当期目录

2020年, 51卷, 3期
刊出日期：2020-06-06 上一期    下一期
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生物工程学
综述
肿瘤生物学

解剖学
组织学胚胎学发育生物学

神经生物学
人类学
细胞和分子生物学
技术方法


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生物工程学

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人包皮组织脱细胞基质的制备与生物相容性 林俊山 赵星 李笃妙 许雅丽 2020 (3):  446-449.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.023 摘要 ( )   PDF(8318KB) ( )   目的  制备人包皮组织脱细胞基质移植物（AMGs），探讨其浸提液对兔尿道黏膜细胞毒性。  方法  制备人包皮组织脱细胞基质后，通过Masson 染色观察脱细胞后基质的表征，扫描电子显微镜观察其孔径大小。体外培养尿道黏膜细胞，采用免疫荧光鉴定其AE3表达。 尿道黏膜细胞与AMGs 基质浸提液体外共培养，MTT法检测 AMGs 浸提液对 尿道黏膜细胞毒性。  结果  Masson 染色显示细胞去除干净，只有胶原蛋白构成的支架，扫描电镜显示支架的孔径为20～50 μm，分布均匀，形态良好。适当浓度的AMGs 基质浸提液对尿道黏膜细胞无明显毒性。  结论  人包皮组织脱细胞基质为理想的 AMGs 支架材料，制备的 AMGs 材料细胞毒性小，有一定的实用价值。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

综述

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心脏淋巴管的分布、功能和病理意义 王海杰 谭玉珍 2020 (3):  469-472.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.027 摘要 ( )   PDF(2557KB) ( )   心脏淋巴引流对于维持心肌内微环境稳定起着重要作用。在心肌梗死和心力衰竭等疾病，淋巴管损伤或功能障碍可引起心脏淋巴水肿，从而导致心肌纤维化，加重炎症反应和严重影响心功能。近年来，人们对于心脏淋巴水肿与心脏疾病的相互关系以及心脏淋巴管新生的生理、病理意义的研究非常重视。靶向刺激心脏淋巴管新生可作为缓解心脏淋巴水肿的可靠疗法。然而，刺激心脏淋巴管新生的优化策略有待深入研究。本文主要综述心脏淋巴管的分布和功能特点，讨论心脏淋巴水肿的病理作用，心脏淋巴管新生的机制以及促进心脏淋巴管新生的措施和临床意义。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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冠蛋白:肿瘤诊断的潜在靶点 林晨 马琪 王萍 2020 (3):  461-468.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.026 摘要 ( )   PDF(2407KB) ( )   冠蛋白 (coronin) 是位于细胞膜下方呈冠状结构的蛋白，由于它具备特殊的结构能与肌动蛋白结合，在胚胎发育和上皮细胞的迁移过程中扮演重要的角色。近年来随着对coronin家族研究的不断深入，发现其与微丝结合后能通过不同的分子机制影响肿瘤细胞的增殖和迁移；并且其表达水平的异常直接影响患者的预后。因此，对coronin的功能和分子机制的研究是目前的热点之一。我们将阐述coronin家族成员的结构特征及相应功能，总结并讨论其在当前各类肿瘤研究中的进展与潜在的应用前景。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

