当期目录

2017年, 48卷, 6期
刊出日期：2017-12-06 上一期    下一期
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生物工程学
组织学胚胎学发育生物学
技术方法
解剖学
肿瘤生物学
组织学胚胎学发育生物学
解剖学
肿瘤生物学
神经生物学
细胞和分子生物学
综述


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生物工程学

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人附睾蛋白4过表达对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭能力及肿瘤形成的影响 崔彭华 张玉娟 邵雪斋 王会民 邢恩鸿 2017 (6):  704-709.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.012 摘要 ( )   PDF(291KB) ( )   目的 探讨人附睾蛋白4（HE4）过表达对子宫内膜癌（EC）细胞增殖、侵袭能力及肿瘤形成的影响。 方法 构建HE4过表达质粒载体（pcDNA 3.1/Myc-His-HE4）和HE4特异性小干扰RNA（siRNA）表达质粒载体（siRNA-HE4），分别转染HEC-1B（HE4过表达组）和Ark2（HE4低表达组）两个EC细胞系；以空载体pcDNA 3.1/Myc-His转染的HEC-1B细胞为HE4过表达组的阴性对照，以非特异性序列siRNA转染的Ark2细胞为HE4低表达组的阴性对照；不进行转染处理、正常培养的EC细胞系为正常对照组。转染后，采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法检测HE4 mRNA表达水平，MTT比色法测定细胞增殖活性，体外迁移和侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。构建移植性肿瘤小鼠模型，比较各组动物的形成瘤体积。 结果 与正常对照组和阴性对照组的HEC-1B细胞比，转染pcDNA 3.1/Myc-His-HE4后HEC-1B细胞中HE4 mRNA表达水平显著升高（P＜0.05），细胞增殖活性、穿膜细胞数明显升高（P＜0.05）；与正常对照组和阴性对照组的Ark2细胞比，转染siRNA-HE4后Ark2细胞中HE4 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05），细胞增殖活性、穿膜细胞数明显降低（P＜0.05）；而阴性对照组与正常对照组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）；HE4过表达组的移植性肿瘤体积和重量明显大于其对照组（P＜0.05），而HE4低表达组的移植性肿瘤体积和重量明显小于其对照组（P＜0.05）。 结论 HE4过表达可导致EC细胞的增殖、迁移及侵袭能力增强，促进肿瘤形成；下调HE4基因表达可明显抑制EC细胞的增殖、迁移和侵袭，并抑制肿瘤生长。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

