当期目录

2018年, 49卷, 1期
刊出日期：2017-02-06 上一期    下一期
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细胞和分子生物学
人类学
肿瘤生物学
组织学胚胎学发育生物学
解剖学
神经生物学
综述
医学教育
生物工程学


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细胞和分子生物学

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小鼠精子发生相关蛋白3基因在小鼠生精细胞的特异表达及对HEK 293T细胞凋亡和自噬的影响 王玉晶 温丽敏 白欣艳 曹睿 王海龙 郭睿 2018 (1):  41-48.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.007 摘要 ( )   PDF(917KB) ( )   目的 检测小鼠精子发生相关蛋白3（spata3）基因在小鼠生精细胞的表达情况，并借助过表达细胞模型进一步分析该基因对人胚肾HEK 293T细胞凋亡及自噬的影响，旨在探讨spata3在精子发生过程中的意义。 方法 分别采用RT-PCR和免疫印迹法检测spata3基因mRNA及蛋白产物在小鼠各组织中的表达；应用免疫组织化学和免疫荧光染色观察SPATA3蛋白在生精细胞中的定位；借助脂质体将真核表达载体Plv-EGFP-2 (a) puro-spata3瞬时转染HEK 293T细胞，进一步在蛋白水平分析细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、多聚ADP-核糖聚合酶（PARP）、BAX和Bcl-2及自噬相关蛋白LC3A/B的变化。 结果 Spata3基因及其编码产物在小鼠睾丸组织特异表达；粗线期精母细胞和圆形精子细胞的胞质与胞核均有显著SPATA3蛋白的阳性着色，长形精子细胞的胞质也有大量分布；过表达spata3的HEK 293T细胞内活化型Caspase-3和PARP降解产物的含量较对照组差异无显著性，BAX表达量0.815±0.020较裸细胞组0.469±0.012和空载体转染组0.588±0.018均有所增高，Bcl-2含量0.214±0.020低于裸细胞0.507±0.021和空载体转染组0.545±0.024，LC3A/B-Ⅱ的表达量0.741±0.037则显著高于裸细胞组0.136±0.011和空载体转染组0.169±0.012。 结论 Spata3基因在小鼠生精细胞特异表达，过表达spata3对HEK 293T细胞凋亡无明显影响，但可以促进细胞自噬。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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奥贝胆酸对非酒精性脂肪肝大鼠法尼醇X受体及细胞色素P450家族成员7A1基因表达的影响 林浩 梁大伟 曾建峰 李述剑 王建福 李飞 2018 (1):  49-55.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.008 摘要 ( )   PDF(644KB) ( )   目的 探讨奥贝胆酸对非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠法尼醇X受体（FXR）蛋白、细胞色素P450家族成员7A1（CYP 7A1）蛋白及其基因表达的影响，及保肝作用。 方法 雄性SD大鼠52只通过高脂饲料喂养建立大鼠非酒精性脂肪肝模型；设置对照组11只，模型组、奥低组、奥中组和奥高组共41只，给药4周后，取大鼠相同部位肝脏，免疫组织化学法测定FXR蛋白表达、RT-PCR检测FXR mRNA，Western blotting法检测CYP 7A1蛋白、RT-PCR检测CYP 7A1 mRNA的表达水平；通过大鼠肝指数，外周血谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）的浓度，及肝脏组织切片观察，评估肝功能。 结果 高脂饲料喂养10周后，大鼠具有典型的NAFLD特征，模型建立成功。模型组的FXR蛋白和FXR mRNA表达水平显著低于对照组（P＜0.05），奥低组和奥中组的FXR蛋白和FXR mRNA表达水平与模型组相比，差异无统计学意义（P＞0.05），奥高组的FXR蛋白和FXR mRNA表达水平显著高于模型组（P＜0.05）；模型组、奥低组和奥中组的吸光度值显著低于对照组（P＜0.05），奥高组显著升高，与对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。模型组的CYP 7A1蛋白和CYP 7A1 mRNA表达水平显著高于对照组（P＜0.05），奥低组和奥中组的CYP 7A1蛋白和CYP 7A1 mRNA的表达水平与模型组相比，差异无统计学意义（P＞0.05），奥高组的CYP 7A1蛋白和CYP 7A1 mRNA表达水平显著低于模型组（P＜0.05）。与对照组相比，模型组的肝指数（%）显著增大（P＜0.05）；奥低组和奥中组的肝指数（%）与模型组相比，差异无统计学意义（P＞0.05），奥高组肝指数（%）显著低于模型组（P＜0.05）。与对照组相比，模型组的ALT、AST和ALP的浓度显著升高（P＜0.05）；奥贝胆酸组的ALT、AST和ALP浓度显著低于模型组（P＜0.05），且随着奥贝胆酸给药量的增加，ALT、AST和ALP的浓度逐渐降低；肝组织切片观察结果显示，奥贝胆酸呈剂量依赖性改善大鼠肝组织。 结论 奥贝胆酸高剂量能显著上调FXR蛋白及其基因的表达，并抑制CYP 7A1蛋白及其基因的表达，显著改善大鼠肝功能及肝组织病理状态。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