肿瘤生物学

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微小RNA-21转染介导食管鳞癌细胞生物学行为及细胞放射敏感性的变化 邵志雄 谢俊杰 徐振华 曾程 宋青玲 易峰涛 2020 (3):  385-391.  doi: 10.16098/j.issn.05290-1356.2020.03.012 摘要 ( )   PDF(3791KB) ( )   目的 探讨微小RNA-21（miRNA-21）表达介导食管鳞癌细胞的生物学特性。  方法  转染miRNA-21正义表达载体、miRNA-21空载体及miRNA-21抑制剂，通过Real-time PCR实验，以食管鳞状上皮癌TE-1正常细胞为对照组，检测转染结果。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8）对细胞增殖活性进行检测；采用流式细胞术检测细胞凋亡能力；通过Transwell小室和划痕实验观察TE-1细胞侵袭能力及迁移能力；通过集落形成实验观察TE-1细胞对放疗敏感性变化；采用SPSS 19.0统计学软件对所得数据进行分析。  结果  Real-time PCR结果显示，转染miRNA-21抑制剂后，TE-1细胞中miRNA-21的表达水平明显降低（P<0.05）。相比正常细胞生长组，阳性对照组、阴性对照组转染miRNA-21抑制剂后，TE-1细胞增殖能力降低，细胞凋亡加快（P<0.05）。此外，实验抑制组中细胞侵袭和迁移能力下降。集落形成实验分析显示，抑制miRNA-21表达明显提高了TE-1细胞对放射的敏感性。  结论  下调miRNA-21可降低食管鳞状上皮癌TE-1细胞的增殖、侵袭、迁移能力及放疗的敏感性，是未来治疗食管癌的潜在靶点。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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微小RNAs对肺癌细胞系侵袭、迁移及凋亡的影响 韩京军 张艳炜 张磊 计英杰 李海洲 刘曙光 2020 (3):  392-397.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.013 摘要 ( )   PDF(10494KB) ( )   目的  探讨微小RNAs（miRNAs）对肺癌细胞系侵袭、迁移及凋亡的影响。  方法  通过hsa-mir-933、hsa-mir-4700-3p、hsa-mir-3144-3p、hsa-mir-3972和hsa-mir-548a-5p感染目的细胞，流式细胞术检测5种miRNAs对肺癌细胞系的细胞凋亡的影响；Transwell分析5种miRNAs对肺癌细胞系的细胞侵袭效果；划线分析5种miRNAs对肺癌细胞系的细胞迁移的影响；Real-time PCR检测miRNA表达情况。  结果  与感染空载体组和无感染的对照组相比，感染了hsa-mir-933、hsa-mir-4700-3p、hsa-mir-3144-3p、hsa-mir-3972和hsa-mir-548a-5p的细胞凋亡明显增加，其中NCI-H460和A549均以转染hsa-mir-4700-3p凋亡率最高；5种miRNAs对肺癌细胞的侵袭数目明显减小；5种miRNAs对肺癌细胞的细胞的迁移效果减弱； Real-time PCR检测hsa-mir-933、hsa-mir-4700-3p、hsa-mir-3144-3p、hsa-mir-3972和hsa-mir-548a-5p处理后相应miRNA的水平表达均相应增加。   结论  5种miRNAs能够促进肺癌细胞系的凋亡，降低肺癌细胞系的高侵袭性，抑制肺癌细胞系的迁移，增加对应miRNA的表达。  参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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PHLDA2对肝癌细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响 马战 姜钟翔 姜政 2020 (3):  398-404.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.014 摘要 ( )   PDF(7492KB) ( )   目的  探讨血小板白细胞C激酶底物同源性样结构域蛋白家族A成员2（PHLDA2）在肝癌中的表达及对肝癌细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。  方法  在线数据库基因表达谱数据动态分析（GEPIA）PHLDA2在369例肝癌组织和160例癌旁组织中的表达差异以及其表达水平对肝癌患者总体生存率的影响。包装PHLDA2敲减慢病毒。细胞计数试剂盒-8（CCK-8）和集落形成实验检测细胞增殖，Transwell法检测细胞侵袭和迁移，流式细胞术检测细胞凋亡。Western blotting检测Bax和cleaved Caspase-3蛋白的表达。  结果  PHLDA2在肝癌组织中高表达，高表达的PHLDA2降低肝癌患者的总体生存率；敲低PHLDA2可以抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力，促进肝癌细胞凋亡。  结论  PHLDA2可促进肝癌的发生发展，具有肿瘤促进因子的功能。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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Prestige人工颈椎间盘置换术后异位骨化对颈椎活动度的影响 徐帅 欧云生 杜兴 朱勇 何彬 李远强 余浩洋 2020 (3):  405-410.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.015 摘要 ( )   PDF(5833KB) ( )   目的  分析Prestige人工颈椎间盘置换术后异位骨化（HO）对颈椎置换节段活动度（ROM）的影响，探讨导致人工颈椎间盘置换术后异位骨化形成的相关因素。  方法  回顾性分析重庆医科大学附属第一医院骨科2014年1月～2018年1月受Prestige人工颈椎间盘置换术的 66例患者。在颈椎X线片上分析评估，测量置换节段活动度，并使用McAfee分级对异位骨化进行分级，采用 Wilcoxon 符号秩和检验分析异位骨化形成和与置换节段活动度间的关系，采用 t 检验分析异位骨化分级和对置换节段活动度间的影响。使用 Logistic 回归分析评估年龄、性别、身体质量指数（BMI），置换节段数量，术前项韧带骨化情况，病变椎间隙高度与相邻椎间隙高度比值、置换节段术前及术后活动度及围手术期非甾体类抗炎药（NSAIDs）的使用情况等因素与颈椎间盘置换术后异位骨化形成的关系。  结果  66例患者中23例患者末次随访时出现异位骨化，发生率为34.8％。异位骨化组置换节段活动度明显小于无异位骨化组，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05),McAfee Ⅲ~Ⅳ级置换节段活动度明显小于McAfee Ⅰ~Ⅱ级组，两者比较差异有统计学意义（P<0.01）。相关性分析结果显示，置换节段术前活动度及术后活动度与术后异位骨化具有相关性（P＜0.05)。进一步选择置换节段术后活动度因素进行ROC曲线分析，置换节段术后活动度≤8°更容易发生异位骨化。  结论  Prestige人工颈椎间盘置换术后，异位骨化会导致置换节段活动度的减少，异位骨化分级越高置换节段活动度减少越明显。人工颈椎间盘置换术后异位骨化形成的发生与置换节段术前及术后活动度有关，术后置换节段活动度≤8°更容易发生异位骨化。  参考文献 | 相关文章 | 计量指标