组织学胚胎学发育生物学

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A型口蹄疫病毒1D蛋白在大肠埃希菌中的可溶性表达、纯化及电子显微镜检测 郭玉堃 明胜利 郭婉莹 杨国宇 郭豫杰 2017 (6):  726-731.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.016 摘要 ( )   PDF(586KB) ( )   目的 本实验旨在表达出高可溶性的A型口蹄疫病毒1D蛋白，并通过电子显微镜检测，以期望形成纳米样颗粒。 方法 根据A型口蹄疫病毒核酸序列，得到FMDV A/GDMM/CHA/2013株的1D蛋白基因，并进行截短和优化，共132个氨基酸；同时，从结肠弯曲杆菌(Campylobacter coli）中分离得到135个氨基酸的铁蛋白(Fn)基因片段，将A型口蹄疫病毒1D蛋白与铁蛋白串联，设计并合成了口蹄疫病毒1D蛋白-铁蛋白片段，命名为CcFnt166AS。构建了CcFnt166AS融合Grifin、GST、MBP、Sumo、Thioredoxin、γ-crystallin、ArsC、PpiB、CeHSP17等9种不同可溶性标签的表达重组载体。分别转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中，异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，SDS-PAGE电泳对融合蛋白的可溶性表达进行检测，筛选出高可溶性表达的CcFnt166AS融合蛋白。重组蛋白通过Ni-NTA Agarose亲和纯化，进行电子显微镜检测。 结果 成功构建9种CcFnt166AS表达载体；9个标签中，MBP与CcFnt166AS蛋白相融合的可溶表达效果最好，并获得了高纯度的MBP-CcFnt166AS重组蛋白质；电子显微镜结果显示，MBP-CcFnt166AS形成了纳米样颗粒。 结论 本实验建立了稳定获得CcFnt166AS重组蛋白质的方法。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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三类生物因子对涡虫生殖和再生的影响 董自梅 董艳萍 陈广文 刘德增 2017 (6):  732-739.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.017 摘要 ( )   PDF(681KB) ( )   目的 以国内广布种日本三角涡虫（Dugesia japonica）为受试动物，探讨三类生物因子对涡虫生殖和再生的影响。 方法 选择与生殖相关的激素（雌二醇、甲基睾丸素），生物胺（5-羟色胺、多巴胺）和D-氨基酸（D-色氨酸、D-精氨酸、D-苯丙氨酸）对日本三角涡虫进行急性毒性实验，用SPSS 17. 0统计学软件计算出适宜的实验浓度，对整体及再生涡虫进行培养，观察并记录实验现象。 结果 雌二醇、5-羟色胺、D-色氨酸和D-苯丙氨酸处理组分别引起20%、40%、20%和20%涡虫卵巢及交配器官的发育；而多巴胺则引起40%～50%涡虫生殖腺退化。另外，5-羟色胺处理组涡虫头部再生速度加快，而多巴胺处理组则头部再生速度减慢。结论 雌二醇、5-羟色胺、D-色氨酸和D-苯丙氨酸能够诱导涡虫生殖腺的发育，并且5-羟色胺促进涡虫头部再生；多巴胺则引起涡虫生殖腺退化并对涡虫再生有抑制作用。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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影响高龄小鼠卵母细胞质量的超微结构因素 刘美菊 陈新霞 2017 (6):  740-745.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.018 摘要 ( )   PDF(481KB) ( )   目的 探讨高龄小鼠卵母细胞线粒体、皮质颗粒、微丝、纺锤体及染色体形态和排布的变化规律。 方法 将雌性昆明小鼠分为年轻组（4～8周）和高龄组（48～52周）。腹腔内注射孕马血清促性腺激素（PMSG）10 IU/只行促排卵，48 h后腹腔内注射人绒毛膜促性腺激素（hCG）10 IU/只，14 h后收集输卵管的卵冠丘复合物(OCCC)。脱去颗粒细胞，获取成熟卵母细胞（MⅡ期）经2%多聚甲醛固定。抗小鼠α-tubulin单克隆抗体染色卵母细胞纺锤体的微管，罗丹明标记的鬼笔环肽染色微丝，FITC结合的小扁豆凝集素染色皮质颗粒，Mito Tracker Green FM染色线粒体。激光扫描共焦显微镜下观察。 结果 共获取小鼠卵母细胞372枚，其中年轻组179枚，高龄组193枚。高龄组小鼠卵母细胞纺锤体异常率（71.78% ±1.27%）、染色体排列异常率（65.16% ±1.52%）明显高于年轻组（18.93% ±1.27%，32.24% ±1.10%）（P<0.01，P<0.01）；高龄组小鼠卵母细胞线粒体的荧光强度（28.09±6.62）明显低于年轻组（45.07 ±5.90）（P<0.01）；高龄组小鼠成熟皮质颗粒（Ⅲ级皮质颗粒）（51.00%±100%）明显低于年轻组（94.04% ±0.71%）（P<0.01）。 结论 高龄小鼠卵母细胞中各主要细胞器、细胞骨架及染色体排列异常率明显增加，可能是导致高龄受孕率低的重要原因。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

