT扫描数据,利用Mimics16.0软件通过图像分割和融合重建肾脏的三维立体模型;记录虚拟仿真手术的穿刺肾盏、穿刺点、穿刺深度和选择通道等观察指标,记录总住院时间、平均手术时间、平均出血量、平均术后住院时间及术后并发症的发生率。   结果  虚拟仿真手术与实际手术的穿刺点符合度为100%,两组平均住院时间差异无统计学意义(P>0.05);两组间平均出血量、平均术后住院时间及并发症发生率差异均有统计学意义(P<0.05),虚拟仿真手术平均出血量减少,平均术后住院时间缩短,发症发生率降低。   结论  虚拟仿真手术可实现肾结石患者的个体化术前评估和手术设计,为临床医生准确地诊断和治疗提供依据。
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    解剖学
    腓骨肌滑车分型及其与跟骨的相关性
    梁力伟 廖立青
    2021 (4):  618-620.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.017
    摘要 ( )   PDF(4599KB) ( )  
    目的  对腓骨肌滑车大小进行测量及分型,并分析其与跟骨的相关性。   方法  在824例跟骨标本中,测量腓骨肌滑车的长度、宽度和高度,并按照扁平型、凸起型、凹型、隧道型4种形态进行分类统计。   结果  腓骨肌滑车出现概率为62.5%,其平均长、宽、高分别为(11.5±3.32)(2.56~23.14)mm、(6.27±2.20)(1.34~14.99)mm 和(2.69±1.30)(0.41~8.18)mm,4种分型为扁平形191例(37.09%),凸起型189例(36.7%),凹陷型131例(25.44%),隧道型4例(0.77%)。   结论  这些分型与大小统计数据有助于腓骨肌腱病的病理学研究,对腓骨肌滑车增生判定和临床治疗有指导意义。
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    细胞和分子生物学
    破骨细胞释放凋亡小体微小RNA-30a对成骨活性的影响
    符义亮 袁凤来
    2021 (4):  561-566.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.010
    摘要 ( )   PDF(8947KB) ( )  
    目的  探讨破骨细胞凋亡释放凋亡小体介导成骨活性的作用。   方法 通过小鼠(n=10)骨髓单核细胞体外诱导破骨细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和细胞骨架F-actin与DAPI双标免疫荧光鉴定破骨细胞,破骨细胞与小鼠成骨细胞MC-3T3E1共培养体系,DNA片段化ELISA分析破骨细胞凋亡,凋亡小体标志物检测,骨形成标志物Real-time PCR分析,凋亡小体微小RNA (miRNA)表达谱芯片筛查。   结果  100 μmol/L 阿伦膦酸钠(ALN) 诱导成熟破骨细胞凋亡,并释放凋亡小体;Western blotting检测表明,ALN诱导凋亡小体特异性表面标志物蛋白表达增强;破骨细胞凋亡小体蛋白C3b表达增高与成骨细胞活性负相关;凋亡小体表达谱芯片筛查提示,miR-30a与骨形成标志物血清碱性磷酸酶(ALP)相关。   结论  破骨细胞凋亡释放的凋亡小体携带miR-30a抑制成骨细胞活性,凋亡小体可能参与破骨细胞与成骨细胞的对话。
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    胰岛素样生长因子2通过磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路调控人卵巢颗粒细胞增殖的机制
    丁祥云 马永臻 尹华伟 段君君 李真 庄园 张琳
    2021 (4):  567-573.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.011
    摘要 ( )   PDF(3710KB) ( )  