解剖学

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基于CT三维重建的成人第5掌骨的形态学及临床意义 邓玖征 赵喆 朱剑津 程晓光 马毅民 潘勇卫 2020 (3):  411-415.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.016 摘要 ( )   PDF(1681KB) ( )   目的  通过对成人第5掌骨CT三维重建数据进行测量，探讨人类第5掌骨形态学特点及临床意义，为临床手术和器械设计提供依据。  方法  对医学影像工作站内留存的114例第5掌骨CT扫描进行三维重建，基于三维模型测量第5掌骨长度、掌骨头半径、掌骨弓半径和1/2掌骨弓圆心角、掌骨头偏心距和偏心比及髓腔狭部内径。  结果  成人掌骨长度（51.55±3.01）mm，掌骨头半径（6.59±0.49）mm，掌骨弓半径（99.58±26.83）mm，1/2掌骨弓圆心角（15.90±3.36）°，掌骨头偏心距平均（0.49±0.26）mm，掌骨头偏心比平均（7.4±3.9）%，髓腔峡部内径平均（2.28±0.77）mm。  结论  男性掌骨长度、掌骨头半径、掌骨头偏心距及髓腔峡部内径大于女性，其余指标性别间差异无显著性；左右手之间差异也无显著性。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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股外侧皮神经在髂前上棘附近的解剖学和超声观察 马晓慧 郑言言 徐朝阳 张铭 徐胜春 2020 (3):  416-419.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.017 摘要 ( )   PDF(4514KB) ( )   目的  感觉异常性股痛(MP)常由股外侧皮神经(LFCN)的机械嵌压引起，通常发生在股外侧皮神经走行至髂前上棘的部位。MP最佳手术治疗方法有待确定，部分原因是LFCN周围筋膜平面的精细结构尚未阐明。本研究的目的是利用生物塑化和超声确定LFCN在髂前上棘附近的筋膜结构。  方法  选择11具尸体（6名女性，5名男性， 38～97岁）制作薄层生物塑化切片。对34名健康志愿者（19名女性，15名男性，20～62岁）进行LFCN超声评估。  结果  LFCN在腹内斜肌筋膜纤维和髂筋膜之间出骨盆，然后在缝匠肌表面和位于髂前上棘（ASIS）下方的阔筋膜张肌之间走行。在缝匠肌和阔筋膜张肌之间，LFCN走行在独立封闭的筋膜鞘中。  结论  LFCN在髂前上棘处位于腹内斜肌腱膜内。LFCN在缝匠肌表面及外侧走行至大腿前外侧区域。超声定位LFCN有助于外科手术。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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股骨颈内固定螺钉构型的解剖影像分析 袁剑锋 朱求亮 史本功 2020 (3):  420-424.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.018 摘要 ( )   PDF(3770KB) ( )   目的  根据影像解剖图像分析探讨股骨颈骨折3枚螺钉内固定的最优螺钉构型。  方法  自2017年1月至2月，在安吉县人民医院医学影像信息系统（PACS）中回顾性选择15例正常成人双侧(30根)股骨行三维CT重建，其中男8例，女7例；年龄28～63岁，平均(43±8.5)岁。于股骨颈中心轴线垂直方向在颈中部显示股骨颈截面（FNS)，经图像重叠获得其在股骨转子外侧壁的投影。在股骨颈截面内模拟3种螺钉构型：以股骨颈截面长轴为中线的等边三角形构型（IET-FNS组）、股骨冠状轴为中线的等边三角形构型（IET-PF组）和股骨颈截面内的钝角三角形螺钉构型（OT组）。观察螺钉间距离、螺钉距股骨颈截面中心距离、螺钉工作面积与股骨颈截面积比。  结果  螺钉间的距离：OT组（5.96±0.37）cm；IET-FNS组（4.74±0.39）cm。IET-PF组（4.58±0.39）cm；螺钉与股骨颈截面中心点距离：OT组（3.43±0.18）cm；IET-FNS组（2.81±0.17）cm；IET-PF组（2.72±0.14）cm。螺钉面积与股骨颈截面积比：OT组（0.31±0.01）；IET-FNS组（0.21±0.02）；IET-PF组（0.16±0.01）。OT组3项测量指标值均较大于其他两组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论  从影像解剖学分析，钝角三角形螺钉构型在观察指标螺钉间距离，螺钉距股骨颈截面中心距离、螺钉工作面积与股骨颈截面积比有优势，可能是股骨颈骨折3枚螺钉内固定的理想构型，但需要进一步的生物力学测试证实。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

