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    解剖学
    经耳前颞叶底入路显露中颅底和岩斜区的便携式视频显微解剖
    阮彩莲* 杨延庆 薛涛 谢圆媛
    2016 (4):  507-509.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.012
    摘要 ( )  

    目的 探讨经耳前颞叶底入路显露中颅底和岩斜区的便携式视频显微解剖特点。 方法 分别选取新鲜成人尸头标本3例和灌注固定成人尸头标本3例为研究对象,标本均经耳前颞叶底入路,采用便携式视频显微镜解剖并观察中颅底和岩斜区。 结果 便携式视频显微镜能清楚地暴露中颅底和岩斜区。颞叶底硬脑膜外探查结果显示,岩骨表面为弓状隆起,前内侧为鼓索支,抬起颞叶底面,能够清楚地看到中颅窝底和小脑幕。分离蛛网膜后,暴露蝶鞍旁结构,可以清楚地看到Labbé 静脉。在脑干外侧面,动眼神经、基底动脉以及滑车神经等均能清晰显示。 结论 采用便携式视频显微镜经耳前颞叶底入路能够完成显微解剖。

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    人类学
    精氨酸加压素基因多态性在广西人群中的分布
    向阳 郭静 蓝艳 罗宏成 黄华佗 韦叶生*
    2016 (4):  528-533.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.016
    摘要 ( )  

    目的 探讨精氨酸加压素(AVP)基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs2282018、rs3787482和rs1887854在303例广西人群中的分布,并对比不同族群间AVP基因型及等位基因频率分布的差别。 方法 采用单碱基延伸的聚合酶链反应(PCR)技术和DNA测序法,检测303例广西人AVP基因多态性,分析广西人群3个位点的基因型和等位基因的分布频率,并与人类基因组计划(HapMap)公布的欧洲人、中国北京汉族人、日本人和非洲人的基因多态性分型数据比较,分析这5个人群人类的基因型及等位基因的分布频率。 结果 我国广西人群AVP基因rs2282018、rs3787482及rs1887854位点各自具有3种基因型,基因型和等位基因分布与性别无关。与人类基因组计划(HapMap)公布的欧洲人、非洲人、日本人和中国北京人的单核苷酸多态性分型数据进行比较,广西人群AVP基因不同多态性位点的基因型和等位基因频率在不同地区人群的分布存在差异。 结论 广西地区人群中存在AVP基因多态性。广西人群AVP基因多态性的分布频率与其他不同地区种族人群比较存在差异。

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    雄激素受体基因CAG、GGN重复片段多态性与身体质量指数/腰臀比的关联性
    张钏 陆宏 裴利国 郝胜菊 闫有圣 郑雷 党洁 霍正浩*
    2016 (4):  534-538.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.017
    摘要 ( )  

    目的 探讨雄激素受体基因CAG、GGN重复片段多态性与身体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)之间的关联性。方法 研究对象来自宁夏医科大学2011级健康学生共 654 例, 男性280例,女性374例,平均年龄(20.35±1.24)岁。用ABI 3730XL测序仪测定AR基因的(CAG)n及(GGN)n重复数目,直接测量法测得身高、体重、腰围与臀围。 结果 BMI与WHR的分布存在性别差异。较长GGN等位基因与女性BMI呈正相关(P<0.05),AR基因的(CAG)n与女性BMI无相关性(P>0.05);男性AR基因的(CAG)n及(GGN)n与BMI及WHR无相关性(P>0.05)。 结论 BMI与WHR在不同性别间的分布存在差异性;较长GGN等位基因与女性BMI存在关联性。

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    甘肃裕固族成人脂肪分布及变化特点分析
    杨涛海向军 何烨 汪玉堂 马卫红 何进全 马斌 苏露
    2016 (4):  539-543.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.018
    摘要 ( )  

    目的 探讨甘肃裕固族成人脂肪分布及变化特点,为该民族人群健康指导及相关疾病的研究提供参考。 方法 采用分层整群随机抽样方法,应用生物电阻抗体成分分析仪测量1086 例甘肃裕固族成人,其中男性336例,女性720例的脂肪相关体成分指标。 结果 甘肃省裕固族成年女性的总脂肪量、皮下脂肪含量、躯干及四肢脂肪量均高于男性 (P<0.01);内脏脂肪含量无显著性差异 (P>0.05)。不同年龄段身体各脂肪含量男、女性比较,女性的总脂肪量、躯干脂肪量、四肢脂肪量、皮下脂肪量均高于男性(P<0.01),内脏脂肪含量比较差异无显著性(P>0.05);裕固族成人体脂含量随年龄的增长均呈上升趋势,20~29 岁年龄段到 40~49 岁年龄段前期为快速增长期,在60~69岁年龄段达到峰值后呈缓慢下降,双下肢脂肪含量在40~49岁年龄段达峰值,女性脂肪含量上升趋势和下降趋势较男性均更为显著。 结论 甘肃省裕固族成人内脏脂肪含量无性别差异,其余各部位脂肪量女性均高于男性;甘肃裕固族成年人总脂肪量和身体各部位脂肪含量随着年龄增长总体呈上升趋势,之后在 60~69岁年龄段后期开始下降。