技术方法

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恒河猴大脑中动脉M1段栓塞模型的麻醉新方法 张文超 王庚 田肇隆 马艳辉 王天龙 赵磊 李丽 2017 (6):  753-757.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.020 摘要 ( )   PDF(389KB) ( )   目的 为成功构建恒河猴M1段栓塞模型提供简捷、迅速、安全的麻醉方法。 方法 雄性成年恒河猴25只，年龄7～9岁，体重7～11 kg，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供。以0.1 ml/kg氯胺酮及速眠新的混合液肌肉注射，待动物入睡后气管插管(ID：4.5-5.5#)，妥善固定后送入介入中心。入室后连接监护、建立静脉通路并导尿。术中用丙泊酚2～4 mg/(kg·h)持续泵入维持麻醉，呼吸机控制呼吸，并根据动物的生命体征和肢体活动情况调整麻醉深度，必要时追加上述氯胺酮与速眠新的混合液，并根据手术的需要调整心率、血压、体温等。溶栓前后行脑MRI造影，造影前适时停止麻醉药物输注，确保动物在造影室已恢复自主呼吸。术中监测实验动物的心率、体温、血压及血氧饱和度，并于股动脉穿刺及溶栓后抽取动脉血行血气分析。 结果 所有动物均按预计方案实施完成，术中未发生动物躁动、呼吸抑制、心律失常等严重并发症。实验结束停药后，实验动物很快清醒并送回动物实验中心，进行后续处理。其中18只实验动物存活24 h以上，7只死于溶栓后严重的脑出血和脑梗死。结论 以氯胺酮及速眠新的混合液进行麻醉诱导行气管插管，丙泊酚静脉维持全身麻醉可以为此类较复杂的介入及MRI实验的顺利完成提供一种安全、实用的麻醉方法。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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球旁细胞光学显微镜下4种染色法结果观察 臧贵勇 张祥令 胡蓉 2017 (6):  758-760.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.021 摘要 ( )   PDF(381KB) ( )   目的 探讨显示小鼠球旁细胞的适宜染色方法，更好地为教学和科研服务。 方法 取 20 只小鼠肾组织做石蜡切片，随机分为 4 组，分别用HE染色、高碘酸-Schiff 氏反应染色、改良结晶紫染色和免疫组织化学染色。 结果 HE染色和高碘酸-Schiff 氏反应染色不能显示肾球旁细胞；改良结晶紫染色和免疫组织化学均能较好地显示肾球旁细胞（胞质内有特征性的被染色的分泌颗粒）。 结论 改良结晶紫染色和免疫组织化学染色对球旁细胞有较好的染色效果，但改良的结晶紫染色更为简便、经济、稳定。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

解剖学

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羊乳腺炎乳腺导管及腺泡铸型 刘明星 吕红发 张金鹏 丁梦圆 生双 杨彬 2017 (6):  721-725.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.015 摘要 ( )   PDF(563KB) ( )   目的 揭示金黄色葡萄球菌感染对泌乳期羊的乳腺导管及腺泡的三维立体构造的影响。 方法 选取3头产后母羊并建立羊乳腺炎模型，在羊左侧乳腺注射浓度为1012 CFU/L的金黄色葡萄球菌1 ml，右侧乳腺作为对照，注入1 ml生理盐水，羊的左侧乳腺在攻菌12 h、24 h、36 h、48 h后，观察其临床症状。使用奶牛隐性乳房炎快速诊断技术（BMT）确认乳腺炎模型构造成功，取下乳腺后运用导管铸型技术获得羊乳腺导管、腺泡的铸型标本，利用扫描电子显微镜技术，检测乳腺小导管及腺泡的微观结构。 结果 铸型标本结果显示，以输乳管为第1级，最多可达14级分支，导管分支间未见吻合现象，各级分支导管与上一级导管主轴延长线的夹角＜90°。经扫描电子显微镜观察发现，正常乳腺导管末梢小导管管壁光滑，末端多呈膨大球状，腺泡直径（79.03±14.91）μm，金黄色葡萄球菌感染的乳腺导管表面有凹陷，末端大部分腺泡萎缩，腺泡直径（42.89±17.17）μm。 结论 金黄色葡萄球菌感染能破坏乳腺腺泡的正常结构。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