组织学胚胎学发育生物学

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肥胖小鼠脂肪组织中炎症因子的表达 宋莹 张晗思 李茜茜 马梦雪 王帅 林俊堂 乔梁 闫欣 2020 (3):  425-430.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.019 摘要 ( )   PDF(5417KB) ( )   目的  探讨肥胖对小鼠脂肪中炎症因子分泌的影响及其作用的分子机制。  方法  随机选取20只Lepob/ob肥胖小鼠作为研究对象，同窝野生型C57BL/6 J小鼠作为对照组。测定小鼠体重、脂肪重量、血糖、葡萄糖耐量和胰岛素耐量；HE染色观察白色和褐色脂肪细胞的状态，并对脂肪细胞直径进行统计学分析；Western blotting检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、核因子κB（NF-κB）、蛋白激酶B（Akt）和p-Akt的蛋白表达；Real-time PCR分析白色和褐色脂肪中CC-趋化因子配体2(CCL2)、CD44、集落刺激因子2(CSF2)、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、Iba1、白细胞介素(IL)-1α、IL-6、IL-7、JUN和S100β mRNA的表达。  结果  与对照组相比，Lepob/ob 小鼠的体重随年龄的增长而显著增加（P<0.001），白色脂肪重量、皮下脂肪重量及血糖显著升高（P<0.01，P<0.01，P<0.01），葡萄糖耐量较低（P<0.001）并产生胰岛素抵抗（P<0.001）；脂肪细胞直径显著增大，且各个脂肪组织均有巨噬细胞浸润灶出现；脂肪细胞内Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、p-JAK2、iNOS、NF-κB、Akt和p-Akt蛋白表达均显著升高（P<0.05）；CCL2、CD44、IL-1α、IL-6、IL-7、JUN和S100β mRNA表达均显著升高。 结论  肥胖诱导小鼠脂肪组织中炎症因子显著表达，促使细胞分泌传导紊乱，导致炎症级联发生。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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过表达肝/骨/肾型碱性磷酸酶对小鼠急性心肌梗死后心室重塑的影响 王立友 张冬颖 2020 (3):  431-436.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.020 摘要 ( )   PDF(8228KB) ( )   目的 探讨肝/骨/肾型碱性磷酸酶(ALPL)过表达对小鼠急性心肌梗死（MI）后心室重塑的影响。  方法  36只8周龄雄性C57BL/6 J小鼠随机分为对照组(sham组)，心肌梗死组（MI+Adv-EGFP组）和ALPL过表达组（MI+Adv-ALPL组）,每组12只。术后2周，使用心脏彩色超声测定小鼠心脏功能，HE染色观察小鼠心脏组织病理变化，Real-time PCR检测小鼠心脏ALPL mRNA表达水平, Western blotting检测ALPL、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）和Ⅲ型胶原蛋白（ColⅢ）表达情况，苦味酸天狼猩红染色偏振光法测定各组标本胶原容积分数(CVF)和Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值。  结果  与MI组相比，过表达ALPL组小鼠心脏左室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率(LVFS)明显下降（P<0.05)，过表达ALPL组HE染色可见心肌纤维断裂，排列紊乱，梗死区域纤维化明显，心脏组织α-SMA、ColⅠ、ColⅢ蛋白表达及CVF均显著增大（P<0.05），同时ColⅠ/ColⅢ比值显著增加（P<0.05）。  结论  ALPL过表达加重小鼠急性心肌梗死后心室病理性重塑。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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心肌肥厚预适应小鼠线粒体蛋白质组学分析 辛凯悦 马雷雷 董震 马秀瑞 孙爱军 2020 (3):  378-384.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.011 摘要 ( )   PDF(3560KB) ( )   目的 使用线粒体蛋白质谱分析方法，探讨心肌肥厚预适应的分子保护机制。 方法 14只雄性C57BL6/J小鼠随机分为假手术组（n=6）和心肌肥厚预适应组（n=8），建立小鼠心肌肥厚预适应模型（主动脉弓缩窄3 d、解除缩窄4 d），随机选假手术组3只、心肌肥厚预适应组4只小鼠做蛋白质组学分析，其余小鼠用于形态功能学实验。运用小鼠心脏超声及单个心肌细胞收缩检测技术检测心脏功能学变化，通过心脏常规病理切片及电子显微镜检测心肌组织形态学和线粒体超微结构变化，运用蛋白质组学技术及生物信息学方法，筛选出差异线粒体蛋白，并通过Western blotting验证关键蛋白表达水平变化。 结果 心肌肥厚预适应组小鼠与假手术组小鼠相比，心脏功能及心肌组织形态学改变无显著性，但透射电子显微镜检测提示，线粒体嵴密度增加，后续利用线粒体蛋白质组学方法共筛选到20个差异表达蛋白（5个上调，15个下调）；随后生物信息学分析显示，差异蛋白主要与线粒体核糖体蛋白有关；关键蛋白的Western blotting验证结果与组学分析结果相一致。 结论 心肌肥厚预适应激能够增强心肌线粒体功能，这可能与线粒体核糖体蛋白介导的线粒体氧化磷酸化复合体的转录加工、运输过程相关。  参考文献 | 相关文章 | 计量指标