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    额济纳土尔扈特人的人体测量学特点
    李咏兰* 廉伟
    2016 (4):  544-550.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.019
    摘要 ( )  

    目的 探讨额济纳土尔扈特人的体质特征。 方法 遵循《人体测量方法》,于2015年9月在额济纳旗达来呼布镇测量了土尔扈特人196例(男84例,女112例)体质数据。 结果 额济纳土尔扈特人多具上眼睑皱褶,有蒙古褶略低于50%,眼裂高度、鼻根高度、鼻翼高多为中等型,眼裂倾斜度多为眼外角高于眼内角,直鼻背,颧骨体发达,唇薄,眼褐。额济纳土尔扈特人男为高身材,女为超中等身材。主成分分析结果表明,与中国北方13个族群相比,额济纳土尔扈特男性身材高大,躯干宽阔,面的宽度大,头较长且宽,鼻较高且宽。土尔扈特女性鼻高、形态面高的高度中等,鼻很宽,口裂窄、唇薄。内蒙古额济纳土尔扈特人与新疆巴州土尔扈特人体质存在较明显的不同。土尔扈特人男性身体质量指数(BMI)均值已经达到肥胖的下限,女性BMI均值已经接近超重的上限。 结论 土尔扈特人具有蒙古人种北亚类型的体质特征,在中国北亚类型族群中土尔扈特人较为肥胖。

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    蒙古族大学生骨质状况及其相关影响因素分析
    白静雅 海向军 汪玉堂 何进全 马斌 何烨*
    2016 (4):  551-556.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.020
    摘要 ( )  

    目的 通过查体和调查问卷分析蒙古族大学生骨质状况及其相关影响因素。方法 使用GE EXPRESSⅡ超声骨密度测量仪对919名20~23岁蒙古族大学生(其中男生403名,女生516名)进行骨强度指数测量,采用问卷调查其生活方式,并通过计算T值评估其骨质状况。 结果 蒙古族大学生骨强度指数以及骨质正常率均表现为随年龄增加先升高后降低的趋势。蒙古族男生骨强度指数高于女生,但是蒙古族女生骨质正常率高于男生,其中各年龄组以及城镇、乡村各组间,蒙古族女生均未发现骨质疏松。Logistic回归分析显示,吸烟情况、锻炼情况为蒙古族大学生骨质异常的主要影响因素。与其他民族、地区的大学生比较发现,蒙古族男生骨强度指数较高,而蒙古族女生骨强度指数较低,且蒙古族男女大学生骨质状况差异无统计学意义。 结论 蒙古族大学生骨质状况良好,加强运动,减少吸烟可改善骨质状况。

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    神经生物学
    #br# AKT-糖原合成激酶-3β信号通路对SOD1G93A 突变N2a细胞的保护作用
    陈燕春 管英俊* 刘永新 周风华刘焕彩王巧真马晓君赵春艳
    2016 (4):  433-441.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.001
    摘要 ( )  

    目的  探讨AKT-糖原合成激酶-3β(GSK-3β)信号通路对SOD1G93A突变N2a细胞的作用及机制。 方法 选取小鼠成神经瘤细胞系N2a,分别转染pEGFP-WT-SOD1和pEGFP-G93A-SOD1质粒,应用Western blotting和免疫荧光染色方法检测AKT、GSK-3β和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在细胞模型中的表达变化。应用RT-PCR和Western blotting技术检测siRNA沉默AKT后GSK-3β和cyclin D1在SOD1突变N2a细胞中的表达变化,通过MTS方法,检测细胞增殖和存活的改变。 结果 与pEGFP-WT-SOD1转染的N2a细胞比较,pEGFP-G93A-SOD1转染的N2a细胞中AKT及GSK-3β总蛋白在转染后24 h和48 h表达均无明显变化,p-AKT(Ser473)、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1表达均升高。免疫荧光染色结果显示,转染后24 h和48 h,p-AKT(Ser473)、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1在pEGFP-G93A-SOD1转染的N2a细胞中表达均升高。应用siRNA沉默AKT后与对照组相比,在转染后48 h和72 h,AKT、p-AKT(Ser473)、GSK-3β、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1蛋白均降低。MTS实验结果显示,在AKT沉默后72 h、96 h、120 h,N2a细胞增殖和活力降低。 结论 SOD1G93A突变影响N2a细胞中AKT、GSK-3β翻译后磷酸化修饰及cyclin D1的表达,AKT可能通过调控GSK-3β和cyclin D1影响SOD1 G93A突变N2a细胞的增殖和存活。