肿瘤生物学

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Raptor通过Wnt3a/β-catenin信号通路对乳腺癌侵袭与转移的作用 徐新伟 杨玉玲 孙志亮 张国新 曾国栋 李洪利 尹崇高 2017 (6):  682-687.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.008 摘要 ( )   PDF(492KB) ( )   目的 探讨Raptor是否可以通过Wnt3a/β-catenin信号通路促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。 方法 采用免疫印迹法（Western blotting）检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(MDA231)中Raptor蛋白的表达情况；采用小RNA（RNAi）干扰技术将质粒转染MDA231，将过表达质粒转染MCF-7；趋化运动实验检测乳腺癌细胞的运动能力；Transwell侵袭实验检测乳腺癌细胞的侵袭能力；Western blotting检测上皮细胞间充质转化（EMT）标志物的表达情况；核质分离实验检测β-联蛋白（β-catenin）的转核情况。 结果 Western blotting法检测结果显示，Raptor在低转移细胞系MCF-7中低表达，而在高转移细胞系MDA231中高表达。转染后，SiRaptor/MDA231细胞组中Raptor蛋白的表达明显下降，MCF-7/Raptor细胞组中Raptor蛋白的表达明显升高，表明转染成功。用Wnt3a刺激处理后，趋化运动和Transwell侵袭实验结果显示，SiRaptor/MDA231细胞组运动和侵袭能力明显降低，MCF-7/Raptor细胞组运动和侵袭能力明显增强。Western blotting法检测结果显示，用Wnt3a和抑制剂Dkk1不同处理后，SiRaptor/MDA231细胞组中上皮-钙黏蛋白（E-cadherin）上调，波形蛋白（vimentin）下调，细胞核中β-0catenin的表达降低，而MCF-7/Raptor细胞组中E-cadherin蛋白下调，vimentin蛋白上调，β-catenin蛋白的表达升高。 结论 Raptor能通过Wnt3a/β-catenin信号通路促进EMT的发生，进而促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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RNA干扰MEX3A基因对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响 房超 尹晶 于秋爽 陈云云 黄瑛 2017 (6):  688-692.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.009 摘要 ( )   PDF(439KB) ( )   目的 探讨通过慢病毒介导的RNA干扰技术抑制MEX3A基因表达对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响。 方法 应用GV115载体构建针对MEX3A基因的shRNA慢病毒载体，转染包装细胞293T产生慢病毒颗粒，收集并滴度测定后转染5637膀胱癌细胞，实验组转染MEX3A-shRNA慢病毒，对照组转染阴性对照慢病毒；实时定量PCR（Real-time PCR）检测MEX3A基因敲减效率；慢病毒转染3 d后，使用Celigo连续细胞计数5d检测细胞生长；慢病毒转染5d后，进行膜联蛋白V（Annexin V）染色并用流式细胞术检测细胞凋亡。 结果 成功构建MEX3A-shRNA慢病毒载体以及稳定抑制MEX3A表达的细胞株，MEX3A基因敲减效率达到74%；Celigo细胞计数检测显示，与对照组相比，实验组5637细胞的增殖速率受到显著抑制；流式细胞术检测显示，实验组发生凋亡的5637细胞显著增加。 结论 MEX3A基因促进膀胱癌细胞的增殖，抑制膀胱癌细胞的凋亡。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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氯喹对人肺癌A549细胞周期阻滞及增殖抑制的机制 朱文斌 于海涛 刘立琨 李鹏辉 张微 岳丽玲 2017 (6):  693-697.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.010 摘要 ( )   PDF(391KB) ( )   目的 探讨氯喹抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖、促进凋亡、阻滞细胞周期的作用及其分子机制。 方法 应用MTT法和流式细胞术分别检测氯喹对A549细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响；Western blotting检测氯喹对A549细胞周期蛋白(cyclin E1)和细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK2）、肿瘤抑制蛋白PTEN以及细胞周期抑制蛋白P21、P27表达水平的影响。 结果 氯喹能够抑制A549细胞增殖，并且具有时间-剂量依赖性。氯喹可以诱导细胞凋亡，不同浓度的氯喹作用于A549细胞24h后，细胞凋亡率随着作用剂量的增加而升高。进一步的研究发现，氯喹还能够阻滞细胞周期于G0/G1期，降低cyclinE1和CDK2表达水平，明显提高PTEN、P21和P27的表达水平。 结论 氯喹具有抑制肺癌细胞增殖、促进其凋亡和阻滞细胞周期的作用，其机制可能与其抑制CyclinE1和CDK2表达，并且上调PTEN、P21和P27蛋白的表达有关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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鳕鱼皮寡肽对人胃癌细胞SGC-7901增殖凋亡的影响及机制 吴丽萍 续力云 胡晓斐 张国强 2017 (6):  698-703.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.011 摘要 ( )   PDF(727KB) ( )   目的 探讨鳕鱼皮寡肽（CSO）对人胃癌细胞（SGC-7901）的增殖影响。 方法 用不同浓度CSO处理体外培养的SGC-7901细胞后，荧光显微镜下观察细胞4’6-二脒 基-2-苯基吲哚（DAPI）染色后细胞形态变化，应用CCK-8 实验检测细胞活力，免疫印迹法和流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。 结果 CSO对SGC-7901细胞增殖有明显的抑制作用，且并呈剂量、时间效应关系（P<0.05）。作用于SGC-7901胃癌细胞24 h、48 h和72 h的IC50分别是156.90 g/L、102.10 g/L、73.13 g/L。DAPI染色后发现，SGC-7901细胞随着CSO浓度增加可见大量的细胞核碎裂，荧光强烈。24h细胞凋亡率检测显示，细胞随着浓度的增加凋亡率呈上升趋势，表明CSO对SGC-7901呈浓度效应关系。细胞周期观察发现，SGC-7901细胞G1期细胞数随着CSO浓度的增加而递增，而S/G2期细胞随着浓度的细胞递降。Caspase-3、Caspase-9随着CSO浓度的逐渐增高表达上调，Bcl-2表达下调。 结论 鳕鱼皮寡肽能抑制人胃癌细胞（SGC-7901）增殖，诱导凋亡，抑癌机制可能与Caspase-3、Caspase-9上调和Bcl-2下调相关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