神经生物学

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白藜芦醇预处理对星形胶质细胞氧糖剥夺/再复氧损伤后活化及炎症反应的影响 刘菁 刘杰 廖鸿雁 陈月 向勤 杨琴 2020 (3):  313-319.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.001 摘要 ( )   PDF(6705KB) ( )   目的 探讨白藜芦醇预处理对体外氧糖剥夺/再复氧(OGD/R) 损伤后星形胶质细胞活化及炎症反应的影响。 方法 征集20只新生SD大鼠（生后24 h内），将其原代分离培养的大脑皮层星形胶质细胞行氧糖剥夺150 min，再复氧培养24 h。实验分为正常组(Nor)、对照组(Ctrl) 和白藜芦醇预处理组(Res)。 CCK-8法检测细胞活力，5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）法检测细胞增殖，免疫荧光染色法检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、S100β蛋白表达，Western blotting 检测GFAP、S100β、波形蛋白(vimentin)、白细胞介素（IL）-10、β干扰素（IFN-β）、肿瘤坏死因子α(TNF-α）和 IL-1β蛋白表达，ELISA法检测IL-10、IFN-β、TNF-α和IL-1β蛋白含量。  结果 CCK-8法检测结果显示，随着白藜芦醇浓度（5、20、40 μmol/L）的增高，细胞活力逐渐增高，且与对照组差异有显著性（P<0.01），以40 μmol/L组细胞活力最强。之后随白藜芦醇浓度(80、100 μmol/L) 的增高，细胞活力显著降低，以100 μmol/L组细胞活力最弱 (P<0.05)。EdU检测显示，在OGD/R损伤后，对照组和白藜芦醇组显著高于正常组EdU阳性细胞比例(P<0.01)，而白藜芦醇组显著低于对照组 (P<0.01)。免疫荧光染色、Western blotting和ELISA法显示，对照组和白藜芦醇组GFAP、S100β、vimentin、IL-10、IFN-β、TNF-α和IL-1β 蛋白表达或含量显著高于正常组(P<0.05)，但白藜芦醇组除 IL-10 和IFN-β蛋白表达或含量较对照组增高外，其余均低于对照组(P<0.05)。 结论 白藜芦醇预处理可抑制 OGD/R 后体外星形胶质细胞的活化，并减轻炎症反应。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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白藜芦醇对氧糖剥夺/再复氧损伤后体外小胶质细胞极化的影响 刘杰 任瑜 陈月 刘菁 向勤 杨琴 2020 (3):  320-325.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.002 摘要 ( )   PDF(5345KB) ( )   目的  探讨白藜芦醇对氧糖剥夺/再复氧损伤（OGD/R）后小胶质细胞极化的影响。 方法  对体外培养的N9小胶质细胞进行氧糖剥夺150 min，复氧培养24 h。实验分为正常组、对照组和白藜芦醇预处理24 h组。细胞计数盒-8(CCK-8)法检测细胞活力，硫代巴比妥酸（TBA）和水溶性四唑盐（WST-1）法分别检测细胞上清液中丙二醛（MDA）含量和总超氧化物歧化酶（SOD）活性，免疫荧光法检测核因子-E2-相关因子2（Nrf2）的核移位，Western blotting和Real-time PCR法检测CD206、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、Nrf2、血红素加氧酶1（HO-1）和苯醌还原酶（NQO1）蛋白和mRNA表达水平。   结果  OGD/R损伤后，白藜芦醇组细胞活力、SOD活力、CD206、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白或mRNA表达均显著高于对照组（P<0.05,n=3），而MDA含量和iNOS蛋白或mRNA表达均显著低于对照组（P<0.05,n=3），白藜芦醇组Nrf2 蛋白较对照组明显移位到细胞核。   结论 白藜芦醇预处理可能通过增强Nrf2的激活，调控M1/M2型小胶质细胞极化，从而减轻OGD/R后小胶质细胞的氧化应激损伤。  参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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尿素通道蛋白B敲除小鼠脑组织水通道蛋白4表达改变与抑郁样行为的关系 袁德智 侯良绢 田宽 胡玲 李晋芳 冉建华 2020 (3):  326-331.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.003 摘要 ( )   PDF(7871KB) ( )   目的  探讨尿素通道蛋白B（UT-B）敲除小鼠海马超微结构改变，以及水通道蛋白4（AQP4）的表达变化，探讨形态改变与小鼠抑郁样行为的关系。  方法 采用糖水偏好和强迫游泳实验检测野生型与UT-B敲除小鼠（各10只）的行为差异，透射电子显微电镜观察小鼠海马组织的超微结构改变，免疫组织化学观察脑组织AQP4的表达，免疫印迹技术检测AQP4表达水平。  结果  野生型小鼠与UT-B基因敲除小鼠糖水偏好指数分别为(84.67±4.85)%和(65.67±7.97)%（P<0.001），而强迫游泳实验不动时间分别为(128.56±11.24) s和(209.11±20.99) s（P<0.001）；两种行为学检测结果显示，UT-B敲除小鼠表现出抑郁样行为。电子显微镜结果显示，敲除小鼠出现神经元神经纤维肿胀和退行性改变，血管周围星形胶质细胞终足肿胀。免疫组织化学结果显示，敲除小鼠脑皮质、海马、丘脑等部位AQP4免疫阳性细胞数量明显减少，AQP4免疫阳性细胞主要分布于软脑膜、室管膜及脑血管周围，但脑血管周围免疫染色减弱。免疫印迹法检测提示，海马组织中AQP4表达水平下调27.1%（P<0.05）。    结论  UT-B 基因敲除小鼠脑皮质和海马AQP4表达减少，可能通过影响神经发生和脑代谢引起小鼠的抑郁样行为。  参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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小鼠视觉发育关键期外侧膝状体胰岛素样生长因子2的动态表达 罗诗诗 苏强 孙秋敏 徐菁 曹文宇 徐杨 刘政海 万炜 2020 (3):  338-343.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.005 摘要 ( )   PDF(7464KB) ( )   目的  探讨视觉发育关键期外侧膝状体（LGB）胰岛素样生长因子2 (IGF2)的动态表达变化。  方法  选取3组不同年龄段的昆明小鼠进行试验，分别为3周龄组，5周龄组,7周龄组,每组12只。采用前爪触地反射实验检测各组小鼠的视觉功能是否正常；采用免疫组织化学技术检测小鼠出生后3、5和7周外侧膝状体IGF2蛋白及其受体的表达水平，分析IGF2蛋白在LGB各局部及其受体的表达变化模式。  