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    中药神经生长液对帕金森病模型鼠的治疗作用
    姜文霞 张新化 吕广明 顾晓松*
    2016 (4):  442-448.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.002
    摘要 ( )  

    目的 探讨中药神经生长液对百草枯(PQ)诱导的帕金森病(PD)模型鼠的治疗作用。 方法 成年雄性SD大鼠40只,随机分为阴性对照组( n=10)、PQ模型组(n=10)、多巴丝肼片(美多芭)治疗组(n=10)、中药治疗组(n=10)。腹腔注射PQ制备PD模型,通过灌胃的方法对模型进行中药和美多芭治疗,以生理盐水为对照。治疗前后通过转棒实验、旷场实验和滚筒实验检测大鼠行为学变化,并记录大鼠的体重;采用酪氨酸羟化酶(TH)免疫染色检测中脑黑质多巴胺能神经元,计数并进行统计学分析。 结果 1.模型制作后,与阴性对照组相比,模型动物体重显著降低(P<0.001)。然而,随着时间的延长,大鼠的体重不断增加,各组之间差异无显著性(P>0.05)。2.行为学检测结果显示,模型动物的转棒时间和滚筒时间较阴性对照组显著减少,旷场实验中的运动路程减少、静止时间延长,差异具有统计学意义(P<0.001)。灌胃1周后中药组和美多芭组在转棒实验、旷场实验和滚筒实验较模型组均有好转,差异具有统计学意义(P<0.001或P<0.01)。灌胃2周后中药组和美多芭组在转棒实验和旷场实验的路程比模型组显著增加,旷场实验中的静止时间比模型组显著减少,差异具有统计学意义(P<0.001)。3.免疫组织化学结果显示,灌胃1周时中药组TH阳性细胞数与阴性对照组相比减少(P<0.05),但与模型组相比显著增加(P<0.001),与美多芭组相比明显增加(P<0.01);灌胃2周的中药组与模型组相比,TH阳性细胞数显著增加(P<0.001),与美多芭组相比有所增加(P<0.05)。4.免疫荧光结果显示,中药组的TH阳性细胞数和细胞形态比模型组和美多芭组要多且完整,纤维多且长,与阴性对照组差异无显著性。 结论 中药神经生长液对PQ诱导的PD模型鼠有一定的治疗作用。

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    早期应激对小鼠纹状体神经元发育的影响
    许本柯 苗莹莹孙安邦 何云 刘洋 陈运才*
    2016 (4):  449-455.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.003
    摘要 ( )  

    目的 探讨早期应激对背侧纹状体多棘神经元发育的影响。 方法 通过改变新生小鼠(出生后第2~9天)的生长环境建立早期应激动物模型,采用原位杂交、Golgi染色和体视学分析方法,定量分析应激小鼠背内侧纹状体和背外侧纹状体内神经元胞体、树突和树突棘的改变。 结果 9d龄C57BL/6J小鼠的纹状体神经元含丰富的树突分支和树突棘。持续7d的应激主要影响背外侧纹状体,表现为纹状体神经元的近胞体树突分支增多(应激组9.50±0.38,n=8;对照组6.50±0.23, n=6;P<0.05),树突分支上含大量丝状伪足(每20 μm树突节段:应激组8.15±0.51,n=8;对照组3.85±0.33,n=6;P<0.05),但树突棘数量减少(每20 μm树突节段:应激组12.05±0.91,n=8;对照组20.02±0.73,n=6;P<0.05)。 结论 早期应激主要干扰背外侧纹状体神经元树突的发育,导致树突棘的成熟延缓。

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    甘油二酯激酶γ参与大鼠胚胎脑神经上皮细胞的发育
    牛宝贝 崔慧林* 曹锡梅 师亮 马晋峰 乔从进
    2016 (4):  456-461.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.004
    摘要 ( )  