人类学

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藏族和汉族青年人群掌指形态特征分析 钟铧 张海龙 席焕久 李幼琼 昂旺格桑 于泽明 2018 (1):  113-117.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.019 摘要 ( )   PDF(210KB) ( )   目的 探讨西藏地区常人的手掌长度、宽度和厚度等特征，为补充体育科学、体质人类学基础资料和相关临床（行为）评估提供参考数据。 方法 利用活体测量法，选择拉萨市自愿参加的大学生为研究对象。有效调查对象216例，年龄18～24岁，平均年龄（22.12±3.06）岁，其中男性136例（藏族64例，汉族72例），女性80例（藏族40例，汉族40例）。采用电子游标卡尺测量被试者左侧手长、指长和掌长等27项直接测量指标；通过手长和手宽计算手长宽指数和手面积等2项间接指标。 结果 藏族男性与汉族男性比较，手长、掌厚和手长宽指数差异存在显著性（P＜0.05，0.01）；藏族女性与汉族女性比较，手长、手背长、手宽、掌长、掌宽、拇指长、示指长、中指长、环指长、小指长、拇指指关节宽、中指近侧指关节宽、中指远侧指关节宽、环指近侧指关节宽、中指近侧指关节厚和手面积差异存在显著性（P＜0.05，0.01）。藏族青年掌指形态不同性别间比较，除掌厚、掌尺侧厚和手长宽指数外（P＞0.05），其他测量指标值均为男性大于女性（P＜0.05，0.01）；汉族青年掌指形态不同性别间比较，除掌宽和手长宽指数外（P＞0.05），其他测量指标值均为男性大于女性（P＜0.05，0.01）。 结论 藏族男青年的掌指形态较汉族呈现出手掌较厚和手长略短的特点，藏族女青年的掌指形态在长度、宽度和厚度上小于汉族女青年。女性掌指形态在长度、宽度和厚度上均小于男性。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

肿瘤生物学

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组织蛋白酶D在小鼠肺腺癌发生发展中的表达特点及其意义 张慧娟 郑晓伟 乔玲 常文静 卢锋 贾彩云 2018 (1):  56-62.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.009 摘要 ( )   PDF(816KB) ( )   目的 探索组织蛋白酶D（CTSD）在肺腺癌发生发展中的表达特点及其意义。 方法 使用氨基甲酸乙酯腹腔注射建立BALB/c小鼠肺腺癌模型；蛋白质组放射性核素相对标记和绝对定量（iTRAQ）分析筛选差异表达蛋白；免疫组织化学和Western blotting检测蛋白在肺腺癌不同病理时期的表达变化特点。 结果 CTSD蛋白在肺腺癌早期表达较对照组明显增强；免疫组织化学和Western blotting检验分析发现，随着肺腺癌病程进展，CTD表达呈上升趋势，在肺腺癌晚期，实验组为对照组13.7倍；出现肝转移实验组小鼠肺组织CTSD呈现不同异构体。 结论 CTSD是肺组织癌变过程中的重要蛋白，其异常表达和修饰可能在肺腺癌发生、发展和转移中起重要作用，可能成为肺腺癌早期诊断的分子指标。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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黄芪多糖联合顺铂对小鼠Lewis肺癌移植瘤Caspase-3、Smac/Diablo表达的影响 庄梦婕 刘丹 陈彦文 明海霞 2018 (1):  63-69.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.010 摘要 ( )   PDF(718KB) ( )   目的 观察黄芪多糖（APS）及联合顺铂（DDP）对小鼠Lewis肺癌（LLC）移植瘤凋亡蛋白Caspase-3、Smac/Diablo表达的影响，探讨黄芪多糖抗肿瘤的机制。方法 90只C57BL/6 J小鼠，随机分为9组，正常组、模型组、APS低、中、高剂量组、DDP组、联合低、中、高剂量组，每组10只。除正常组外，其余80只均接种肺癌移植瘤细胞（1×1010/L）于右前肢腋窝皮下，制造模型为荷瘤小鼠。制造模型次日起，治疗组的小鼠给予腹腔注射0.3 ml药物。顺铂每周注射1次，其余药物每日1次，正常组和模型组注射等体积生理盐水，连续20 d，于第21天处死。肿瘤组织进行HE染色并行病理学观察；免疫组织化学染色和图像分析方法检测移植瘤细胞中的Caspase-3及Smac/Diablo的表达。 结果 荷瘤小鼠在APS（高）、联合（中）、联合（高）组的体质量变化，具有统计学意义。与模型组小鼠比较，肿瘤组织的病理组织学HE显示，APS（高）联合顺铂组的肿瘤细胞坏死最为明显；免疫组织化学法表明，治疗组的肿瘤组织中Caspase-3、Smac/Diablo蛋白表达水平均升高，联合（高）组升高最明显。 结论 APS及联合化疗药物DDP能抑制小鼠Lewis肺癌细胞的生长，其机制可能与升高Caspase-3、Smac/Diablo的表达有关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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双氢青蒿素对人胰腺癌细胞系增殖和凋亡的影响 朱文赫 许娜 徐俊杰 张红 李妍 吕士杰 张巍 2018 (1):  70-74.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.011 摘要 ( )   PDF(361KB) ( )   目的 探讨双氢青蒿素对人胰腺癌细胞(PANC-1)增殖活性及凋亡的影响，及其作用机制。 方法 30、60、120、240和480 μmol/L双氢青蒿素作用PANC-1 48 h后，采用MTT法检测双氢青蒿素对PANC-1增殖活性的影响，流式细胞术检测其细胞周期和凋亡的变化，Western blotting检测细胞内周期相关蛋白cyclin B1、Cdk1、p21及凋亡相关蛋白Bcl-2, Bax, Caspase-3, Caspase-9和细胞色素C（Cyto C）蛋白表达变化。 结果 MTT实验结果表明，30～480 μmol/L双氢青蒿素对PANC-1增殖活性具有明显的抑制作用(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示，双氢青蒿素可以使PANC-1细胞周期阻滞于G2/M期，并诱发PANC-1细胞发生凋亡，且随药物浓度呈现升高趋势（P<0.05）。Western blotting结果显示，双氢青蒿素作用后周期相关蛋白Cdk1和Cyclin B1蛋白表达降低，而P21蛋白表达升高。凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达下调，Bax蛋白表达上调，Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高， cleaved Caspase-3，cleaved Caspase-9和Cyto C蛋白表达升高。 结论 双氢青蒿素能抑制PANC-1增殖并诱发细胞凋亡，其凋亡机制可能与线粒体途径相关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