    目的  检测胰岛素样生长因子2(IGF2)对人卵巢颗粒细胞(KGN细胞)增殖的调控作用及作用机制。   方法  将体外培养的KGN细胞,分不同浓度IGF2处理组(对照组和25 μg/L、50 μg/L、100 μg/L IGF2组)和磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路干预组(以LY294002干预处理将细胞分对照组、100μg/L IGF2组、LY294002组和IGF2+LY294002组)。采用MTS和5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)法检测IGF2对KGN细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞培养液上清中雌激素、孕激素的含量,Western blotting法检测各组胰岛素样生长因子受体1(IGF1R)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)及CYP19A1蛋白表达。   结果  随着IGF2的浓度梯度增高,KGN细胞的增殖率及雌激素、孕激素的分泌量逐渐升高,以 100 μg/L IGF2处理组的细胞增殖率和激素水平最高 (P<0.01),而抑制PI3K/Akt信号通路,细胞增殖率和激素的分泌量均明显降低(P<0.01);Western blotting结果显示,IGF1R、p-Akt及CYP19A1 蛋白表达水平随着IGF2的浓度梯度逐渐升高(P<0.05),而干预PI3K/Akt信号通路可影响上述蛋白的表达,与对照组相比,IGF2组和IGF2+ LY294002组IGF1R及p-Akt蛋白表达均明显升高(P<0.01),CYP19A1在IGF2组明显升高(P<0.01),LY294002组p-Akt及 CYP19A1蛋白明显降低(P<0.05),IGF1R的表达差异无统计学意义。与IGF2组相比,IGF2+LY294002组p-Akt及CYP19A1蛋白表达降低(P<0.01),IGF1R的表达差异无统计学意义,LY294002组p-Akt 及CYP19A1蛋白表达量均显著降低(P<0.01)。  结论  IGF2 可能由IGF1R介导通过PI3K/Akt 信号通路促进人卵巢颗粒细胞的增殖及分泌功能。
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    大鼠肝再生中环状RNA表达谱的变化及其对自噬的影响
    王棋文 姚奋杰 杨卓菲 郭学强 穆萌萌 周运 徐存拴
    2021 (4):  581-588.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.013
    摘要 ( )   PDF(9244KB) ( )  
    目的  探讨大鼠肝再生中环状RNA(circRNA)的表达变化以及对自噬的影响。   方法  以60只大鼠 2/3 肝切除0 h、 2 h、6 h、12 h、24 h、30 h、36 h、72 h、120 h和168 h后的再生肝circRNAs、微小RNAs(miRNAs)、mRNA的高通量测序数据为基础,分析其在肝再生中的表达变化,进一步用miRanda aug 2010软件预测circRNA-miRNA和miRNA-mRNA靶标关系,并根据基因功能→miRNA功能→circRNA功能反向推测得到支配大鼠肝脏自噬的肝再生相关circRNAs和miRNAs,并构建它们的相互作用网络。   结果  与肝再生自噬相关的circRNAs、miRNAs、mRNA分别有102、42、153种。利用生物信息学分析,发现44种circRNAs、13种miRNAs及17种mRNA之间有相互作用关系,并以此构建了它们的共表达网络。   结论  筛选出了与肝再生自噬相关的circRNAs、miRNAs和mRNA,并构建了相互作用网络图谱。
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    组织学胚胎学发育生物学
    黄芪甲苷通过toll样受体4/核因子κB通路介导辐射所致肾损伤的防护作用
    徐郁琴 丁艳平 刘淑宁 康洁 邵宝平
    2021 (4):  621-627.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.018
    摘要 ( )   PDF(10498KB) ( )  
    目的  探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)是否通过toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)介导的信号通路对辐射诱导肾脏损伤起到保护作用。   方法  将小鼠分为正常对照组、DMSO溶剂组、辐射组(IR)、IR + AS-Ⅳ 20 mg/kg 组和IR + AS-Ⅳ 40 mg/kg 组。小鼠给予AS-Ⅳ腹腔注射1个月后,以8Gy的60Coγ进行全身辐射。测定血清肌酐(Cr)和尿酸(BUA)的含量,进行肾组织HE和免疫组织化学染色,并检测肾脏TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白的表达情况。   结果  与对照组相比,辐射组小鼠血清中Cr和BUA含量明显升高(P<0.001),肾小球萎缩,肾小管扩张,TLR4和髓样分化因子88(MyD88)阳性表达明显增多(P<0.001),且TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白[TLR4、MyD88、NF-κB、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)]表达极显著升高(P<0.01);AS-Ⅳ预处理能降低血清中Cr和BUA的含量(P<0.05, P<0.01或 P<0.001),明显改善辐射所致的病理反应,降低TLR4/NF-κB 信号通路相关蛋白的表达(P<0.05或 P<0.01)。   结论  AS-Ⅳ可能通过TLR4/NF-κB信号通路下调炎症因子的释放,从而改善辐射诱导的小鼠肾损伤,发挥保护作用。