    目的 探讨甘油二酯激酶γ(DGKγ)在大鼠胚胎脑神经上皮发育中的作用及可能机制。 方法 18只胎龄(E)11.5、E12.5、E14.5、E16.5、E18.5大鼠胚胎用于Western blotting方法检测DGKγ在大鼠胚胎脑组织的表达,E9.5~E18.5大鼠胚胎各5只用于免疫组织化学和免疫荧光染色方法检测DGKγ在大鼠胚胎脑的分布以及DGKγ与Ki67、乙酰胆碱转移酶(ChAT)及酪氨酸羟化酶(TH)的细胞内共定位。 结果 DGKγ蛋白含量在E11.5~E14.5表达逐渐增多,E16.5表达较E14.5显著减少,E18.5表达显著增多且高于E14.5水平。E10.5~E12.5,DGKγ在脑泡壁出现表达,并随着脑泡的发育表达在端脑、除大脑脚外的中脑、后脑和末脑;E13.5~E14.5,DGKγ的强阳性表达从海马及周围的新皮质、苍白球、嗅脑和大脑脚阳性延伸到除新皮质外的脑的各区域;E15.5至出生前,DGKγ在新皮质阳性表达增强,但在大脑脚和脑桥表达减弱。免疫荧光染色显示,E14.5,与海马和苍白球相比,嗅脑的DGKγ阳性细胞中Ki67阳性率较高(87%),ChAT 阳性率较低(9%)(均P<0.05),中脑顶盖的DGKγ阳性细胞中62%为TH阳性;E16.5,新皮质的DGKγ阳性细胞中Ki67阳性率为26%,较E14.5时(49%)显著降低(P<0.05),ChAT阳性率为70%,较E14.5时(45%)显著增高(P<0.05);DGKγ多位于神经上皮细胞的胞质,也可见于胞膜上,或者同时位于胞质和胞核。
    结论 DGKγ在胚胎脑的表达模式和亚细胞分布,提示其参与了胚胎脑神经上皮的增殖、迁移和分化后神经元的发育。

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    桉叶油联合维甲酸对SD胎鼠脑组织Pax3和缝隙连接蛋白43表达的影响
    苏丽莉 余永莉* 陈默张彬渝 陈涛 刘茂生 张裕
    2016 (4):  462-468.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.005
    摘要 ( )  

    目的 探讨桉叶油联合维甲酸(RA)对SD胎鼠脑组织转录因子Pax3、缝隙连接蛋白43 (Cx43)表达的影响。 方法 SD孕鼠42只,随机分为6组,每组7只,正常对照组, RA组,溶剂对照组(花生油+RA),3个实验组(桉叶油高、中、低剂量+RA)。正常对照组自由摄食饮水,溶剂对照组于孕第7~14天每只花生油2ml灌胃,每天1次,孕第10天40mg/kg RA灌胃1次。桉叶油3个剂量组于孕第7~14天分别桉叶油300、200和100mg/kg灌胃,每天1次,孕第10天40mg/kg RA灌胃1次。RA组于孕第10天40mg/kg RA灌胃1次。各组于孕21天处死孕鼠取胚胎,Western blotting、免疫组织化学技术检测胎鼠脑组织的Pax3、Cx43蛋白的表达。Realtime PCR检测脑组织Pax3、Cx43 mRNA表达。阿利新蓝和茜素红进行骨骼染色,体视显微镜下观测椎骨发育,脊柱间隙。 结果 维甲酸灌胃各组胎鼠椎骨数量异常的胎鼠数与正常对照组比较差异无显著性,但在维甲酸灌胃各组中,胎鼠椎骨形态异常的异常率和胎鼠椎骨分裂的百分率最低值分别为55%(桉叶油高剂量+RA组)和45.8%(桉叶油低剂量+RA组),较正常对照组高(0)(P<0.05)。在维甲酸灌胃各组中,桉叶油各组胎鼠椎骨形态异常的异常率和胎鼠椎骨分裂的百分率最高值分别为62.5%(桉叶油低剂量+RA组)和55.0%(桉叶油高剂量+RA组),较维甲酸组(73.7%,73.7%)和溶剂对照组低(68.2%,63.6%,P<0.05)。与正常组胎鼠比较,维甲酸灌胃各组大脑组织的Pax3、Cx43蛋白及其mRNA的表达较正常组高(P<0.05),在维甲酸灌胃各组中,桉叶油灌胃各组胎鼠脑组织Pax3、Cx43蛋白及其mRNA的表达较单纯RA灌胃组低,其差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 桉叶油对维甲酸引起胎鼠神经管缺陷有一定的拮抗作用。其机制可能与桉叶油拮抗维甲酸上调胎鼠神经组织的Pax3、Cx43蛋白过度表达有关。