组织学胚胎学发育生物学

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小鼠胚胎心脏房室管心肌与心外膜的形态学变化 栗前 曹锡梅 李海荣 景雅 乔从进 杨艳萍 2018 (1):  93-97.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.015 摘要 ( )   PDF(689KB) ( )   目的 探讨小鼠胚胎心脏房室管分隔、重塑过程中房室管心肌与心外膜的变化规律。 方法 选用抗心肌肌球蛋白轻链Ⅱa（MLC2a）抗体、抗心肌肌球蛋白轻链Ⅱ（MLC-2）抗体、抗转录因子Tbx3（Tbx3）抗体、抗淋巴增强因子1（Lef1）抗体，对25只胚龄10～15 d 小鼠胚胎切片进行免疫组织化学和免疫荧光染色。结果 胚龄10～15 d，房室管心肌呈MLC2a阳性、MLC-2阴性，同时表达Tbx3。胚龄11～12 d，心外膜形成。胚龄12～13 d，两侧房室管心内膜垫彼此接近并融合形成房室瓣，心外膜来源间充质细胞数量增加，部分表达Lef1。胚龄13 d开始，部分心外膜来源间充质细胞穿过心肌延伸入壁侧房室瓣。胚龄15 d，房室瓣膜基部直接与MLC2a阳性的房室管心肌相连。 结论 小鼠胚胎房室管心肌发育为成体心脏房室环瓣膜基部的心肌；心外膜通过产生间充质细胞参与房室瓣的形成。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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转录因子Tbx3在小鼠胚胎第二生心区的表达规律 杨艳萍 栗前 李杰 曹锡梅 李海荣 景雅 乔从进 张涛 2018 (1):  87-92.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.014 摘要 ( )   PDF(1037KB) ( )   目的 探讨转录因子Tbx3在小鼠胚胎第二生心区（SHF）的时空表达模式，为其对SHF的调节作用提供形态学依据。 方法 40只胚龄9～15 d小鼠胚胎心脏连续石蜡切片，用抗胰岛素基因增强子结合蛋白1（ISL-1）抗体、抗心肌肌球蛋白重链（MHC）抗体、抗心肌肌球蛋白轻链Ⅱa（MLC2a）抗体、小鼠抗增殖细胞核抗体（PCNA）、抗Tbx3抗体进行免疫组织化学和免疫荧光双标染色。 结果 胚龄9 d，咽腹侧内胚层增厚，且表达Tbx3与SHF标记物ISL-1。胚龄10～12 d，咽腹侧间充质出现ISL-1阳性细胞并逐渐增多，部分细胞共表达Tbx3。动脉囊壁、心包腔背侧壁以及流出道远端壁也可见ISL-1表达，Tbx3在这些部位均呈阴性。心背侧间充质突（DMP）内可见ISL-1、Tbx3散在表达。胚龄13～15 d，DMP逐渐心肌化，同时可见Tbx3阳性细胞分布。 结论 Tbx3在SHF的表达集中在咽腹侧间充质，可能参与调节SHF前体细胞的存在与增殖；但在后第二生心区（pSHF）的作用与在动脉端的SHF可能不同。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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PERK-eIF2α-ATF4信号通路参与调控磷酸三钙磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解 陈岳良 张云 楼倩萍 王成龙 杜康慧 沈琪华 毛红娇 2018 (1):  98-103.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.016 摘要 ( )   PDF(409KB) ( )   目的 探讨蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）-真核细胞起始因子2α（eIF2α）-活化转录因子4（ATF4）介导的内质网应激通路在磷酸三钙（TCP）磨损颗粒诱导假体周围骨溶解中的作用。 方法 取雄性ICR小鼠30只，随机分为3组：假手术组（sham，n=10）、TCP磨损颗粒组（模型组，n=10）和salubrinal干预组(SAL，n=10)。采用TCP磨损颗粒诱导小鼠颅骨溶解模型，于术后第2天颅顶局部注射SAL（1 mg/kg），每隔2 d 1次，持续干预2周。实验结束后处死动物取颅骨和外周血。Western blotting法检测TCP磨损颗粒植入部位周围骨组织中内质网应激分子伴侣葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、C/EBP同源蛋白（CHOP）表达水平及PERK-eIF2α-ATF4信号通路的活化情况；HE染色和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察SAL对假体周围骨溶解和破骨细胞形成的影响；Real-time PCR检测SAL对破骨细胞活化相关基因抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和 c-fos的mRNA水平；ELISA法检测SAL对血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和前列腺素E2（PGE2）水平的影响。 