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    神经生物学
    长期酒精暴露诱导胰岛素抵抗及视网膜微血管损伤:神经鞘磷脂的可能作用
    徐高磊 王志新 赵静雅 陈文静 崔占军 王延芬 王卉 邓锦波* 高晓群
    2013 (4 ):  441-450.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.001
    摘要 ( )  

    目的 探讨长期酒精暴露诱导胰岛素抵抗对小鼠血视网膜屏障的损伤以及神经鞘磷脂(SM)可能的作用。 方法 选取神经鞘磷脂合成酶
    2(SMS2)基因敲除(SMS2-/-)和野生型(WT)小鼠76只,酒精暴露建立动物模型。用血糖仪测定血糖浓度,酶联免疫法(ELISA)测定血胰岛素浓
    度,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),利用免疫荧光染色、HE和电子显微镜观察血视网膜屏障的损伤。结果 长期酒精暴露引起小鼠胰岛素抵
    抗 (P <0.05),并出现血视网膜屏障的损伤,如无细胞毛细血管数增多(P <0.05),星形胶质细胞数量减少(P <0.05),内皮细胞和周细胞线粒
    体肿胀,嵴消失,基底膜欠清晰,呈剂量依赖性。和WT小鼠相比,SMS2-/-小鼠胰岛素抵抗指数较小和血视网膜屏障损伤程度较轻(P<0.05),
    提示SMS2-/-小鼠有延缓胰岛素抵抗形成和减少血视网膜屏障损伤的作用。结论 长期酒精暴露可以诱导胰岛素抵抗,并造成血视网膜屏障损
    伤,具有剂量依赖性;SMS2基因的缺失有延缓胰岛素抵抗的产生和减少血视网膜屏障损伤的作用。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    敲除淀粉样前体蛋白基因促进铝诱导的小鼠认知障碍损伤
    王冬梅 袁树民 张旭 张连峰*
    2013 (4 ):  451-455.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.002
    摘要 ( )  

    目的 淀粉样前体蛋白(APP)基因是与痴呆症发生发展相关的重要基因,利用APP基因敲除小鼠探讨铝诱导的认知障碍损伤,及APP对中
    毒性认知障碍损伤的作用。方法 3月龄同窝阴性小鼠分为野生对照组(WT)和铝处理组(WT+Al),APP敲除小鼠分为模型对照组(APP-/- )和
    模型处理组(APP-/- +Al),每组10只。铝处理组在粮食中加入相应剂量的乳酸铝,同窝阴性小鼠和APP-/-小鼠给予常规鼠粮作为对照,乳酸
    铝处理8周后进行水迷宫实验。HE染色观察小鼠脑组织神经病理改变;Western blotting检测糖原合成激酶3β(GSK-3β)和Caspase-3的活性变
    化。结果 与WT相比,WT+Al小鼠在原平台区域停留时间和穿越原平台区域次数减少了28.1%和18.8%,而APP-/- +Al小鼠在原平台区域停留时间
    和穿越原平台区域次数减少了44.1%和51%。Western blotting显示,WT+Al小鼠和APP-/-+Al小鼠脑组织中p-GSK-3β分别减少了17.4%和46.4%。结论 APP基因敲除促进铝诱导的神经毒性和学习记忆损伤。APP基因敲除导致GSK-3β的磷酸化水平降低、活性增高。由于GSK-3β活性增加对痴呆症具有促进作用,推测APP通过抑制GSK-3β活性在痴呆症发生过程中发挥保护效应。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    N-甲基-D-天门冬氨酸受体2A亚单位在SD成年雄性大鼠不同脑区的分布
    毕文杰 肖莉 郑翔*
    2013 (4 ):  456-462.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.003
    摘要 ( )  

    目的 获取大鼠脑部的N-甲基-D-天门冬氨酸受体2A(NMDAR 2A)表达强度分布的数据。方法 通过免疫组织化学染色和图像分析,对成年雄性SD大鼠(n=6)不同脑区的NMDAR 2A表达进行检测。结果 得到大鼠全脑各主要结构NMDAR 2A 表达强度的数据,并绘制图谱。结论
    获得的NMDAR 2A表达图谱可为原位检测鼠 脑NMDAR 2A的实验提供参考。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    雌激素对大鼠红核神经元保护作用的体视学定量
    韩笑 季达峰 李耀富 张夏南 秦建兵 吕广明*
    2013 (4 ):  463-467.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.004
    摘要 ( )  