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    细胞和分子生物学
    β淀粉样蛋白25~35 对PC12细胞骨架的毒性作用
    曹晶晶 范文娟 石贞玉 鄢明超 刘红亮 王来 邓锦波*
    2016 (4):  469-475.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.06
    摘要 ( )  

    目的 建立阿尔茨海默病(AD)的细胞模型,并探讨β淀粉样蛋白25~35(Aβ 25~35)对细胞骨架的神经毒性机制。 方法 采用MTT法检测不同浓度的Aβ 25~35 对PC12细胞存活率的影响,应用4’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法和TUNEL法检测细胞凋亡,免疫细胞化学法和鬼笔环肽(phalloidin)染色观察细胞骨架的形态变化。 结果 Aβ 25~35经过“老化”处理后,可以明显引发PC12细胞死亡,导致PC12细胞发生凋亡,并具有剂量依赖性(P<0.05)。Aβ 25~35也可以引起细胞骨架解体,同样具有剂量依赖性(P<0.05)。 结论 PC12细胞的细胞骨架对Aβ25~35的神经毒性非常敏感,细胞骨架的解体很可能是AD重要的病理学改变,同时Aβ是AD发病机制的关键分子。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    β-神经生长因子基因克隆和诱导表达及其对PC12细胞的诱导分化作用
    高杰 严会文 李红 黄悦 胡蓉 苏敏*
    2016 (4):  476-481.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.007
    摘要 ( )  

    目的 构建β-神经生长因子(β-NGF)慢病毒表达载体pLVX-TRE3G-IRES-β-NGF,应用Tet-on 3G四环素诱导表达系统,探讨β-NGF在人胚肾(HEK293FT)细胞中的过表达情况,及其对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞分化的影响。方法 从SD大鼠脑组织提取总RNA,反转录成cDNA,利用分子生物学技术,克隆鼠β-NGF基因完整编码区,将β-NGF基因定向插入载体pLVX-TRE3G-IRES中。将重组载体pLVX-TRE3G-IRES-β-NGF和载体pLVXTet3G分别转染空白HEK293FT细胞,制备收获慢病毒,共转染HEK293FT细胞,同时用不同剂量强力霉素(Dox)诱导NGF表达(分为未转染组、0、100、500和1000μg/L Dox诱导表达组)。48h后收集细胞,免疫印迹法(Western blotting)检测各组细胞内βNGF表达情况。同时收集培养上清,1. ELISA检测各组上清内β-NGF的分泌量; 2. 制作条件培养基,加入PC12细胞培养基中进行诱导培养,观察PC12细胞诱导分化情况。 结果 双酶切和测序鉴定重组质粒pLVX-TRE3G-IRES-β-NGF序列和方向正确;β-NGF在转染细胞内被诱导表达,随着Dox剂量增加,表达量增强;β-NGF在培养基的上清内表达,表达量随Dox剂量增加而增多。诱导表达的条件培养基可诱导PC12细胞形态改变,表达神经元特异性烯醇化酶(NSE)蛋白。 结论 成功重组慢病毒载体 pLVX-TRE3G-IRES-β-NGF, 转染后β-NGF基因能够在HEK293FT细胞中表达和分泌,且该蛋白具有诱导PC12细胞向神经元样细胞分化的能力;运用Tet-On 3G四环素诱导表达系统,可成功诱导表达获得不同剂量β-NGF蛋白。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    大蒜素对氧糖剥夺再灌注致PC12细胞损伤的保护作用及抗氧化应激机制
    王建中* 史杰 邓同兴
    2016 (4):  482-486.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.008
    摘要 ( )  

    目的 探讨大蒜素(AL)保护氧糖剥夺再灌注(OGD/RP)致PC12细胞损伤的抗氧化应激机制。 方法 采用无糖的Earle’s平衡盐溶液加缺氧法复制氧糖剥夺再灌注致PC12细胞损伤模型,同时给予不同浓度的大蒜素进行干预。采用MTT法检测细胞存活率;化学比色法测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率;Hoechst 33342染色法检测大蒜素对细胞凋亡的影响,并计算凋亡率;生化法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性或含量;RT-PCR和Western blotting分子生物学方法检测氧化应激相关因子SOD、肿瘤坏死因子(TNF-α)、 过氧化氢酶(CAT)mRNA和蛋白的表达。结果 与正常对照组比较,OGD/RP模型组PC12细胞存活率下降,LDH漏出率、细胞凋亡率明显升高;细胞SOD、GSH-Px活性明显降低,MDA含量明显升高;细胞SOD、CAT mRNA及蛋白表达明显下降,TNF-α mRNA及蛋白表达明显增加。与模型组比较,大蒜素(60、30mg/L)可显著升高OGD/RP PC12细胞的存活率,降低凋亡率和LDH漏出率;大蒜素(60、30mg/L)可显著升高OGD/RP PC12细胞SOD、GSH-Px活性,减少MDA含量;大蒜素(60mg/L)可明显升高OGD/RP PC12细胞SOD、CAT mRNA及蛋白表达,降低TNF-α mRNA及蛋白表达。 结论 大蒜素对OGD/RP 致PC12细胞损伤具有保护作用,其机制与抗氧化应激有关。