结果 TCP磨损颗粒可诱导假体周围骨组织发生内质网应激反应，同时激活PERK-eIF2α-ATF4信号通路，表现为TCP磨损颗粒组小鼠颅骨组织中内质网应激通路蛋白GRP78、CHOP和磷酸化PERK（p-PERK）、磷酸化eIF2α（p-eIF2α）和ATF4蛋白表达均显著上调，而PERK和eIF2α蛋白明显下调（P<0.05）；而颅顶局部注射eIF2α特异性抑制剂SAL可明显阻止TCP磨损颗粒诱导假体周围破骨细胞形成和骨溶解，减少TRAP、MMP-9和cathepsin K 的mRNA水平（P<0.05）；同时抑制TNF-α、PGE2和IL-1β等炎症因子的产生（P<0.05）。 结论 PERK-eIF2α-ATF4介导的内质网应激通路参与调控TCP磨损颗粒诱导的小鼠颅骨溶解；抑制该信号通路可减轻TCP磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解和关节松动。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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脑源性神经营养因子调控热应激条件下小鼠着床前胚胎发育和凋亡 刘犇 2018 (1):  104-107.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.017 摘要 ( )   PDF(383KB) ( )   目的 探讨脑源性神经营养因子（BDNF）对正常和热应激条件下小鼠着床前胚胎发育和凋亡的影响。 方法 150只雌性昆明小鼠用于实验，2细胞期胚胎添加或不添加10μg/L BDNF进行体外培养，早期囊胚37 ℃条件下或41 ℃热处理2 h，观察胚胎发育情况，TUNEL法和Hoechst 33342分析囊胚细胞数量和凋亡情况，荧光技术分析Caspase-9的活力。 结果 在37 ℃条件下BDNF能够促进早期囊胚发育，增加囊胚细胞数量，降低凋亡率及Caspase-9的活力，热应激能够降低早期囊胚的发育能力，减少囊胚细胞数量而增加凋亡率，且中等和高Caspase-9活力囊胚的比例热处理后明显增加，当培养基中添加10μg/L BDNF时，能够明显缓解热应激对早期囊胚发育和质量的不利影响。 结论 BDNF对37 ℃或41 ℃热应激条件下小鼠着床前胚胎发育、细胞数量、凋亡和Caspase-9活力起到一定的调控作用。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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转化生长因子-β和Smad4在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达 袁丽娟 任君旭 姬宏宇 张静 张娟 丁艳 2018 (1):  108-112.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.018 摘要 ( )   PDF(438KB) ( )   目的 探讨转化生长因子-β（TGF-β）、Smad4 在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达，分析其与卵巢功能衰退的关系。 方法 雌性SD大鼠分为对照组（C组，6月龄，阴道涂片筛选，n=9）、绝经过渡期组（MT组，12~14月龄，阴道涂片筛选，n=8），大鼠麻醉处死后迅速取出卵巢，采用机械分离方法释放卵泡颗粒细胞，于CO2培养箱中培养，利用免疫细胞化学法检测促卵泡刺激素受体（FSHR）蛋白的表达，鉴定卵巢颗粒细胞；免疫细胞化学法检测TGF-β、Smad4蛋白在两组卵巢颗粒细胞的表达；采用Real-time PCR的方法检测各组颗粒细胞中TGF-β、Smad4 mRNA的表达。 结果 免疫细胞化学显示分离培养的颗粒细胞纯度＞95%，MT组TGF-β、Smad4蛋白表达水平低于对照组（P<0.05）；Real-time PCR结果显示，两组均有TGF-β、Smad4 mRNA的表达，MT组TGF-β、Smad4 mRNA表达水平显著低于对照组（P<0.05）。 结论 TGF-β、Smad4参与绝经过渡期大鼠卵巢功能的衰退过程，绝经过渡期大鼠功能衰退的部分原因可能与卵巢颗粒细胞中TGF-β、Smad4 的表达降低有关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