结果  3～7周的发育过程中，在小鼠LGB背侧核IGF2蛋白表达5周时显著减少，7周时显著增加，腹侧核IGF2蛋白表达随时间逐渐增加。LGB背侧核及腹侧核IGF2受体蛋白表达5周时显著增加，7周时减少至3周时水平。   结论  视觉发育关键期小鼠外侧膝状体IGF2及其受体的表达存在随时间的动态改变，且各局部的表达模式不完全一致，IGF2及其受体可能与小鼠视觉发育可塑性有关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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局灶性脑缺血后125Ⅰ-神经生长因子对血脑屏障的通透性 曾倩 马新宇 曹中伟 2020 (3):  344-351.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.006 摘要 ( )   PDF(6808KB) ( )   目的 通过大鼠局灶性脑缺血实验，探讨神经生长因子(NGF)在大脑局部脑缺血情况下通过血脑屏障（BBB）的最佳时间及机制，为NGF在临床上的应用提供新的用药途径。 方法  对65只健康雄性SD大鼠采用改良的线栓法制备局灶性脑缺血模型，按缺血后不同时间点，给予每只大鼠注入125 Ⅰ-NGF，利用γ射线计数仪检测γ计数量，观察缺血不同时间BBB通透性的改变。脑缺血后BBB通透性最大的时间点（缺血3 d）大鼠为实验组（15只），不制造脑缺血动物为对照组（15只）。对大鼠行脑冠状切片，通过放射自显影观察成影部位、面积及亮度。利用透射电子显微镜观察脑缺血不同时间BBB的变化。  结果  随脑缺血时间延长，BBB通透性逐渐增加，其中脑缺血后第3天BBB通透性最大，而后又逐渐减弱。在BBB相同通透性情况下，γ计数显示，伴随用药时间的延长对照组和实验组γ计数均有所增加，实验组各时间点γ计数高于对照组，两组比较差异均有显著性（P＜0.05），以用药 4 h γ计数最高。放射自显影结果显示，对照组给药1 h整个大脑不显影，4 h及7h脑室及室周脑组织显影，面积约占脑冠状切面的4.1%，亮度明显；实验组给药1 h右侧大脑表面显影，面积约占脑冠状切面的6%，亮度较强，4 h及7h除了脑室及室周脑组织显影外，在右侧脑额叶（FL）、顶叶（AL）和颞叶皮质和髓质中有大面积显影，面积占脑冠状切面的36.2%～47.3%，亮度很强。 结论 随着大鼠脑缺血时间延长BBB通透性增加，其中缺血3 d通透性最强；大鼠局灶脑缺血3 d用药4 h 125Ⅰ-NGF进入BBB量最大，在额叶、顶叶及颞叶显影最明显。NGF能通过局灶性脑缺血的血脑屏障，可能为临床给药途径提出新思路。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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雌二醇对雌性家兔胃窦肌电活动影响的数学模型构建与分析 赵建帅 张柳凝 张莹利 张金 杜宜楠 郭雅茹 李想 武永杰 徐永平 2020 (3):  352-360.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.007 摘要 ( )   PDF(4756KB) ( )   目的  通过观察雌激素受体在胃窦的表达，并利用构建的数学模型研究雌激素对雌兔胃窦平滑肌肌电活动的影响，探讨雌激素对胃动力的调节作用。  方法  应用免疫荧光技术检测雌激素受体在胃窦壁的表达；采用BL-420F生物监测仪监测：1. 比较假手术组与卵巢摘除组家兔胃窦肌电活动指数的差异，每组各3只; 2. 观察苯甲酸雌二醇剂量（0、0.1、0.15、0.2、0.25和0.3 mg/kg）对胃窦肌电活动的影响，每个剂量组各3只。构建数学模型，分析量效关系和作用机制。  结果  雌激素受体在胃窦壁的表达呈阴性；卵巢摘除后胃窦肌电活动指数极显著性降低（P<0.01）；随着雌二醇剂量的增加，胃窦肌电活动指数先增加，后降低。方差分析表明，相邻各组间胃窦肌电活动指数差异性显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）。以雌二醇剂量为自变量x，胃窦肌电活动指数为因变量y，拟合得到函数：y=2.80 + 5.65 × exp{-0.5×［(x-0.159)/0.038]2}为高斯函数（R=0.9884，P>0.05），表明雌二醇对胃窦平滑肌的调控是基于胃窦自身内在调控机制的基础上进行的，且对其内在调控机制的影响巨大。  结论  胃窦壁上不存在雌激素受体；雌二醇与胃窦肌电活动指数的量效关系数学模型符合高斯函数模型特征，雌二醇对胃窦平滑肌的活动起到促进作用，且是基于对胃窦肌电活动内在调控机制的影响下间接实现的。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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毛蕊异黄酮对缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞线粒体凋亡通路的影响 张彐宁 靳晓飞 周晓红 高维娟 2020 (3):  332-337.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.004 摘要 ( )   PDF(5069KB) ( )   目的  探讨毛蕊异黄酮对缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞线粒体凋亡通路的影响。 方法  将PC12细胞随机分为4组：正常组（control）、模型组（model）、毛蕊异黄酮组（calycosin）和尼莫地平组（nimodipine，阳性对照药组）。除control组外，其余各组进行缺氧缺糖2 h，复氧复糖24 h制作模型处理。Calycosin组和nimodipine组在复氧复糖的同时分别给予含有毛蕊异黄酮（0.07 μmol/L）和尼莫地平（5.00 μmol/L）的含药培养基处理。用CCK-8法检测各组细胞活性，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，细胞免疫荧光法检测各组细胞Bax/Bcl-2比值，Western blotting法检测线粒体凋亡通路中关键蛋白细胞色素C（Cyt-C）、凋亡酶激活因子1（Apaf-1）和Caspase-3表达。 结果  与control组相比，model组细胞的活性明显降低（P<0.05），细胞凋亡率明显升高（P<0.05），Bax/Bcl-2比值明显升高（P<0.05），线粒体凋亡通路中关键蛋白Cyt-C、Apaf-1和Caspase-3的表达均明显升高（P<0.05）；与model组相比，calycosin组和nimodipine组的细胞活性均明显提高（P<0.05），细胞凋亡率明显降低（P<0.05），Bax/Bcl-2比值明显降低（P<0.05），线粒体凋亡通路中关键蛋白Cyt-C、Apaf-1和Caspase-3的表达均明显降低（P<0.05），差异有统计学意义。 结论 毛蕊异黄酮可显著提高缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞活性，抑制细胞凋亡，其作用机制与毛蕊异黄酮抑制线粒体凋亡通路中关键蛋白Cyt-C、Apaf-1和Caspase-3表达密切相关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