    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    组织学胚胎学发育生物学
    α1,3半乳糖转移酶基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪心、肺解剖学与组织学的比较
    韩晓娜 曾国敏2杨阳 潘登科* 杜晓华*
    2016 (4):  510-515.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.013
    摘要 ( )  

    目的 探讨α1,3半乳糖转移酶(GGTA1)基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪心、肺解剖学与组织学发育变化的异同。 方法 选取GGTA1基因敲除巴马克隆猪2头(BM164和BM155)及核供体巴马猪1头(BMM2),利用大体解剖学和常规石蜡切片HE染色技术,对其心脏和肺脏进行解剖学与组织学比较研究。 结果 核供体成年健康巴马猪心脏呈倒置圆锥形,前缘凸,后缘短而直,心表面冠状沟和左右纵沟清晰可见;心壁结构完整,可分3层,心内膜较薄,心室内膜下有较多浦肯耶纤维,心肌排列紧密,横纹清晰,闰盘少且不清楚,心外膜较厚,无髓神经纤维明显。GGTA1基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪相比较,心脏在解剖学与组织学构造上均未见明显差异。核供体成年健康巴马猪肺脏呈粉红色海绵状,质软而轻,富有弹性;肺脏小支气管软骨丰富,黏膜下层内气管腺明显,可见炎性细胞,细支气管黏膜皱褶呈指状向管腔凸起,周围有炎性细胞浸润,肺泡大小较一致,肺泡壁较厚,尘细胞少见。GGTA1基因敲除巴马克隆猪肺脏解剖学与组织学结构与核供体巴马猪基本一致。 结论 GGTA1基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪心、肺解剖学构造无明显差异,组织学结构正常,心、肺发育良好。

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    麻黄素对小鼠心肌组织结构和总抗氧化能力、过氧化氢酶活力的影响
    刘婷婷彭静 李重阳 俞诗源*
    2016 (4):  516-520.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.014
    摘要 ( )  

    目的 探讨麻黄素对小鼠心肌组织的毒性影响。 方法 60只小鼠随机分为麻黄素组和对照组,每组各30只,用递增剂量腹腔连续注射麻黄素溶液(0.0315 g/kg、0.0477 g/kg、0.0564 g/kg)和等量的生理盐水15d(每天两次,每次0.2ml),称量检测小鼠体重和心重的变化,用生物显微技术观察心肌组织结构的变化,用比色法检测血浆肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和心肌组织总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)活力及丙二醛(MDA)含量的变化。 结果 麻黄素组小鼠体重和心重均低于对照组,小鼠心肌组织出现不同程度的损伤,心肌细胞排列紊乱,闰盘间隙增宽,心肌纤维断裂;麻黄素组小鼠血浆CK、CK-MB活性高于对照组 (P<0.01),心肌组织T-AOC和CAT的活性降低 (P<0.05或P<0.01),MDA含量则升高 (P<0.01)。结论 麻黄素影响小鼠心肌组织结构,可能与心肌组织抗氧化酶活性降低和丙二醛含量升高有关。

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    麻黄素对小鼠肺组织结构的影响
    彭静 李重阳 刘婷婷 俞诗源*
    2016 (4):  521-528.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.015
    摘要 ( )  