解剖学

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Apelin-13减轻糖尿病小鼠主动脉损伤 张佳 王炀佳 曾翔俊 2018 (1):  81-86.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.013 摘要 ( )   PDF(757KB) ( )   目的 探讨apelin-13对糖尿病小鼠主动脉结构的影响及其机制。 方法 对照组：8周龄C57/BL6j小鼠6只；糖尿病组：8周龄kkAy小鼠6只；apelin-13处理组：kkAy小鼠6只，皮下埋微量植渗透泵释放apelin-13［30μg/（kg·d) ］。4周后取材，进行HE、Masson染色，光学显微镜下观察血管的形态学改变及胶原纤维的沉积情况，弹性蛋白染色观察血管弹力纤维板的形态学改变，免疫组织化学染色分析血管内信号蛋白转化生长因子β1（TGF-β1）的表达水平。 结果 与正常对照组相比，糖尿病组小鼠血管壁中膜明显增厚，主动脉内胶原纤维含量明显升高（P<0.05）, 弹力纤维排列紊乱、断裂，同时血管壁TGF-β1表达增强（P<0.05），而apelin-13处理组小鼠血管壁中膜较糖尿病组明显变薄，血管间质内胶原纤维的含量较糖尿病组小鼠显著下降(P<0.05)，弹力纤维排列较整齐，血管壁TGF-β1表达也显著下调(P<0.05)。 结论 外源性Apelin-13可能通过抑制TGF-β1以及平滑肌细胞增殖减轻糖尿病引起的主动脉纤维化以及血管中膜弹力纤维损伤。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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肿瘤发生相关的腮腺体表分区的临床解剖 许向亮 孙志鹏 王佃灿 王建伟 张卫光 2018 (1):  75-80.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.012 摘要 ( )   PDF(416KB) ( )   目的 基于腮腺的解剖学和肿瘤影像学资料对人体腮腺进行体表解剖分区。 方法 基于腮腺肿瘤的CT影像学资料，本研究提出了腮腺解剖分区的方法，以鼻翼、口角、耳垂以及下颌支后缘等体表标志点，确定A、B两条线，将腮腺分为Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ区。解剖观察腮腺区结构，并对影像学上腮腺肿瘤的发生部位进行分区分析。结果 腮腺Ⅰ区内主要包括面神经分支、耳大神经、颈外静脉及下颌后静脉，Ⅱ区内主要包括面神经分支以及面横动脉，Ⅲ区内主要包括耳颞神经以及颞浅动、静脉。对照分析影像学资料，可以发现在不跨区生长的肿瘤中，Ⅰ区肿瘤的发生率较高（38.89%），肿瘤跨区生长不会发生在Ⅰ区/Ⅱ区内，发生跨区生长的肿瘤大部分为直径较大的肿瘤，其中62.5%肿瘤直径大于3 cm。 结论 本研究提出的腮腺解剖分区的方法，具有一定的解剖学和肿瘤生物学价值，可为腮腺肿瘤的临床手术治疗提供参考。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