人类学

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新疆察布查尔县锡伯族成人20项容貌形态学特征 侯艳丽 徐国昌 张庆远 刘荣志 许明珠 温有锋 2020 (3):  437-441.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.021 摘要 ( )   PDF(873KB) ( )   目的  调查新疆察布查尔县锡伯族成人20项容貌形态学特征，探讨其容貌形态特征的成因，为少数民族人类学的基础研究提供数据。  方法  采用随机抽样的方法确定677名锡伯族成人作为调查对象，对其20项容貌的形态学进行测量和统计学分析。  结果  从年龄组来看，不同年龄组的锡伯族男性间，差异有统计学意义的指标包括，眼裂倾斜度（χ2=27.47，P<0.05）、头发形状（χ2=16.10，P<0.05）和眉弓（χ2=13.92，P<0.05）等3项；不同年龄组的锡伯族女性间，差异有统计学意义的指标有，美人沟下巴（χ2=16.56，P<0.05）、眉毛（χ2=22.62，P<0.05）、鼻孔最大径（χ2=12.74，P<0.05）、下颌（χ2=12.64，P<0.05）、眉弓（χ2=22.00，P<0.05）和鼻背形态（χ2=50.49，P<0.05）等6项，其他指标差异无统计学意义。从性别来看，锡伯族成人20项容貌形态学体质特征中有8项指标存在性别差异，即：发旋（χ2=11.68，P<0.05）、前额倾斜度（χ2=12.99，P<0.05）、眼裂倾斜度（χ2=27.67，P<0.05）、耳尖（χ2=19.11，P<0.05）、头发形状（χ2=87.26，P<0.05）、眉毛（χ2=30.82，P<0.05）、眉弓（χ2=33.74，P<0.05）和眼裂高度（χ2=8.43，P<0.05）等，其他12项指标则不存在性别差异。  结论  新疆察布查尔县锡伯族成人容貌形态学体质显示了该地区特有的人类学特征，其形成原因可能与遗传、生活环境及生活习惯等多种因素有关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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不同年龄、性别新疆锡伯族、哈萨克族成人血清生化指标比较 尹金鹏 杨显国 徐国昌 赵旭林 刘荣志 库里那尔·托合达吾别克 2020 (3):  442-445.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.022 摘要 ( )   PDF(806KB) ( )   目的  探讨新疆锡伯族和哈萨克族人群血清生化指标随年龄及性别的变化规律及其差异，为相关疾病的预防提供依据。  方法  随机选择新疆维吾尔自治区某医院正常体检的新疆锡伯族和哈萨克族健康成人511人，其中新疆锡伯族252人，哈萨克族259人。使用美国Beckman生产的CX-7自动生化分析仪对血清生化指标进行检测，采用方差分析、t 检验、相关性分析和 χ2 检验进行统计学分析。 结果  新疆锡伯族和哈萨克族血清生化指标男性和女性谷丙转氨酶（GPT）、直接胆红素（DBil）、肌酐（Cre）、尿素(Ure)、尿酸(UA)、血糖(Glu)、总胆红素（TBil）、胱抑素C(Cys-C)均随年龄增长而增加，同性别各年龄组间差异均有统计学意义（Ｐ<0.05），同年龄段男性高于女性（Ｐ<0.05）；高密度脂蛋白（HDL）随年龄增长逐渐降低，低密度脂蛋白（LDL）、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)随年龄增长逐渐增高，同性别各年龄段之间差异有统计学意义（Ｐ<0.05）；TG、TC 和 LDL 在50岁以前各年龄组女性低于男性，HDL 女性高于男性（Ｐ<0.05），50岁以后无差异（Ｐ>0.05）。同性别同年龄段新疆锡伯族和哈萨克族的Glu、TG、TC、LDL和 HDL 差异有统计学意义（Ｐ<0.05）。  结论  不同年龄、不同性别新疆锡伯族和哈萨克族血清生化指标有差异；新疆锡伯族Glu、血脂水平与哈萨克族存在差异。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