    目的 探讨麻黄素对小鼠肺组织的影响。 方法 60只小鼠随机分为麻黄素组和对照组,采用递增剂量腹腔连续注射麻黄素溶液(0.0315 g/kg、0.0477 g/kg、0.0564 g/kg)和等量生理盐水15d(每天两次,每次0.2ml),用比色法检测各组小鼠肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量及血浆髓过氧化物酶(MPO)活性的变化,用苏木素-伊红染色法观察肺组织结构的变化,用免疫组织化学法检测肺组织c-Fos蛋白和Caspase-3蛋白表达的变化。
    结果 麻黄素组小鼠肺组织SOD、CAT活性5d时暂时升高,10d、15d时显著降低,MDA含量5d时暂时降低,10d、15d时显著升高;血浆MPO活性显著升高,肺组织病理损伤明显,肺泡直径和肺泡隔厚度显著增大,放射状肺泡数(RAC)明显减小;肺组织c-Fos、Caspase-3蛋白阳性表达的平均吸光度值明显增强。 结论 麻黄素可加重机体炎症反应,影响小鼠肺组织抗氧化酶活性,诱导肺组织细胞凋亡,导致小鼠肺的组织结构和功能受损。

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    技术方法
    基于3ds Max 技术内耳模型的3D打印
    石冰涛* 刘锦
    2016 (4):  572-574.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.023
    摘要 ( )  

    目的 利用3ds Max软件制作内耳模型,然后用熔融沉积型3D打印机进行内耳模型打印。 方法 首先用3ds Max软件以网格化修饰构建内耳模型,经Repetier-Host软件处理后利用熔融沉积型3D打印机进行打印。 结果 利用3ds Max软件制作的内耳模型可以通过熔融沉积型3D打印机打印内耳解剖模型,并能清晰显示内耳的解剖结构。 结论 将3ds Max技术与熔融沉积型3D打印机相结合进行人体解剖模型打印可以成功打印出人体解剖模型。

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    肿瘤生物学
    膜联蛋白A5低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响
    王小杰 杨艳杰 田焕娜 梁秀军 陈龙 李欣*
    2016 (4):  487-492.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.009
    摘要 ( )  

    目的 探讨膜联蛋白A5 (ANXA5)低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。 方法 将细胞分为干扰组、阴性对照组、转染试剂对照组和空白对照组,采用脂质体转染法将siRNA转染干扰组HeLa细胞,在转染72h后采用RT-PCR和Western blotting检测各组ANXA5的表达以鉴定抑制效率;细胞划痕实验检测各组HeLa细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组HeLa细胞的侵袭能力;RT-PCR和Western blotting分别检测ANXA5低表达对E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA及蛋白表达的影响。 结果 干扰组ANXA5蛋白及mRNA的表达均明显低于阴性对照组(P<0.05);其表达均被显著抑制,干扰组细胞的迁移及侵袭能力比阴性对照组明显增强(P<0.05),E-cadherin mRNA及蛋白的表达显著低于阴性对照组(P<0.05);干扰组MMP-9 mRNA及蛋白的表达均显著高于阴性对照组(P<0.05)。 结论 靶向ANXA5的siRNA可有效抑制ANXA5的表达,且ANXA5低表达可能通过影响E-cadherin和MMP-9的表达来促进HeLa细胞的迁移和侵袭能力。

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    黄芪多糖联合顺铂对小鼠Lewis肺癌细胞肺转移的影响
    明海霞陈彦文 张帆 王强 李杨郭超 胡永浩*
    2016 (4):  493-501.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.010
    摘要 ( )  

    目的 观察黄芪多糖(APS)联合顺铂(DDP)对小鼠Lewis肺癌细胞肺转移、核因子(NF)-κB、P38、P53及Caspase-9表达的影响。方法 将90只Lewis小鼠随机分为模型组、顺铂组(6mg/kg DDP)、APS组(50、100、200)mg/kg,联合用药组[1/2 DDP+APS,即:(3+25、3+50、3+100)mg/kg]。各组均于造模第2天起用药,APS每日1次,DDP每周1次,连续20d。观察肿瘤肺转移情况,采用Real-time PCR法和Western blotting法检测肿瘤组织中NF-κB、P38、P65蛋白和基因,并用免疫组织化学检测Caspase-9的表达。 结果 与模型组相比,各治疗组均可降低肺转移灶数目(P<0.05或P<0.01);除P38外,APS中、高剂量组可使小鼠Lewis肺癌组织中NF-κB p65、P53表达降低,Caspase-9表达增高;联合用药高剂量组作用则接近DDP组。结论 APS可抑制小鼠Lewis肺癌细胞的转移,抑制NF-κB和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的激活,这可能是其抑制肿瘤转移的机制之一;APS与减半剂量的DDP铂类化疗药物联合使用时,作用增强,APS对DDP有增效减毒作用。

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    RNAi靶向沉默对人卵巢癌OVCAR3细胞CD105和Ki67基因表达的影响
    郭海荣 王晓燕 贺帅 刘萍*
    2016 (4):  502-506.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.011
    摘要 ( )  