神经生物学

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热休克蛋白70与汉坦病毒持续性感染乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞 贺帅 杨守京 2018 (1):  7-13.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.002 摘要 ( )   PDF(522KB) ( )   目的 探讨热休克蛋白70（HSP70）过表达可能有助于汉坦病毒（HTNV）持续感染。 方法 在HTNV持续性感染过程中，通过Westen blotting及RT-PCR检测大脑皮层星形胶质细胞中HSP70的表达情况，并通过免疫荧光显微技术、AnnexinV 及RT-PCR检测细胞凋亡。 结果 与对照组相比，感染HTNV 76-118或 SEOV L99 的星形胶质细胞HSP70蛋白的表达增加，且在HTNV 76-118感染后3d或SEOV L99感染后2d HSP70蛋白表达达到峰值（n=15，P＜0.01，P＜0.05）；感染HTNV 76-118及SEOV L99上调星形胶质细胞HSP70基因的表达，且在HTNV 76-118感染后2~5d或SEOV L99感染后2~4d HSP70基因表达达到峰值（n=15，P＜0.01，P＜0.05）。HTNV76-118或SEOV L99感染过程中，星形胶质细胞无细胞病变效应，并且病毒复制未诱导细胞凋亡。 结论 HTNV感染星形胶质细胞激活了HSP70，这种改变可能抑制细胞凋亡，促进病毒持续性感染。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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皮质脊髓束损伤后胶质细胞激活相关microRNA的筛选与验证 刘晓东 王艺儒 吕金阳 徐晓燕 张致祎 王鑫 吕广明 2018 (1):  14-19.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.003 摘要 ( )   PDF(550KB) ( )   目的 检测皮质脊髓束损伤头侧和尾侧microRNA及其靶基因mRNA的表达变化，探讨microRNA在皮质脊髓束损伤修复过程中的生物学作用。 方法 在左侧延髓锥体切断大鼠锥体束（30只），建立单侧大鼠皮质脊髓束损伤模型，采用BBB评分进行行为学评价；实验以左侧大鼠皮质脊髓束损伤模型作为研究对象，利用生物信息学方法筛选差异表达的microRNA预测靶基因与mRNA的差异筛选取交集，进行microRNA和mRNA共表达分析；Real-timePCR检测12只大鼠miR-342-5p、Irf8的表达水平；Western blotting检测6只大鼠Irf8、Iba1蛋白的表达变化。 结果 皮质脊髓束损伤后观察到右后肢运动不协调，BBB评分表明运动功能受限，但是6只大鼠没有完全瘫痪，损伤后2 h, 1、3、5和7 d BBB评分与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05），提示模型制备成功。头侧和尾侧5 d与2h 相比，聚集于与修复再生相关的生物学过程。Real-time PCR结果显示，尾侧5 d与2h相比，miR-342-5p表达差异有显著性（P<0.01），并且与Irf8呈现反向调节关系，而在头侧miR-342-5p表达差异无统计学意义（P>0.05）。Real-time PCR数据分析显示，Irf8与芯片结果一致，与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。Western blotting 结果显示，5 d和2h相比尾侧Irf8的表达显著增加，Iba1的表达明显增高，差异有统计学意义（P<0.01）。 结论 皮质脊髓束损伤后损伤头侧和尾侧均有显著性上调或下调的差异表达基因，在损伤尾侧miR-342-5p和Irf8呈反向调节，提示miR-342-5p与胶质细胞激活从而促进脊髓损伤修复再生密切相关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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DDX3和酪蛋白激酶1ε在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠脑干中的表达变化 张雅雯 王箐 原萌 刘焕彩 王巧真 丁昊宇 周风华 陈燕春 2018 (1):  1-6.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.001 摘要 ( )   PDF(814KB) ( )   目的 检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脑干中的表达变化，探讨DDX3和CK1ε在ALS脑干运动神经元变性中的作用。 方法 选取ALS转基因鼠33只，分别于发病早期（95d）、中期（108d）和晚期（122d）3个时间点剥离脑干，应用RT-PCR、Western blotting和免疫荧光染色技术分别检测ALS转基因鼠脑干组织中DDX3和CK1ε的表达规律，在脑干运动核团舌下神经（12N）和面神经（7N）中阳性细胞的分布特点及细胞定位，每组均选择相同数量的同窝野生型鼠作为对照。 结果 RT-PCR和Western blotting结果显示，与同窝野生型鼠相比，ALS转基因鼠脑干组织中DDX3和CK1εmRNA于95 d、108d、122d表达均无明显变化，DDX3和CK1ε蛋白在95d和108d表达上调，122d表达下调(P<0.01, P<0.001)。免疫荧光结果显示，在ALS鼠和野生型鼠脑干的12N和7N区域均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞，DDX3和CK1ε表达在神经元，在星形胶质细胞不表达。ALS鼠和野生型鼠DDX3和CK1ε免疫反应性具有差异。 结论 DDX3和CK1ε在脑干中的表达异常与ALS发病密切相关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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转铁蛋白受体1对淀粉样蛋白前体/早老素1转基因小鼠神经元的保护作用 王倩 范文娟 孙仪征 王来 程艳红 邓锦波 2018 (1):  20-28.