    目的 观察雌激素(E2)替代治疗对去卵巢SD大鼠脊髓损伤后红核神经元逆行性损伤的影响。方法 成年雌性SD大鼠80只, 随机分为正常组、红核脊髓束(RST)损伤组、E2替代治疗组、雌激素受体拮抗剂(ICI)治疗组和E2+ICI联合治疗组。SD大鼠去势后1周采用选择性切断脊髓C3~C4左侧背外侧索制作单侧红核脊髓束(RST)横断损伤模型,给予不同条件治疗后1周、2周和4周对各组大鼠采用前肢支撑探测实验进行行为学评价,用红色荧光金(FR)逆行荧光示踪及体视学定量分析法,观察红核神经元的形态及数目变化。结果 前肢支撑探测实验结果显示,各时间点E2替代治疗组的左前肢使用率均高于除正常组外其他各组,但无统计学意义(P >0.05);形态学检测结果可见各组大鼠中脑右侧FR阳性红核神经元数目除正常组外均有不同程度减少,尤以4周时最为明显。E2替代治疗组右侧中脑FR阳性红核神经元与RST损伤组、ICI治疗组和E2+ICI 联合治疗组相比胞体饱满、轮廓清晰、突起长,体视框计数结果显示,E2替代治疗组红核FR阳性神经元数目明显多于其余各组(P<0.05),但RST损伤组、ICI治疗组和E2+ICI联合治疗组之间右侧中脑FR阳性红核神经元数目未见明显差异(P>0.05)。结论 大鼠脊髓横断损伤后中脑红核神经元发生逆行性损伤,E2替代治疗可减轻脊髓损伤引发的继发性红核神经元损伤。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    细胞和分子生物学
    人同源异形盒基因HOXB9多克隆抗体的制备和活性鉴定
    牛苗苗 马博 唐岩 李枫 战军* 张宏权
    2013 (4 ):  468-474.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.005
    摘要 ( )  

    目的 制备兔抗人同源异形盒基因HOXB9的多克隆抗体,为后续深入研究HOXB9蛋白的功能提供工具。方法 采用聚合酶链反应(PCR)和 DNA重组技术,构建HOXB9基因5,端7-458碱基片段到原核表达载体pGEX-4T-1和pMal-C2x中,热休克法转化及异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导表达谷胱甘肽转移酶标签的HOXB9 N端融合蛋白和麦芽糖结合蛋白标签的HOXB9 N端融合蛋白。纯化GST-HOXB9 N端融合蛋白免疫新西兰白兔,ELISA鉴定效价后,颈动脉放血,收集血清,纯化抗体。免疫印迹法及免疫沉淀法鉴定抗体有效性及特异性。结果 本实验制备的抗体能够特异识别目标分子的单一条带,并且具有较强的免疫沉淀天然构象的HOXB9蛋白的能力;采用所制备的抗体检测发现,HOXB9蛋白在小鼠免疫器官、胰脏、结肠、肺、小脑、雌性生殖系统及睾丸中表达较高,其他器官表达较低或无表达。结论 成功制备了特异而有效的兔抗人HOXB9蛋白多克隆抗体,此多克隆抗体可用于免疫印迹法分析及免疫沉淀实验。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    酸敏感离子通道1a在大鼠椎体终板软骨细胞的表达及其意义
    李霞 赵懿清 周路遥 贺春晖 吕卫群 袁凤来*
    2013 (4 ):  475-478.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.006
    摘要 ( )  

    目的 探讨大鼠椎体终板软骨细胞酸敏感离子通道 1a (ASIC1a)的表达及其意义。方法 选用成年SD大鼠10只。分离、培养椎体终板软骨细胞以及传代培养, 倒置显微镜下观察细胞形态, 甲苯胺蓝染色对终板软骨细胞进行鉴定。利用PT-PCR和Western blotting检测ASIC1a在大鼠椎体终板软骨细胞mRNA及其蛋白的表达,免疫荧光双标观察ASIC1a在终板软骨细胞的细胞定位。结果 形态学及甲苯胺蓝染色阳性显示,培养的细胞为软骨细胞,PT-PCR和Western blotting显示,大鼠椎体终板软骨细胞存在ASIC1a mRNA及其蛋白的表达,免疫荧光显示,ASIC1a在终板软骨细胞膜有阳性表达。结论 ASIC1a在大鼠椎体终板软骨细胞的表达,对认识ASIC1a功能及寻找新抗椎间盘退变靶点有重要意义。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    乙肝免疫球蛋白抗体的多样性
    周世权 周吉航 徐岳军 庄晓玲 李翊卫 李世波 刘晓光*
    2013 (4 ):  479-484.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.007
    摘要 ( )  