组织学胚胎学发育生物学

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百合水溶液对麻黄素致损伤小鼠肺组织的影响 李重阳 彭静 俞诗源 2017 (6):  746-752.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.019 摘要 ( )   PDF(760KB) ( )   目的 探讨百合水溶液对麻黄素致损伤肺组织的影响。方法 选出生10 d的小鼠72只，随机分为空白对照组、实验对照组和百合组3组。实验对照组和百合组采用递增剂量连续（1-5，5-10，11-15d）腹腔注射（2.0、4.0、6.0 g/L）麻黄素溶液15 d（每次0.2 mL，每天两次），百合组注射麻黄素1 h后，再灌胃0.2 mL百合水溶液，实验对照组灌胃等量的生理盐水，空白对照组腹腔注射和灌胃等量的生理盐水。用比色法检测肺组织SOD、CAT和GSH-Px活性及血浆MPO活性的变化，用石蜡包埋法和HE染色法观察小鼠肺组织结构的病理变化，用免疫组织化学法检测小鼠肺组织Bax、NF-κB蛋白表达的变化。结果 实验对照组肺组织SOD、CAT和GSH-Px活性显著降低(P<0.01或P<0.05)，血浆MPO活性显著升高(P<0.01或P<0.05)，肺组织出现明显病理性损伤，肺泡上皮细胞局部降解、脱落，肺泡直径和肺泡隔厚度增大 (P<0.01)，肺组织Bax、NF-κB蛋白的阳性表达明显增强 (P<0.01或P<0.05)。与实验对照组相比较，百合组肺组织SOD、CAT和GSH-Px活性又升高 (P<0.01或P<0.05)，血浆MPO活性又显著降低（P<0.05)，肺组织损伤明显改善，肺泡上皮脱落减少，肺泡直径和肺泡隔厚度均又减小(P<0.01或P<0.05)，肺组织Bax、NF-κB蛋白的阳性表达明显减弱 (P<0.01或P<0.05)。结论 百合水溶液能增强机体抗氧化能力，提高机体免疫力，抑制肺组织Bax、NF-κB蛋白的阳性表达和肺组织细胞凋亡，对麻黄素致损伤肺组织有一定的保护作用。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

解剖学

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无症状颞下颌关节盘前移位个体的动态磁共振及髁突运动轨迹特点 郑红 张志光 张松梅 薛鹏 2017 (6):  715-720.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.014 摘要 ( )   PDF(701KB) ( )   目的 颞下颌关节盘早期的前移位临床上可无弹响症状，了解无症状颞下颌关节盘的早期移位个体的髁突运动中心轨迹特点，将有助于早期发现隐匿性颞下颌关节结构内紊乱疾病。 方法 动态磁共振(Cine-MRI) 和ARCUSdigma系统检查30例无症状个体开闭口过程中髁状突-关节盘运动特点和下颌运动范围。 结果 Cine-MRI显示30例无症状人群中，20例健康颞下颌关节、10例单侧可复性关节盘前移位，闭口位关节盘本体部仍呈双凹形、盘后区均有轻度增厚和前移位，盘-突关系在小开口（<2 cm）期恢复正常；无症状可复性关节盘的运动中心轨迹出现弹跳切迹和偏摆，光滑性、重复性及双侧运动中心轨迹的对称性不及健康人，但是切点运动轨迹平滑，与健康人的切点运动轨迹基本一致；运动轴在髁突轨迹弹跳时出现偏斜，然后保持平行，呈现开闭口初、末时密度比开闭口中时大；髁突运动中心运动距离（13.6±3.7）mm，下颌切点运动距离（40.5±3.4）mm。 结论 髁突运动轨迹能间接反映髁突-关节盘复合体在开闭口运动中的位置变化，为下一步临床使用下颌运动轨迹仪作为早期关节盘移位的诊断提供一定的理论参考。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