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.004 摘要 ( )   PDF(976KB) ( )   目的 探讨转铁蛋白受体1(TfR1)在淀粉样蛋白前体（APP）/早老素1（PS1）转基因小鼠脑内异常表达情况及其对阿尔茨海默病（AD）神经元的保护作用。方法 首先，利用免疫荧光及Western blotting技术检测出生后1月（P1M）至P12M各发育时间点，APP/PS1转基因小鼠与野生型小鼠大脑TfR1的表达情况；其次，取APP/PS1转基因与野生型新生小鼠原代海马神经元培养，培养12 d后利用TfR1 shRNA质粒干扰TfR1基因的表达，利用Western blotting技术检测干扰后细胞TfR1的表达变化；ELISA技术检测TfR1干扰前后细胞β-淀粉样蛋白(Aβ)1-42的分泌量；利用微管相关蛋白2(MAP2)标记神经元突起，观察TfR1干扰前、后神经元突起的生长变化；最后，利用FM1-43染色观察由TfR1介导的轴质运输中囊泡的运输情况。 结果 在APP/PS1转基因小鼠生长发育过程中，随着年龄的增长TfR1的表达呈现先增加后减少的趋势，在P6M之后明显降低，且与对照组相比差异有显著性；TfR1 shRNA 干扰后可以使原代神经元细胞内TfR1基因沉默，使其突起明显变细、变长并影响囊泡的运输。与对照组相比，TfR1基因在APP/PS1转基因小鼠原代神经元中表达量减少，荧光减弱。 结论 APP、PS1基因突变可导致TfR1的表达下降；APP/PS1转基因小鼠原代神经元经TfR1 shRNA干扰Aβ1-42分泌量增多，影响神经元突起的生长，使轴质运输速率减慢，囊泡的活动减缓，加重AD病情。故TfR1的表达可以对神经元起到保护作用。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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血管活性肠肽对MPTP亚急性帕金森病模型小鼠突触的影响 吕娥 费学超 李侃 战同霞 李锋杰 付文玉 2018 (1):  29-34.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.005 摘要 ( )   PDF(626KB) ( )   目的 探讨血管活性肠肽(VIP) 对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导的帕金森病(PD)小鼠模型突触及其行为学的影响. 方法 雄性C57BL/6 J小鼠30只，随机分为生理盐水(NS)组、MPTP组、MPTP+VIP组。利用Tru Scan系统测定小鼠的行为学变化；免疫组织化学染色法检测黑质和纹状体区酪氨酸羟化酶(TH)的表达及纹状体区突触小泡膜蛋白 2（VAMP2）和突触素1 (SYN1)的表达变化；运用免疫印迹法检测VAMP2和SYN1的表达变化；并通过透射电子显微镜观察黑质区突触的结构改变。 结果 行为学结果统计学分析，MPTP组小鼠的垂直运动距离比对照组明显减少，而给予VIP的小鼠明显高于MPTP组小鼠。 MPTP组TH、VAMP2和SYN1表达均明显少于NS组，而MPTP+VIP组显著高于MPTP组。透射电子显微镜结果显示，NS组神经突触结构完整; 模型组神经突触数量少，突触间隙不清，突触前成分的线粒体出现髓样变，并且突触小泡数量减少；MPTP+VIP组神经突触结构基本正常。 结论 VIP可使MPTP模型小鼠VAMP2和SYN1的表达上调，减少突触结构的损伤，保护黑质纹状体系统TH的表达，从而改善其运动状态。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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自噬水平变化对心脏骤停心肺复苏后大鼠海马神经元凋亡的影响 马磊 王蓉 李海龙 马晓龙 陈伟 杨立山 2018 (1):  35-40.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.006 摘要 ( )   PDF(393KB) ( )   目的 探讨自噬水平变化对心脏骤停心肺复苏（CA/CPR）后大鼠海马神经元凋亡的影响。 方法 将40只大鼠随机分为假手术组（sham）、CA/CPR模型组（model）、雷帕霉素（Rapa）组（CA/CPR +Rapa）及3-甲基腺嘌呤（3-MA）组（CA/CPR +3-MA）。采用呼气末夹闭气管窒息法复制大鼠CA/CPR动物模型，分别给予自噬激动剂Rapa 0.2 mg/kg及自噬抑制剂3-MA 10 mg/kg进行干预。采用神经功能缺陷评分（NDS）评价CA/CPR大鼠神经功能；用TUNEL染色法检测大鼠海马神经元的凋亡变化；用RT-PCR和Western blotting法检测大鼠海马内微管蛋白轻链3（LC3）、Beclin-1、Bax、Bcl-2及Caspase-3 mRNA和蛋白的表达水平。 结果 与假手术组比较，CA/CPR模型组大鼠NDS评分明显降低；海马神经元TUNEL染色阳性细胞数明显增多，凋亡率显著升高；海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达上调，Bcl-2表达下调（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，CA/CPR+Rapa大鼠NDS评分明显降低，而海马神经元凋亡率明显有所增加，海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达明显上调，而Bcl-2表达则明显有所下降；CA/CPR +3-MA大鼠NDS评分明显升高，而海马神经元凋亡率下降，海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达明显下调，而Bcl-2表达则有所升高（P<0.05，P<0.01）。 结论 CA/CPR后自噬水平升高促进海马神经元凋亡，自噬水平降低抑制海马神经凋亡，两者相互作用共同参与CA/CPR的病理过程。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