    目的 基于重链可变区的编码基因序列对乙肝免疫球蛋白(HBIG)中的IgG抗体进行分类。方法 借用文献提供的引物,以HBsAb强阳性健康个体外周血中的总RNA为模板进行RT-PCR和Nested-PCR扩增,通过将产物克隆到T载体、随机挑选测序,分析并统计出插入子的VH-JH-Cγ
    合方式。结果 共获得56个有效克隆,全部为人VH3-D-JH-Cγ序列,可分成49种序列,其中5种序列有2或3个序列完全相同的克隆。4个Cγ功能基因也全部出现,其中IGHG2频率最高(28次);23个VH3功能基因有11个出现,其中频率最高的是IGHV3-23(29次);23个D功能基因有16个出
    现,其中频率最高的是IGHD1-26(8次);6个JH 功能基因则全部出现,其中频率最高的是IGHJ4(33次)。VH3-D-JH组合有33种,频率最高的是IGHV3-23/IGHD1-26/IGHJ4(8次),其中5种与IGHG2拼接,但这5种VH3-D-JH-Cγ2序列仍有明显的差异。结论 成功地从HBsAb强阳性健康个体外周血中克隆到由VH3亚家族参与重排的IgG重链可变区序列;初步证实可变区序列不仅在VH3-D-JH-Cγ组合方式上具有极大的多样性,而且在序列上也具有明显的差异性;基于可变区测序对IgG抗体或B细胞进行分类是可行的,但需大大提高挑取克隆的数量或改用新一代大规模测序技术。

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    肿瘤生物学
    RhoA/ROCKI信号通路在紫杉醇诱导宫颈癌细胞周期阻滞中的作用
    王维莉 王萍* 王峰 黄帅帅 任雨
    2013 (4 ):  485-491.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.008
    摘要 ( )  

    目的 探讨RhoA/ROCKI信号通路在紫杉醇诱导宫颈癌细胞周期阻滞中的作用及其分子机制。方法 MTT法确定能引起细胞生长显著性抑制最小浓度 (1 μmol/L) 的紫杉醇。流式细胞仪检测细胞周期和RhoA蛋白表达,Western blotting检测ROCKI、细胞周期蛋白 (cyclins) 及周期依赖性激酶 (CDKs) 的表达。结果 紫杉醇处理C33A细胞后,G2/M细胞数和RhoA/ROCKI蛋白表达显著性增加,并呈时间依赖性;而cyclin B1、A、D1和CDK1蛋白表达显著性降低。上述现象被RhoA抑制剂C3转移酶全部反转;却被ROCKI蛋白抑制剂Y-27632部分反转,但与对照相比差异仍显著。紫杉醇或RhoA/ROCKI抑制剂对CDK2的表达无显著性影响。结论 紫杉醇诱导了宫颈鳞癌C33A细胞的G2/M期阻滞,其机制与RhoA活性增强后抑制特异的cyclins和CDKs有关,而下游通路中ROCKI活性仅起到部分作用。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    ZAC基因在奥曲肽抑制胃癌细胞体外增殖通路的作用
    代稳 丁一 张钦宪*
    2013 (4 ):  492-497.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.009
    摘要 ( )  

    目的 探讨ZAC基因在生长抑素类似物奥曲肽(OCT)抑制胃癌细胞增殖通路的作用。方法 分别以不同浓度OCT处理胃癌细胞BGC823和 SGC7901不同时间,MTT法筛选其增殖抑制的有效条件。OCT处理胃癌细胞(有效浓度/不同时间,有效时间/不同浓度),Western blotting检测
    OCT对胃癌细胞ZAC基因的效应。设计3条ZAC基因RNA干扰片段,分别插入pSUPER-EGFP-I载体,构建3个ZAC-shRNA表达载体(pSUPER-EGFP-ZAC/1 pSUPER-EGFP-ZAC/2和pSUPER-EGFP-ZAC/3)。经酶切和序列分析鉴定后,分别转染胃癌细胞BGC823和SGC7901。经G418筛选,RT-PCR鉴定,建立
    ZAC基因敲低(knock-down)的胃癌细胞系。以有效条件OCT孵育胃癌细胞(对照组)和ZAC基因敲低胃癌细胞(实验组),MTT法检测OCT对胃癌 细胞的生长抑制效应。结果 OCT抑制胃癌细胞增殖的有效条件为10nmol/L 孵育24h;OCT以时间和浓度依赖的方式诱导胃癌细胞ZAC基因表达。酶切及序列分析鉴定表明ZAC-shRNA表达载体构建成功。转染shRNA-ZAC/2的胃癌细胞,其ZAC mRNA水平明显降低(P<0.05),为ZAC基因敲低胃癌 细胞。ZAC基因敲低胃癌细胞的增殖明显高于对应的BGC823细胞和SGC7901细胞(P<0.05)。OCT孵育后,BGC823细胞和SGC7901细胞的增殖明显降低(P<0.05)。然而,ZAC基因敲低胃癌细胞的增殖无明显改变(P>0.05)。结论 OCT以时间和浓度依赖的方式诱导胃癌细胞ZAC基因表达;ZAC 基因在OCT抑制胃癌细胞增殖通路中具有重要作用。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    核仁素在甲状腺乳头状癌中表达的临床意义
    吕顺增 赵婧 田铧* 李菲 李贵宝 房云海 扈燕来 尹群生
    2013 (4 ):  498-502.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.010
    摘要 ( )  