肿瘤生物学

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miR-182靶向作用环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1调控人黑素瘤A375细胞的增殖和侵袭 王丽纳 王凯波 庄永灿 王红兰 2017 (6):  710-714.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.013 摘要 ( )   PDF(352KB) ( )   目的 探讨miR-182对人皮肤黑素瘤细胞系A375细胞的增殖与侵袭能力的影响，及miR-182影响黑色素细胞增殖的机制。 方法 利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-182 模拟物或抑制剂转染人黑素瘤A375细胞，以使 miR-182过表达或低表达，采用MTT方法检测细胞活力变化，应用Transwell小室法检测A375细胞侵袭能力的变化，同时通过Real-time PCR检测核转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1(CREB1) mRNA的表达情况，采用Western blotting检测CREB1蛋白的表达水平。 结果 与对照组相比，miR-182沉默能够显著增强A375细胞增殖和侵袭能力，P<0.01，显著降低CREB1蛋白与mRNA的表达水平，P<0.01；miR-182过表达的作用与之相反。 结论 miR-182沉默增强A375细胞增殖和侵袭能力可能与降低CREB1蛋白相关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

神经生物学

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脑内移植RMNE6细胞治疗缺血性脑损伤的效果 武赟 翟晓艳 杨李旺 徐群渊 2017 (6):  635-641.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.001 摘要 ( )   PDF(1199KB) ( )   目的 为细胞替代治疗缺血性脑损伤选择合适的干细胞。 方法 将RMNE6细胞植入正常脑和缺血模型大鼠脑(8只)内，通过免疫荧光染色、行为学实验、影像学等方法观察其在脑内的状况，与安慰剂组（8只）及成纤维细胞移植组（8只）比较，观察其对模型动物梗塞体积的影响和模型动物行为学的改善。 结果 细胞移植后，RMNE6细胞在正常脑和缺血脑内可以存活，但移植有RMNE6细胞的缺血脑内出现肿瘤。细胞移植与否对梗死体积没有影响。细胞移植后，模型动物的行为学也未见明显改善。 结论 从安全性的角度考虑，RMNE6细胞不适合通过脑内移植治疗缺血性脑损伤，RMNE6细胞还需要改造。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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小鼠大脑亚硝酸盐暴露与DNA甲基化和组蛋白去乙酰化 刘俊 张丽丽 石贞玉 邓锦波 2017 (6):  642-650.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.002 摘要 ( )   PDF(1393KB) ( )   目的 观察慢性亚硝酸盐暴露对小鼠大脑皮质炎症损伤的影响及其探讨DNA甲基化和组蛋白去乙酰化等相关机制。 方法 选取8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠，随机分为对照组（生理盐水）、低剂量亚硝酸盐组（3g/L）和高剂量亚硝酸盐组(6g/L)，建立亚硝酸盐暴露模型，收集各组小鼠大脑皮质，利用免疫荧光染色法和Western blotting法分析大脑皮质炎症损伤，组蛋白去乙酰化酶和DNA甲基化相关酶的表达情况。 结果 慢性亚硝酸盐暴露后小鼠大脑皮质炎症损伤因子环氧化酶2（COX2）、白细胞介素-1β（IL-1β）、离子钙接头蛋白分子1（Iba1）、c-Fos、IL-6表达量明显多于对照组（P<0.01），同时高剂量暴露组DNA甲基化相关酶5-甲基胞嘧啶（5-mC）、DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3a、和组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）表达明显低于对照组（P<0.01）且都呈亚硝酸盐剂量依赖性。 结论 亚硝酸盐暴露可通过促进细胞免疫炎症对小鼠大脑皮质造成损伤,并且DNA甲基化和组蛋白去乙酰化可能参与了慢性亚硝酸盐暴露过程中的应答过程及其调控机制。