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    细胞和分子生物学
    两种微血管内皮细胞糖链表达的凝集素细胞化学染色特征
    杨思宇 杨重锦 张志欢 穆祥 张永红 张涛
    2021 (4):  574-580.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.012
    摘要 ( )   PDF(14956KB) ( )  
    目的  明确两种微血管内皮细胞(MVECs)糖链表达的特点。   方法  复苏冻存的大鼠空肠黏膜MVECs;取3日龄SPF仔猪肺组织,采用胶原酶消化法和差速贴壁法分离培养猪肺MVECs;采用凝集素细胞化学方法,检测刀豆凝集素(Con A)、菜豆红细胞凝集素(PHA-E)、蓖麻凝集素Ⅰ(RCA-Ⅰ)、番茄凝集素(LEL)、黑接骨木凝集素(SNA)、荆豆凝集素Ⅰ(UEA-Ⅰ)、麦胚凝集素(WGA)和双花扁豆凝集素(DBA)共8种凝集素在两种MVECs的染色情况。   结果  大鼠空肠黏膜MVECs对Con A、WGA和LEL呈强阳性着色,PHA-E、SNA和RCA-Ⅰ呈中等阳性着色,DBA呈弱阳性着色,UEA-Ⅰ呈阴性着色;猪肺MVECs对Con A和PHA-E呈强阳性着色,RCA-Ⅰ呈中等阳性着色,LEL和SNA呈弱阳性着色,UEA-Ⅰ、WGA和DBA呈阴性着色。   结论  两种MVECs的糖链表达具有显著异质性,大鼠空肠黏膜MVECs和猪肺MVECs均不同水平地表达甘露糖、半乳糖、1, 3-N-乙酰葡糖胺和唾液酸,N-乙酰葡糖胺和N-乙酰半乳糖胺表达于前者不表达于后者,岩藻糖在两者均不表达。
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    组织学胚胎学发育生物学
    人参皂苷Re对重症急性胰腺炎小鼠小肠黏膜的影响及调控机制
    龙润 许亚培 杨铸锋 杨静 李艳红
    2021 (4):  628-634.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.019
    摘要 ( )   PDF(4532KB) ( )  
    目的  探讨人参皂苷Re通过调控 Janus激酶2/信号转导子与转录激活子3(JAK2/STAT3)通路对重症急性胰腺炎(SAP)小鼠小肠黏膜的影响及作用机制。   方法  48只小鼠分为对照组、SAP组、SAP+人参皂苷Re组和SAP+人参皂苷Re+LY2784544组(n=12)。通过腹腔注射雨蛙肽溶液(禁食12 h后,100 μg/kg × 6次,注射间隔60 min)的方法建立SAP模型。腹腔注射人参皂苷Re(4 mg/kg,每日1次,连续7 d)。通过腹腔注射 12.7 mg/kg LY2784544来抑制JAK2/STAT3通路。检测各组胰腺指数、血清淀粉酶和炎性因子水平;检测D-乳酸和FITC-D水平分析小肠黏膜屏障功能;HE染色观察胰腺组织和小肠黏膜组织损伤情况;Western blotting检测小肠黏膜组织中凋亡蛋白Bax和Bcl-2的水平;Real-time PCR和Western blotting检测胰腺组织和小肠黏膜组织JAK2/STAT3通路水平。   结果  SAP组小鼠胰腺指数、血清淀粉酶、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、FITC-D、D-乳酸、Bax蛋白水平、胰腺组织和小肠组织中JAK2和STAT3 mRNA和蛋白水平均显著高于对照组,而Bcl-2蛋白显著低于对照组(P<0.05)。SAP+人参皂苷Re组小鼠Bcl-2蛋白显著高于SAP组,其余指标显著低于SAP组(P<0.05)。SAP+人参皂苷Re+LY2784544组的Bcl-2蛋白显著高于SAP+人参皂苷Re组,其余指标显著低于SAP+人参皂苷Re组(P<0.05)。   结论  人参皂苷Re可能通过抑制JAK/STAT通路缓解炎性反应减轻SAP模型小鼠的胰腺损伤, 并通过抑制细胞的凋亡保护小肠黏膜屏障。
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