    目的 探讨核仁素(NCL)在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学SP染色法检测60例正常甲状腺组织与甲状腺乳头状癌中NCL、趋化因子受体-7(CCR7)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达,分析NCL、CCR7与MMP-9的表达与性别、年龄、肿瘤大小与
    有无转移的关系以及核仁素与CCR7、MMP-9表达的相关性。结果 NCL在正常甲状腺及甲状腺乳头状癌中的总阳性率分别为0、 100%。NCL在伴随转移组癌组织中表达于细胞核、细胞质与细胞膜;NCL在无转移组癌组织中仅表达于细胞核,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、性别、
    肿瘤大小的NCL表达率间的差异无统计学意义(P>0.05)。核仁素细胞核外阳性表达与CCR7与MMP-9的阳性表达呈正相关(P<0.01)。结论 NCL在甲状腺乳头状癌中表达,表达部位在转移与非转移组明显不同,且与CCR7、MMP-9表达有密切关系。核仁素可作为区别癌转移与非转移的标志。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    三叶因子3在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义
    张小俊 吴靖芳* 黄静 张静 张剑虹 刘军超 刘博 薛刚*
    2013 (4 ):  503-508.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.011
    摘要 ( )  

    目的 探讨甲状腺乳头状癌(PTC)患者血清与组织中三叶因子3(TFF3)的表达水平及意义。方法 收集甲状腺肿瘤患者153例,其中乳头状癌组66例、腺瘤组51例、乳头状增生组36例,正常组153例(来源于每例标本的正常甲状腺组织)。16例正常人血清标本作为ELISA检测的
    正常组。采用免疫组织化学SP法和原位杂交技术检测甲状腺手术标本中TFF3蛋白和mRNA的表达;ELISA检测血清TFF3浓度。结果 1. TFF3蛋白和mRNA均表达于细胞质,呈棕黄色颗粒。66例乳头状癌TFF3表达阳性率92.42%;36例乳头状增生阳性率47.22%;51例腺瘤阳性率31.37%;正
    常组阳性率25.40%;各组TFF3 mRNA阳性率略低于其蛋白,且与蛋白表达呈正相关(P.<0.0001);甲状腺癌组积分吸光度显著高于其他3组(P<0.01); 2. 甲状腺乳头状癌中TFF3及mRNA高表达率与TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.01); 3. 甲状腺癌组血清TFF3浓度明显高于乳头
    状增生组、腺瘤组和健康对照组(P<0.001)。血清TFF3浓度在甲状腺癌组织阳性组明显高于阴性组(P<0.05)。结论 甲状腺乳头状癌高表达 TFF3蛋白及mRNA,检测血清TFF3浓度可能成为诊断甲状腺乳头状癌的筛选指标。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    14-3-3zeta与p-Bad在T1期非小细胞肺癌中的表达及意义
    臧东钰* 李福智 杨春雨
    2013 (4 ):  509-513.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.012
    摘要 ( )  

    目的 观察14-3-3zeta 和p-Bad在T1 期非小细胞肺癌 (NSCLC) 中的表达,探讨两者在非小细胞肺癌发展中的作用及相互关系。方法 取110例非小细胞肺癌及癌旁正常肺组织存档蜡块和50例新鲜NSCLC及癌旁正常肺组织标本,采用免疫组织化学和免疫印迹法(Western blotting)
    检测14-3-3zeta 和p-Bad 蛋白的表达。结果 与正常肺组织相比,14-3-3zeta 在NSCLC 中的表达显著增强,与肺癌的分化程度和淋巴结转移有关,而与患者的年龄、性别及病理学分型无关。p-Bad在正常肺组织中轻微表达,而在NSCLC 中表达显著增强。且其表达与患者的年龄、性别及
    病理学分型无关,但与癌组织分化程度、淋巴结转移相关。结论 14-3-3zeta蛋白与p-Bad与T1期NSCLC发展、侵袭和转移密切相关。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    解剖学
    侧颅底冠状位组织学与CT断层的对照
    李希平 夏寅 韩德民*
    2013 (4 ):  514-518.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.013
    摘要 ( )  