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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多种脊髓损伤致继发性肠道功能障碍的模型比较 杨悦璠 汪益 李亭 肖杰欣 王茜 杨森 陈勇 易巧 孔欣欣 杨平 张晓 杨拯 2017 (6):  651-657.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.003 摘要 ( )   PDF(765KB) ( )   目的 通过3种不同方法制备大鼠脊髓损伤致继发性肠道功能障碍的模型，探究各组脊髓损伤致继发性肠道功能障碍模型的表现差别，为脊髓损伤继发肠道功能障碍的相关研究提供稳定的实验动物模型复制方法和实验基础。 方法 将48只SD大鼠随机分为打击组（A组，n=12）、全横断组（B组，n=12）、钳夹组（C组，n=12）、假手术组（D组，n=12）。于术后1 d、3d、7 d分别对各组进行BBB功能评分；肠肌电慢波测定；血清D-乳酸含量测定；HE染色观察肠组织形态。结果 术后1 d、3d、7 d，A、B、C组BBB评分、肌电慢波振幅均低于D组（P<0.05）;Chiu肠黏膜评分、血清D-乳酸浓度均显著高于D组（P<0.05）。术后第7天， A组血清D-乳酸浓度和Chiu肠黏膜评分与B、C两组间差异存在显著性（P<0.05）。 结论 不同方法制备脊髓损伤后，各组均继发肠道功能障碍，其中A组模型复制较为稳定，且死亡率较低，更适用于周期较长的实验研究。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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远端同源异型盒2和叉头盒O3a在大鼠脑皮质发育过程中的分布与表达 慕雅婷 李艳 郭琼 王磊 2017 (6):  658-662.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.004 摘要 ( )   PDF(543KB) ( )   目的 了目的 探讨远端同源异型盒2（Dlx2）和叉头盒O3a（FoxO3a）在SD大鼠脑皮质发育过程中的表达特点。 方法 应用Real-time PCR法检测Dlx2 mRNA和FoxO3a mRNA分别在受孕11d（E11）、E13、E15、E17、E19及生后1d（P1）的表达情况；应用免疫组织化学技术显示Dlx2和FoxO3a在E11、E13、E15、E17、E19及P1蛋白的表达情况。 结果 FoxO3a与Dlx2 mRNA在E11～P1均有表达，而FoxO3a mRNA表达高峰明显早于Dlx2 mRNA；Dlx2 mRNA表达在E15～E17时大幅度上升，而在此之后始终保持这一高水平的表达；Dlx2 mRNA与FoxO3a mRNA的表达在E15～P1呈现出一致的变化趋势；Dlx2基因在E19时出现mRNA水平的高表达而未见蛋白表达。 结论 Dlx2和FoxO3a基因在胚胎后期鼠脑皮质中均有表达，且其表达趋势具有一定的一致性；两基因的分布随皮质分层而改变。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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海洛因对小鼠视网膜结构和抗氧化物酶的影响 苟陶然 李重阳 欧锐 朱嘉宁 俞诗源 2017 (6):  663-668.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.005 摘要 ( )   PDF(674KB) ( )   目的 探讨海洛因对小鼠视网膜结构的影响。 方法 60只昆明小鼠随机分为对照组和海洛因组2组，海洛因组用递增剂量(2,3,4 g/L)连续(1～5、6～10和11～15 d)腹腔注射海洛因溶液15 d（每d 2次，每次0.2 ml），对照组注射等量生理盐水。称量检测小鼠体重及眼球重的变化，用生物显微技术观察小鼠视网膜组织结构的变化，用比色法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量的变化，用免疫组织化学法检测Bax和肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白的表达情况。 结果 海洛因组小鼠体重和眼球重量均低于对照组，小鼠视网膜组织均有不同程度的损伤，神经节细胞减少，出现空泡样变性，内核层和外核层结构紊乱，疏松成网状；视网膜组织SOD活性显著降低，MDA含量显著增加；Bax，TNF-α蛋白表达显著增加。 结论 海洛因会降低视网膜组织抗氧化能力，使组织脂质过氧化反应增加，诱导视网膜细胞凋亡和炎症的发生，对视网膜有一定的损伤效应。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