综述

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Apelin/APJ信号在肝硬化及肝癌中的生物作用 林波 潘韦彤 孔静 吕心瑞 2018 (1):  127-131.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.022 摘要 ( )   PDF(264KB) ( )   Apelin/APJ信号在心脏、血管、脑、肺、胃肠道、肾脏和骨骼肌等多种组织中都有表达，可以参与多种细胞的信号转导过程，所以在调节人体生理和病理生理活动方面可发挥重要的调节作用。Apelin/APJ信号的作用主要包括调节心血管系统的稳态、维持水电解质的平衡、促进垂体激素释放、调节生物节律，还可以作为免疫调节因子对免疫系统进行调节。但是apelin/APJ信号在肝脏疾病中发挥什么样的作用还知之甚少。在肝脏疾病中，apelin/APJ信号可能参与到肝纤维化、肝硬化和肝癌的发生和发展，并且可抑制肝脏的再生。我们对apelin/APJ信号近年来在肝脏方面的研究做一综述。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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雄激素及其受体与多囊卵巢综合征 杨玫 林海伟 张宏权 徐小明 陈曦 2018 (1):  132-136.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.023 摘要 ( )   PDF(213KB) ( )   多囊卵巢综合征（PCOS）是育龄期妇女常见的一种内分泌代谢性疾病，发病率为5%～10%，其发病机制尚未完全阐明。高雄激素血症是PCOS的突出特点，尤其是卵巢局部的高雄激素环境是导致PCOS的关键原因，因此对高雄激素形成这一特征性改变的研究成为阐明PCOS病因的重点所在。雄激素主要通过激活雄激素受体（AR）来发挥作用，故AR的作用不容忽视，我们着重就雄激素和AR在PCOS发病中的作用作一综述。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

医学教育

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微创临床局部解剖学教学体系的建立和探索 刘平 张艳 江东 马彩红 王一婷 何美华 张卫光 2018 (1):  124-126.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.021 摘要 ( )   PDF(148KB) ( )   目的 随着临床医学中微创手术的广泛开展，传统局部解剖学的教学模式明显不切合于现在的临床应用，我们在近3年的局部解剖学教学中，尝试建立基础与临床相结合的临床微创局部解剖学教学体系，实现了医学生培养上的多赢。 方法 在北京大学医学部的3个年级临床医学专业的医学生中，分成传统局部解剖学（局解组）和微创局部解剖学（微创局解组）。微创局解组同学借助模拟腔镜等微创手术器械，开展微创临床解剖学的教学。 结果 与传统局解组相比，微创局解组同学在学习兴趣，学习的主动性，知识的牢固性，解剖动手能力，临床思维能力，解剖和临床知识的互补性，讨论及交流能力和师生互动等方面均有不同程度的提高。结论 微创解剖学教学体系不仅能够满足医学生尤其是临床医学生早期接触临床微创手术及手术器械的需要，并且还可以促进解剖学老师深入了解临床手术的进展，有利于进一步明确教学目的，并促进了基础解剖与临床进展的交流。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

生物工程学

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O型口蹄疫病毒VP1蛋白在大肠埃希菌中的可溶性表达、纯化及纳米样结构观察 郭玉堃 明胜利 郭婉莹 杨国宇 郭豫杰 2018 (1):  118-123.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.020 摘要 ( )   PDF(603KB) ( )   目的 本实验旨在高效表达可溶性的O型口蹄疫病毒VP1蛋白，并形成纳米样颗粒。 方法 根据O型口蹄疫病毒核酸序列，得到FMDV O/MYA/7/98株的VP1蛋白基因，并进行截短和优化，共73个氨基酸；同时，从肠道沙门菌(Salmonella enterica）中分离得到135个氨基酸铁蛋白(Fn)基因片段，将O型口蹄疫病毒VP1蛋白与铁蛋白串联，设计并合成了口蹄疫病毒VP1蛋白-铁蛋白基因片段，命名为SeFnt16798。构建了SeFnt16798融合Grifin、GST、MBP、Sumo、Thioredoxin、γ-crystallin、ArsC、PpiB、CeHSP17等9种不同可溶性标签的表达重组载体。分别转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中，异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，SDS-PAGE电泳对融合蛋白的可溶性表达进行检测，筛选高效可溶性表达的SeFnt16798融合蛋白。重组蛋白通过Ni-NTA Agarose亲和纯化，进行电子显微镜检测。结果 实验成功构建9个SeFnt16798表达载体；9个标签中，MBP与SeFnt16798蛋白相融合的可溶性表达效果最好，并获得了高纯度的MBP-SeFnt16798重组蛋白质；电子显微镜结果显示，MBP-SeFnt16798形成了纳米样颗粒。 结论 本实验建立了稳定获得SeFnt16798重组蛋白质的方法。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标