    目的 制作颞骨火棉胶冠状位断层连续薄层切片,获取数字化图片库。方法 用2例尸头标本进行螺旋CT扫描后制作断层标本火棉胶包埋后,用大型轮式切片机沿冠状位切片,厚度100μm,每片均摄影并保存于计算机。选取代表性层面的胶片进行HE染色。将断层照片与HE染色照
    片和CT片进行对照观察,对代表性层面结构特点进行描述。结果 共获取侧颅底数字化连续冠状位薄层断面标本数据集 2套。断层图像分辨率1920×2560像素,结构毗邻关系显示清晰。与HE照片和CT片进行对照观察,可以更清楚地定位断层结构。结论 火棉胶包埋技术是制作颞骨大切
    片,获取高分辨率的数字化图片数据集的理想方法。冠状位对听小骨、Prussak‘s间隙、颈静脉窝、耳蜗与中颅窝的关系,颈内动脉升段及膝部、面神经垂直段、内听道与中颅窝的关系等显示较佳。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    组织学胚胎学发育生物学
    小鼠胚胎细胞视黄酸结合蛋白1阳性神经嵴细胞的时空分布与功能
    杨艳萍 武珊珊 景雅* 李海荣 乔从进 张涛
    2013 (4 ):  519-524.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.014
    摘要 ( )  

    目的 探讨小鼠胚胎心神经嵴细胞的形成、分布模式及其在心血管系统发育过程中的作用。方法 选用抗细胞视黄酸结合蛋白1(CRABP1)、抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、抗心肌肌球蛋白重链(MHC)、抗胰岛因子1(Isl-1)抗体,对45只胚龄8~12d小鼠胚胎连续切片进行免疫
    组织化学染色。结果 胚龄8d,CRABP1在神经褶的外胚层未见阳性表达。胚龄8.5~9d,在心管与鳃弓水平,神经褶开始出现CRABP1阳性细胞,且有部分细胞从神经褶背侧分离进入邻近间充质。胚龄10d,神经管两侧间充质内的CRABP1阳性细胞迁移至鳃弓、弓动脉壁内皮周围以及流出道
    心胶质内。胚龄11~12d,弓动脉内皮周围、流出道心内膜垫内CRABP1表达明显下降,但弓动脉管壁α-SMA阳性平滑肌细胞数量增加。主肺动脉隔及其分隔形成的升主动脉和肺动脉干管壁内均可见Isl-1阳性细胞,但未见CRABP1表达。结论 小鼠胚胎CRABP1阳性神经嵴细胞形成的时间窗
    限定在胚龄8.5~9d。胚龄10d后,CRABP1阳性神经嵴细胞经过迁移,参与弓动脉中膜平滑肌和流出道心内膜垫的形成。CRABP1不能用于标记迁移后的神经嵴细胞。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    整合素CD11a、CD11b和CD11c在大鼠心脏发育中的表达变化
    穆灵敏 王文锋 郭志坤* 张光谋
    2013 (4 ):  525-529.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.015
    摘要 ( )  

    目的 探讨整合素CD11a、CD11b和CD11c在大鼠心脏发育中的表达变化。方法 利用免疫组织化学和RT-PCR方法,检测胚胎18d(E18d)、生后5d(P5d)、P19d、P40d及生后1年(P1y)大鼠心肌组织的CD11a、CD11b和CD11c的基因和蛋白表达。结果 免疫组织化学结果显示,大鼠心肌
    组织CD11a、CD11b和CD11c表达部位在心肌细胞质内;从E18d到P1y大鼠心肌组织CD11a、CD11b和CD11c的表达逐渐减弱。 RT-PCR显示,CD11a、CD11b、CD11c各组均呈阳性表达。其中CD11a在P5d和P40d间,P5d和 P19d间比较(P>0.05)差异无统计学意义,其他各组间比较差异均有统计
    学意义;CD11b在E18d、P5d、P19d和P40d分别比较(P>0.05)差异无统计学意义,其他各组差异均有统计学意义;CD11c各组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CD11a、CD11b和CD11c在大鼠心肌的发育过程中出现表达量的变化,不同结构的整合素分子在心脏发育过程表现出相似的
    表达规律,它们可能对心肌细胞的发育起重要的调控作用。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    胰岛素抵抗大鼠模型中同型半胱氨酸代谢关键酶的变化
    范晓明 郭家智 刘世昌 张铁军 康丽 陆地 桂莉* 李树德*
    2013 (4 ):  530-534.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.016
    摘要 ( )  