细胞和分子生物学

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CD73 对骨髓间充质干细胞增殖与衰老的影响 王琰 李琼 张三林 郭志坤 2017 (6):  669-674.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.006 摘要 ( )   PDF(768KB) ( )   目的 探讨 CD73 对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与衰老的影响。 方法 培养小鼠 BMSCs，构建慢病毒CD73 过表达载体和CD73 RNAi干扰载体，分别转染 BMSCs，实验分组：CD73 过表达组（OE组）、CD73 RNAi干扰组（RNAi组）和对照组（CON组）。衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal) 染色检测细胞的衰老情况； MTT 法检测细胞增殖能力变化；流式细胞术检测细胞周期变化；透射电子显微镜观测转染后细胞的超微结构；非损伤细胞功能分析仪检测细胞生长曲线。结果 慢病毒转染 BMSCs后72 h和168 h，衰老细胞数量 RNAi 组> CON 组> OE 组（P<0.05）；转染后3～4d BMSCs的增殖能力为OE 组较 RNAi 组和 CON 组细胞增殖速度快（P<0.05）；转染后3d各组细胞周期的变化是：OE 组、RNAi 组和 CON 组的 G1 期细胞所占比例分别为25.9%、44.1%和 51.7%；S 期细胞所占比例分别为48.8%、30.9%和26.9%；G2 期细胞所占比例分别为25.2%、25.0%和21.4%；透射电子显微镜观察结果显示，OE 组细胞质内粗面内质网和核糖体增多；细胞生长曲线显示 OE 组高于 CON 组和 RNAi 组。 结论 CD73促进 BMSCs增殖且抑制 BMSCs衰老。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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姜黄素对猪脂肪间充质干细胞成脂分化及Krüppel样因子2表达的影响 刘京霞 李方正 郇延军 姜忠玲 宋学雄 2017 (6):  675-681.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.05.007 摘要 ( )   PDF(472KB) ( )   目的 探讨姜黄素对猪脂肪间充质干细胞(AMSCs)成脂分化的影响，及姜黄素调控成脂分化的机制。 方法 用不同浓度姜黄素处理猪AMSCs，用MTT比色法检测姜黄素对猪AMSCs增殖的影响，用油红O染色提取法检测对成脂分化的程度，用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测对Krüppel样因子（KLF2）和过氧化物酶增殖物激活受体γ（PPARγ）2 mRNA表达的影响。结果 当姜黄素浓度为1、5、10μmol/L用于猪AMSCs时对，AMSCs增殖无明显影响，但高于15μmol/L时，则具有显著的抑制作用（P＜0.05）；当姜黄素用于猪AMSCs的成脂诱导分化时，1~30μmol/L的浓度即能显著抑制成脂分化（P＜0.05），其中25μmol/L浓度获得68.19%的高抑制率；当25μmol/L姜黄素用于检测KLF2和PPARγ2 mRNA的表达，诱导分化2、8和16d的KLF2 mRNA的表达上调率分别达到48.37%、20.56%和9.64%，而PPARγ2 mRNA的表达下调率分别达到16.01%、35.93%和27.27%。 结论 姜黄素具有抑制猪AMSCs增殖和成脂分化作用，该抑制作用与姜黄素促进KLF2 mRNA的表达和抑制PPARγ2 mRNA的表达相关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

综述

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蛋白激酶A RⅡβ结构及功能的研究进展 丁玉静 金兴 刘俊秀 马芙蓉 2017 (6):  761-765.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.022 摘要 ( )   PDF(256KB) ( )   蛋白激酶A（PKA）是由1个调节亚基（R亚基）二聚体和两个催化亚基（C亚基）组成的四聚体，全酶无活性。R亚基有RⅠα、RⅠβ、RⅡα和RⅡβ 4种亚型，分别具有不同的理化性质。RⅡβ亚基氨基端包含1个二聚化/对接结构域，PKA通过此结构域与腺苷酸激酶锚定蛋白结合锚定于细胞的特定位点。羧基端是两个串联的高度保守的环核苷酸结构域，与PKA 全酶解聚以及激活有关。两个RC异二聚体通过RⅡβ亚基中的β4~β5环相锚定。细胞质中存在足够的MgATP时将导致 RⅡβ亚基自身磷酸化。RⅡβ在特定组织表达，主要表达于内分泌腺、脑和脂肪组织。生物信息学分析表明，RⅡβ与其他R亚基的序列有很大差别，只有大约50%的序列相同，提示RⅡβ可能具有不同的生物学功能。因此，目前对PKA RⅡβ的功能及其作用机制的研究已逐渐成为热点。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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肝窦内皮细胞的窗孔调控与脂肪肝形成的研究进展 王巧稚 樊婧 张卫光 2017 (6):  766-770.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.06.023 摘要 ( )   PDF(214KB) ( )   衬贴于肝血窦的肝窦内皮细胞具有无隔膜的窗孔，并汇聚成肝筛。窗孔相当于可选择超滤系统，有利于调控肝细胞与肝窦血液的物质交换，尤其是在脂质代谢方面，窗孔结构异常是脂质代谢紊乱的重要因素。本文就窗孔的超微结构、开窗机制和调控因素以及与脂肪肝相关联系的进展做一综述。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标