    目的 探讨RNAi靶向沉默对人卵巢癌OVCAR3细胞CD105和Ki67基因的表达。 方法 采用脂质体介导的基因法将不同浓度的CD105-siRNA、 Ki67-siRNA转染至体外培养的人卵巢癌OVCAR3细胞中,检测干扰前后人卵巢癌细胞中CD105、Ki67基因表达的变化以确定沉默效果。构建CD105-siRNA、Ki67-siRNA及各自的阴性对照序列并高效地转染人卵巢癌OVCAR3细胞,采用Western blotting和Real-time PCR从蛋白和基因水平检测CD105和Ki67的表达变化。 结果 转染CD105-siRNA或Ki67-siRNA终浓度为50nmol/L和100nmol/L的人卵巢癌细胞中CD105mRNA或Ki67mRNA的相对表达水平及CD105和Ki67的表达均明显低于空白对照组和阴性对照组(NC1),差异具有统计学意义(P<0.001)。 结论 CD105-siRNA和Ki67-siRNA能特异性抑制人卵巢癌OVCAR3细胞中的CD105和Ki67基因表达,下调mRNA和蛋白的表达水平。

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    生物工程学
    去细胞人羊膜基质的制备及免疫原性
    路欣 袁洁 郭昕悦 李卫红 尚宏伟 张立新 黄晓武 张海燕*
    2016 (4):  557-562.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.021
    摘要 ( )  

    目的 制备去细胞人羊膜基质(AHAM)并分析其移植至小鼠体内后的免疫反应,评价去细胞人羊膜基质作为细胞移植支架的免疫原性。 方法 利用胰蛋白酶-EDTA消化人羊膜(HAM),去除人羊膜上皮细胞,制备新鲜去细胞人羊膜基质;新鲜去细胞人羊膜基质置于含硫酸软骨素及甘油的冷冻保护液中,-80℃保存;使用前经PBS复水处理后即冷冻去细胞人羊膜基质;免疫细胞化学分析去细胞人羊膜基质中人类白细胞抗原的表达情况;将冷冻的去细胞人羊膜基质移植至BALB /c小鼠肝脏内4周后,分析脾脏组织中CD4+ 、CD8+T淋巴细胞比例的变化。 结果 新鲜及冷冻保存后的去细胞人羊膜基质均不表达人类白细胞抗原;冷冻的去细胞人羊膜基质移植至小鼠体内后,脾脏组织中CD4+ 、CD8+T淋巴细胞无明显变化。 结论 去细胞人羊膜基质的免疫原性较低,移植后不会引起由T细胞介导的特异性排斥反应,可以作为免疫安全性的生物支架用于疾病的细胞移植治疗。

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    GZMA、GZMB、TSP-1、TLR和IL-1 5条细胞凋亡通路基因在肝再生中的表达变化
    邢雪琨 刘振华 李梦华 徐存拴*
    2016 (4):  563-571.  doi: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.04.022
    摘要 ( )  

    目的 探讨颗粒酶A(GZMA)、颗粒酶B(GZMB)、血小板反应蛋白-1(TSP-1)、Toll样受体(TLR)和白细胞介素-1(IL-1)5条细胞凋亡通路基因在肝再生(LR)过程中的表达变化。 方法 大鼠随机分为33组,每组6只,用Rat Genome 230 2.0 芯片检测大鼠部分肝切除(PH)后不同恢复时间点5条细胞凋亡通路基因的表达情况,采用Real-time PCR和Western blotting技术对芯片结果进行验证,并用生物信息学方法对凋亡通路基因在肝再生中的表达变化进行分析。 结果 Real-time PCR和Western blotting均与Rat Genome 230 2.0芯片的检测结果趋势一致;GZMA、GZMB、TSP-1、TLR和IL-1 5条细胞凋亡通路中9、8、24、31和34个基因与肝再生相关。它们主要在肝再生启动阶段起始表达,在细胞增殖阶段表达的基因数最多。表达的相似性分为均上调、上调占优势、均下调、下调占优势、上调和下调相近等5类,大多数基因表达加强,少数基因表达降低。它们表达的时间相关性分为13组。基因协同作用模型(Et)分析表明,GZMA介导的细胞凋亡通路在肝再生后期促进细胞凋亡;TLR介导的细胞凋亡通路几乎均在整个肝再生中促进细胞凋亡;GZMB、TSP-1和IL-1介导的细胞凋亡通路可能在肝再生中不发挥细胞凋亡作用。结论 GZMA和TLR两条通路调控肝再生中的细胞凋亡。

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