    目的 建立胰岛素抵抗(IR)的动物模型,探讨同型半胱氨酸的变化及同型半胱氨酸改变的分子机制。方法 20只6周健康SD大鼠随机分为正常对照组和胰岛素抵抗组。高脂高糖饮食加高脂灌胃3个月制造胰岛素抵抗模型,空腹状态下测定血液中同型半胱氨酸(Hcy)、葡萄糖(GLU)、
    胰岛素(INS)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的浓度,计算胰岛素抵抗指数(INI);免疫组织化学、RT-PCR和Western blotting检测肝脏组织亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、胱硫醚合成酶(CBS)、蛋氨酸合成酶(MTR)表达的变化。结果 胰岛素抵抗组和正常对照组比较,空腹GLU、
    INS的浓度升高(P<0.05),INI增加(P<0.05),确定胰岛素抵抗模型建立成功;TG和Hcy浓度增加(P<0.05),TC变化无统计学意义(P>0.05);MTHER和CBS的免疫组织化学检查、mRNA及蛋白表达降低(P<0.05),MTR的免疫组织化学检查、mRNA及蛋白表达无统计学意义(P>0.05)。结论
    在胰岛素抵抗条件下,同型半胱氨酸浓度增加,可能与参加同型半胱氨转化的MTHER和CBS表达降低有关。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    小鼠卵母细胞体外成熟培养系统的建立与优化
    葛丽 杜辉 刘立伟 苏衍萍*
    2013 (4 ):  535-540.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.017
    摘要 ( )  

    目的 探讨激素刺激时间、体外培养时间对小鼠卵母细胞核成熟及不同激活方案对卵母细胞孤雌激活、胚胎发育能力的影响。方法 孕马血清促性腺激素(PMSG)超排处理,在体外培养的不同时间点检测卵母细胞核成熟率(每个处理至少重复3次,3只/重复,以下实验相同)。
    分别采用乙醇结合6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)法和SrCl2 法激活卵母细胞,胚胎培养液选用CZB[胎牛血清(FBS)或牛血清清蛋白(BSA)]两种,确定最佳激活方案。对不同时间点成熟的卵母细胞进行激活,确定最佳激活卵龄。研究缩短PMSG刺激时间对卵母细胞发育的影响。结果 将
    PMSG刺激时间从46h缩短至24h,卵母细胞获得最高核成熟率(97.6% vs 91.9%)的培养时间由14h延长至16h;缩短PMSG刺激时间,核成熟率不受影响,但能显著降低激活率(91.2% vs 37.1%)和囊胚率(20.9% vs 0.0%)。 两种方法体内成熟卵母细胞激活率均高于90%,但囊胚率差异
    显著(P<0.05)。卵母细胞体外培养至24~26h时,激活率(89.5%)和囊胚率(21.9%)均达到最高点。结论 建立了一种小鼠卵母细胞体外成熟培养系统,即PMSG超排处理46h、卵母细胞培养24h,CZB(10mmol/L SrCl2)激活2.5h后采用CZB(0.5%BSA)进行胚胎培养。

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    猪动脉及心脏瓣膜内皮细胞的形态学特征
    高洪泉 李学敏 吴彩琴 关国平 王富军 王璐 王克强 张红旗*
    2013 (4 ):  541-545.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.018
    摘要 ( )  

    目的 探讨猪大、中动脉及心脏瓣膜内皮细胞的形态学特征,为血管的临床和实验研究积累资料。方法 动物在生理压下先后灌注肝素生理盐水和中性福尔马林溶液,取出升主动脉、主动脉弓,主动脉降部等大动脉和主动脉瓣;颈总动脉、胸廓内动脉、冠状动脉及其前后降支
    等中动脉。标本按照电子显微镜常规处理,扫描电子显微镜下观察其内皮细胞的形态学特征。结果 在大、中动脉的直部,内皮细胞呈梭形,核区微隆起,其长轴与血流方向一致。在大动脉弯曲部和主动脉瓣,内皮细胞呈卵圆形,有丰富的微绒毛。在冠状动脉观察到多个白细胞黏附在
    内皮表面。在右冠状动脉的后室间支,观察到一处细胞正处在更新状态。在胸廓内动脉、颈总动脉和冠状动脉观察到黏附在内皮表面且具有长突起的细胞,其胞体呈圆形、卵圆形、三角形等,突起数量2~6个不等。有的突起有分叉。结论 内皮细胞的形态、排列、微绒毛的长度、密度
    和数量等随部位的不同而有差异,切应力可能是造成这些差异的重要因素之一。

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    母源性甲状腺功能亢进对仔鼠心脏甲状腺激素受体mRNA表达的影响
    陈晶* 李斌 宋芳 冯若鹏 赵紫薇
    2013 (4 ):  546-549.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.019
    摘要 ( )  

    目的 探讨母源性甲状腺功能亢进(简称甲亢)对新生仔鼠心脏中甲状腺激素受体的影响。方法 首先对24只雌性Wistar大鼠建立妊娠合并甲亢模型,取新生5d、10d、15d仔鼠心脏进行解剖检查,取部分心脏组织石蜡切片Masson染色,取部分心脏组织采用实时定量PCR法检测甲
    状腺激素受体(TR)α1、TRα2、TRβ1 mRNA水平表达量的变化。结果 在心脏组织中TRα1 mRNA的表达量较TRα2、TRβ1的表达量高,且在出生10d的仔鼠心脏(包括甲亢组和对照组)中TRα1mRNA的表达量呈现峰值;与同期对照仔鼠相比,母源性甲亢仔鼠出生5d 与出生10d心肌中TRα1
    mRNA的表达量显著上调,出生15d的表达量与对照组相比表达量下调;TRα2在母源性甲亢和对照中差异无统计学意义;TRβ1在甲亢出生5d仔鼠中表达量显著下调,10d组表达量上调,15d组表达量差异无显著性。结论 母源性甲亢会对仔鼠心肌产生影响,引起甲状腺激素受体的差异表达;
    这种变化随出生后时间延长而减弱。甲状腺激素受体中TRα1的变化最显著,可能在甲亢引起的心肌损伤中起重要作用。