细胞和分子生物学

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京尼平对缺氧/复氧损伤后大鼠心肌细胞凋亡及自噬的影响 罗学秀 刘剑 2020 (3):  361-366.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.008 摘要 ( )   PDF(7501KB) ( )   目的 探讨京尼平对缺氧/复氧(H/R)损伤后大鼠心肌细胞凋亡及自噬的影响。 方法 建立H/R损伤模型，体外培养的大鼠H9c2心肌细胞行缺氧12 h、复氧4 h。实验分为对照组（Con）、京尼平组(GE)、缺氧/复氧组(H/R)、缺氧/复氧+京尼平组(H/R+GE)。细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡，透射电子显微镜观察自噬体，Western blotting检测Bax、Bcl-2、P62、Beclin1、LC3-Ⅱ、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和p-mTOR蛋白的表达。 结果 京尼平预处理增强了H/R损伤后的H9c2心肌细胞活力,抑制细胞凋亡及自噬体累积，降低自噬结构断面积与细胞质断面积的比值。Western blotting结果显示，京尼平预处理减少了H/R损伤后Bax、LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白表达，增加Bcl-2、P62、p-Akt和p-mTOR蛋白表达。 结论 京尼平可以抑制H/R损伤后心肌细胞凋亡及自噬，其机制可能与上调Akt/mTOR信号通路有关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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双氢睾酮对大鼠原代卵泡颗粒细胞抗苗勒管激素表达的影响 王美玲 董玉婷 叶晓锋 黑常春 蔡玉芳 孔斌 赵承军 常青 2020 (3):  367-372.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.009 摘要 ( )   PDF(5712KB) ( )   目的  探讨双氢睾酮（DHT）对大鼠原代卵泡颗粒细胞抗苗勒管激素（AMH）表达的影响。  方法  从95只21 d SD雌性大鼠中提取颗粒细胞原代培养48 h后，先用HE染色检测细胞形态，卵泡刺激素受体（FSHR）细胞免疫荧光检测细胞纯度；然后根据干预方法和实验的不同，随机将细胞分为对照组（无药物干预）、10-8mol/L DHT组、10-5mol/L DHT组，2×10-5mol/ L蛋白激酶B(Akt)抑制剂（MK-2206 2Hcl）组和10-8mol/L DHT+2×10-5mol/L MK-2206 2Hcl组，分别使用相应浓度的试剂干预细胞3 h。干预完成后，细胞免疫荧光染色观察AMH表达的部位和变化；Western blotting测定不同组的AMH、Akt、p-Akt蛋白表达量。  结果 大鼠原代卵泡颗粒细胞的纯度为93.33%±3.09%，AMH表达在大鼠原代卵泡颗粒细胞膜和细胞质中；与对照组相比，10-8 mol/L DHT和10-5 mol/L DHT均可使颗粒细胞AMH表达增加（P<0.05），但这两个浓度的DHT对颗粒细胞AMH的表达影响差异无显著性（P>0.05）；与对照组相比，10-8 mol/L DHT可以使p-Akt、AMH表达升高，2×10-5 MK-2206 2Hcl使AMH表达降低（P<0.05）；与2×10-5MK-2206 2Hcl相比，10-8mol/L DHT+2×10-5 MK-2206 2Hcl处理组AMH表达升高（P<0.05）。  结论  DHT可以上调大鼠原代卵泡颗粒细胞AMH的表达，这种作用可能与Akt信号通路有关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾脏细胞自噬的影响及相关机制 张筠 丁婷 唐东兴 王建平 2020 (3):  373-377.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.010 摘要 ( )   PDF(982KB) ( )   目的 探讨雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠的肾脏细胞自噬的影响，并分析其相关分子机制。  方法  采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法构建糖尿病肾病大鼠模型。将30只SD大鼠依据随机数表法分为5组，对照组、模型组、0.1 mg/kg药物组、0.5 mg/kg药物组和1.0 mg/kg药物组，每组各6只。糖尿病肾病模型建立成功后，0.1 mg/kg药物组、0.5 mg/kg药物组和1.0 mg/kg药物组分别灌胃0.1、0.5和1.0 mg/kg雷公藤多苷，对照组和模型组给予等量的生理盐水。比较各组间肾功能、氧化应激指标的水平。采用Western blotting法检测各组间磷酸化-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白1轻链3β-Ⅰ（LC3-Ⅰ）、微管相关蛋白1轻链3β-Ⅱ（LC3-Ⅱ）及Beclin1蛋白表达水平。使用Real-time PCR技术检测各组间LC3及Beclin1 mRNA表达水平。 结果  与对照组比较，模型组尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、尿蛋白（Pro）及丙二醛（MDA）水平均升高，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）及过氧化氢酶(CAT)水平均明显降低，差异具有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，药物组BUN、Scr、Pro及MDA水平均明显降低，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）及CAT水平均明显升高（P<0.05），呈剂量依赖性。与对照组比较，模型组的肾组织p-mTOR蛋白表达水平升高，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及Beclin1蛋白表达水平降低，差异具有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，各剂量药物组p-mTOR蛋白表达水平降低，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平显著升高（P<0.05），呈剂量依赖性，0.5 mg/kg及1.0 mg/kg药物组Beclin1蛋白表达水平显著高于对照组（P<0.05）。与对照组比较，模型组的肾组织，LC3-Ⅱ及Beclin1 mRNA表达水平降低，差异具有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，各剂量药物组LC3及Beclin1 mRNA表达水平显著升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。  结论  雷公藤多苷对糖尿病性肾病大鼠肾功能具有一定的保护作用，其机制可能与抑制氧化应激和激活自噬功能有关。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

技术方法

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一种颈总动脉部分结扎-内膜新生模型的制备 姜志龙 姜悦 孙文清 陈小康 张又枝 2020 (3):  456-460.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.025 摘要 ( )   PDF(9832KB) ( )   目的  探讨一种左颈总动脉部分结扎后诱导血管重构（内膜新生）的方法。  方法  8周龄雄性C57BL/6 J小鼠40只，随机分为6组：正常组（WT）、假手术组（sham）、术后4周、8周、10周和12周组。手术结扎左颈总动脉（LCA）远心端4个分支中的颈内、颈外和枕动脉，保留甲状腺上动脉，造成左颈总动脉血管内膜新生和血管重构。术后观察小鼠体重和饲料的消耗情况；HE染色观察血管形态学变化；天狼猩红染色观察血管胶原纤维聚集情况。  结果  除正常组小鼠外，其他组小鼠术后1～2 d体重和饮食量均降低，第3天开始上升，假手术组小鼠第2天开始上升；HE染色表明，假手术组和正常组小鼠LCA均未形成新生内膜，部分结扎手术后4、 8、10和12周组小鼠LCA均出现内膜和中膜层的增厚、管腔狭窄等。右侧未结扎的颈总动脉无内膜增厚，但出现了管腔增大；天狼猩红染色显示，内膜和中膜增生部分有胶原积聚。  结论  左颈总动脉部分结扎可以建立小鼠动脉内皮损伤模型并伴有明显的内膜新生。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

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苏丹黑B降低大鼠肠道自发荧光及其在免疫荧光染色中的应用 李勇 周立 张阳 刘震 姚念 申凤鸽 王志勇 2020 (3):  450-455.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.03.024 摘要 ( )   PDF(20678KB) ( )   目的  探讨降低大鼠肠道组织自发荧光的简便可行方法。  方法  取正常SD大鼠（n=5）肠道做冷冻切片，荧光显微镜下观察自发荧光（AF），检测苏丹黑B（SBB）对AF的影响及其在肠道免疫荧光（IF）染色中的应用。 结果  大鼠各肠段组织在FITC和TRITC通道存在大量明显的AF，且不受血清封闭的影响；应用0.3% SBB处理组织10 min，可显著降低AF；IF染色加SBB处理后的肠道可见AF显著降低，目的蛋白的荧光表达不受影响。  结论  0.3% SBB染色10 min能显著降低大鼠肠道组织的AF，使IF特异性染色更加鲜明。 参考文献 | 相关文章 | 计量指标