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    过氧化物还原酶I-硫氧还蛋白、超氧化物歧化酶及过氧化氢酶在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的表达变化
    张丽华 王切 刘钊 王磊* 
    2013 (4 ):  550-553.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.020
    摘要 ( )  

    目的 观察过氧化物还原酶I-硫氧还蛋白(PrxI-Trx)、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)抗氧化体系在大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型中的表达变化,探讨其在抗氧化应激反应中的作用。方法 通过无损伤血管夹钳夹通往大鼠肝左叶、肝中叶的血管和胆管蒂,30 min后松
    开血管夹,制造大鼠70%肝脏缺血再灌注损伤模型。损伤再灌注6h后取血和肝脏。全自动生化分析仪测丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量。HE法观察大鼠肝脏形态学改变。采用RT-PCR的方法观察在肝脏缺血再灌注损伤中PrxI-Trx、SOD、CAT氧化还原体系mRNA水平的表达变化。采用Western
    blotting测定PrxI、SOD和CAT的蛋白表达水平。结果 与对照组相比,血清中ALT水平和HE结果均显示肝脏缺血再灌注损伤组大鼠肝细胞明显受损。PrxI-Trx、SOD和CAT的mRNA水平明显升高。同时,PrxI、SOD和CAT的蛋白表达水平也明显升高。结论 PrxI-Trx、SOD和CAT在肝脏缺血再灌
    注损伤中均发挥了抗氧化应激作用,对肝细胞具有保护作用。

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    人类学
    中国古代人群第一臼齿齿冠基底面积与相对齿尖基底面积的对比与分析
    周亚威 贺乐天*
    2013 (4 ):  554-558.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.021
    摘要 ( )  

    目的 通过对5个中国考古遗址中出土的184枚人类上、下颌第1臼齿(M1和M1)的齿冠基底面积和相对齿尖基底面积的测量与分析,探讨不同食性的人群在第1臼齿齿冠面积和相对齿尖基底面积的差异性。方法 运用现代数字图像测量技术对齿冠面积和齿尖面积进行高精度划分
    和测量,并运用SPSS 19.0统计学软件对数据进行检测分析。结果 动物性食物摄入较高的人群第1臼齿齿冠基底面积均大于植物性食物为主的人群,差异性检验显示,两组人群在齿冠基底面积上差异显著。两组人群的相对齿尖基底面积非常接近,差异性检验显示,差异不显著。5个考古
    遗址所代表的中国古代人群的第1臼齿相对齿尖基底面积的大小顺序表现出一致性,即M1的顺序为原尖>前尖>后尖>次尖,M1的顺序为下原尖>下次尖>后尖>内尖>下次小尖。结论 第1臼齿齿冠基底面积的大小在群体间表现出差异性,第1臼齿相对齿尖基底面积则在群体间表现出一致性。

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    广西仫佬族线粒体DNA高变Ⅰ区多态性分析
    王晓庆 王传超 邓琼英 李辉
    2013 (4 ):  559-562.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.022
    摘要 ( )  

    目的 探讨广西仫佬族人群线粒体DNA高变Ⅰ区的多态性特征,了解仫佬族群体的母系遗传结构。方法 收集91例仫佬族无关男性个体的外周血样本,目标序列用引物L15947和R16488进行PCR扩增,用ABI 3730测序仪正反向测序;计算多态性位点、核苷酸多态性、平均配对差异
    数目等多态性指标,以及仫佬族与各民族之间的遗传距离,ME法构建遗传进化树。结果 与修正后的剑桥标准序列(rCRS)比对,91例样本的线粒体高变Ⅰ区序列共界定了74种单倍型,核苷酸多态性为0.0188±0.010,平均核苷酸差异为6.618±3.154;遗传距离显示仫佬族与南方各少数
    民族及南方汉族的亲缘关系较近,与北方汉族的亲缘关系较远,进化树中仫佬族与南方少数民族聚为一类。结论 仫佬族在母系遗传上属于典型的南方侗傣族群,可能经历过群体扩张或选择效应;高变Ⅰ区序列具有较高的多态性,可用于法医个体识别、民族起源等方面的研究。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    土家族少年儿童体质发育
    黄大元* 张惠娟 熊健 吴国运 梁成青
    2013 (4 ):  563-569.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.023
    摘要 ( )  

    目的 探讨武陵山区土家族儿童少年体质发育特征及其规律。方法 采用人体测量学的方法, 对武陵山区1865例土家族儿童少年(男性953例,女性912例)17项体质发育指标进行测量,计算11项体质指数。结果 土家族儿童少年生长发育的各项指标均值随年龄的增长而增加;土
    家族男女性的生长发育曲线呈上升趋势并且有交叉现象;土家族男性的身高突增年龄为11~13岁, 女性则为9、11~12岁;土家族学生的体质指数年龄变化规律与其他民族基本相似,但身体各部分的发育程度不相同。结论 土家族儿童少年体质发育符合一般生长发育规律,并有性别差异
    ,土家族男女生的体质发育相对落后于汉族等其他民族学生。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    技术方法
    右旋糖酐-二乙烯三胺五乙酸-钆离子螯合物与马根维显在间质磁共振淋巴造影中的对比
    吴晶 孙玥 万升标 刘世恩 冯元勇 李薇 徐文坚 江涛* 尚伟*
    2013 (4 ):  570-575.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.024
    摘要 ( )  

    目的 比较右旋糖酐-二乙烯三胺五乙酸钆离子螯合物(dextran-DTPA-Gd)和马根维显两种对比剂在间质MRI淋巴造影中淋巴显影的价值。方法 选择健康成年新西兰兔12只,体重为2.7~3.7kg。仰卧位固定兔,经3D TOF CE-MRA序列扫描,平扫后右侧后肢第1、2、3趾蹼间隙注
    射dextran-DTPA-Gd 各0.4ml(3.96×10-3mol/L),共1.2ml;30min后左侧后肢第1、2、3趾蹼间隙注射马根维显各0.4ml(0.4998mol/L),共1.2ml,行MR增强扫描,扫描间隔分别为10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60min、2h、4h、24h。平扫和增强扫描的相关参数相同。分析不同
    时间段淋巴显影强化程度,测量并计算腘窝淋巴结增强前后的信号强度(E%),绘制其信号强度-时间曲线,比较两种显影剂对淋巴显影的区别。结果 平扫时双侧腘窝淋巴结均呈等信号。右侧dextran-DTPA-Gd注射后10min,引流区后肢淋巴管及腘窝淋巴结信号强化明显、显示清晰,腘窝
    淋巴结E%为212.7%,35min左右达到峰值,E%值为314.1%,4h后为208.2%,24h后扩清。左侧马根维显注射10min时,引流区域后肢血管强化明显,造影剂大部分吸收入血管进入膀胱,后肢淋巴管及腘窝淋巴结信号弱,腘窝淋巴结E%为78.8%,20min左右达到峰值,E%值为98.3%,4h后减至
    29.0%,24h后扩清。淋巴结E%经统计学分析差异有统计学意义(P<0.05)。实验前后动物的生化检查等数据未见异常变化,其差异无统计学意义(P>0.05),送检的内脏器官组织学检查未见明显的病理学改变。结论 相比马根维显小分子造影剂,dextran-DTPA-Gd是一种有效的淋巴造影剂,
    能够特异性靶向强化淋巴结及淋巴管。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    小鼠肾脏纤维化Masson染色方法的改进
    魏胜男 曾翔俊 李汇华*
    2013 (4 ):  576-579.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.025
    摘要 ( )  

    目的 改进Masson三色染色法,以获得较好显示肾脏纤维化的染色方法。方法 用Bouin液补充固定组织切片;用-20℃储存的乙醇∶乙酸(2∶1)溶液处理组织;用亮绿代替苯胺蓝;减少亮绿的染色时间。结果 明确区分纤维化肾间质和未纤维化的肾间质,胶原纤维呈绿色(用亮绿复染),
    胞质和肌纤维呈红色。结论 改进后的Masson方法可以将纤维化和非纤维化的肾脏组织进行明显的区分,显微镜下结构显示清晰,着色均匀,取得了较为满意的显色对比效果。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    综述
    神经元树突非典型运输途径的微结构和功能的研究进展
    强文斌 张筱敏 罗建红*
    2013 (4 ):  580-584.  doi: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.04.026
    摘要 ( )  

    细胞中蛋白质的合成和运输是复杂而严格调控的过程,在结构高度特异化的神经元细胞更是如此。神经元树突中存在着不同于其他细胞的独立于胞体运输途径的非典型运输途径,其构成主要有树突mRNA、树突内质网(dER)和树突“外驻”高尔基体(Golgi outposts)。关于这
    些细胞微结构的形态分布,其非典型运输的功能以及相关病理学研究近几年有重要的进展。

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